竹红菌甲素荧光光谱的环境效应

竹红菌甲素(简称HA)是从竹红菌中提取的一种光敏色素,属于苝醌的衍生物,它对许多皮肤病都有显著的光疗作用。最近发现HA能杀死肿瘤细胞并富集在肿瘤组织处(傅乃武未发表的结果),虽然刘景瑤等管对它的荧光光谱作过研究,但还有许多问题有待于进一步的探讨。本文详细研究了环境对HA荧光光谱的影响,这有助于了解不同环境中激发态HA的性质,进而弄清竹红菌的光疗机制。     

在胶束中竹红菌甲素的光物理特性

研究了竹红菌甲素在胶束水溶液中的增溶能力及其光物理特性。实验证明,竹红菌甲素可以增溶于非离子型(TX-100),阳离子型(TDPB)和阴离子型(SDS)胶束水溶液中,增溶能力的顺序为:TX-100>TDPB>SDS。观察到在胶束中竹红菌甲素的两种互变异构体比例变化,在TDPB胶束中在高居占度条件下生成了基态相迂复合物,吸收峰位λ_max630nm,其对应的激基缔合物在荧光谱中出现在λ_max670nm处。     

竹红菌甲素与血红蛋白相互作用光谱

竹红菌甲素与血红蛋白相互作用光谱;马心血红蛋白;竹红菌甲素;相互作用;UV-Vis吸收光谱;荧光光谱;荧光猝灭动力学常数     

非离子胶束对竹红菌乙素及其溴代物基态和激发态的保护作用

本文用Triton X-100非离子型胶束增溶竹红菌乙素(HB)及其两种溴代物(5-Br-HB,5,8-diBr-H8),发现该胶束对HB的基态和激发态都有保护作用:(1)HB基态的ρK_a值升高;(2)荧光量子产率增大。这使其光敏反应产生的活性中间体¹O₂和·OH的产额增加,从而增强了其光敏活性,实验还发现,这种胶束对HB的两种溴代物的激发态亦有保护作用,且强于HB,这导致它们O₂和·OH的产额显著高于HB.¹O₂和·OH产额的提高,在光敏损伤作用中具有重要的生物学意义。     

竹红菌甲素光敏作用原初反应的特征

为了从光生物方面判别竹红菌甲素(Hypocrellin A)的光敏作用,本文用电子自旋共振(ESR)、自旋捕捉和消自旋等方法,探讨了HA光敏作用原初反应的特征。不仅观测到它产生~1O_2的作用,还首次观察到(?),·OH和(?)的产生,并且证实,活性氧产生可转变为非氧自由基生成。根据产生这些活性物质(瞬态产物)的原初反应特征,可能表明,竹红菌甲素对生物系统的光敏损伤机制,不只包括~1O_2的作用,而且尚与(?),·OH和非氧自由基的多重作用有关。     

反相高效液相色谱法测定竹红菌中竹红菌甲素的含量

建立了高效液相色谱法测定竹红菌提取物中竹红菌甲素含量的方法.样品用c18柱为分离柱,甲醇-水（体积比83：17）为流动相,检测波长为300nm进行分析.竹红菌甲素在进样量0.252～2.52μg范围内峰面积线性关系良好（r=0.999 9）,回收率为98%～103%,方法的RSD为0.20%～0.36%（n=5）.该分析方法简便快速,适合作为常规分析方法.     

竹红菌乙素对人红细胞膜蛋白荧光猝灭机理的研究

本文利用人红细胞膜蛋白内源荧光(主要指色氨酸),经加入不同的竹红菌乙素之后,引起了荧光猝灭现象,根据荧光猝灭原理分别从吸收光谱,荧光光谱,稳态变温实验和瞬态荧光等技术分析了上述的猝灭过程,实验证明:该猝灭是以动态碰撞过程为主要作用机理,据此作者提出了乙素可以用于生物膜体系的蛋白质荧光猝灭剂的理由。     

毛细管电泳电导法测定竹黄中竹红菌甲素含量

提出了测定竹黄中竹红菌甲素含量的毛细管电泳电导法。用20mmol·L~(-1)乙酸铵缓冲溶液(用0.1mol·L~(-1)乙酸溶液调节至pH 3.5)为电泳介质,分离电压为20 kV,采用柱端电导检测,在缓冲溶液中加乙醇至占总体的5%,以改善样品的溶解度并控制电渗流的大小和方向。用虹吸进样,进样高度为20 cm,进样时间为10s。方法的线性范围为1.0～160.0mg·L~(-1),检出限(3S/N)为0.5mg·L~(-1)。测得方法的回收率在99.0%～100.2%之间。     

某些还原性生物分子对竹红菌甲素敏化产生^1O~2的抑制作用

存在还原性的生物分手如甲硫氨酸、尿酸和还原性谷胱甘肽时,竹红菌甲素经受单电子还原形成甲素的半醌自由基、在去氧溶液中观察到了甲素半醌负离子自由基的ESR信号.在充氧的溶液中检测到了超氧负离子自由基.还原剂的存在降低了单重态氧的生成并引起了超氧负离子自由基的生成.     

竹红菌甲素光敏活性的量子化学研究

利用密度泛函B3LYP/6-31G^*方法对茈醌类光敏剂竹红菌甲素hypocrellin A(HA)及其模型化合物的结构性质和分子内氢传递(IHT)过程进行了系统的计算研究,比较了各侧链对分子结构和IHT过程的影响.利用CIS/6-31G^*方法对HA的活性中心苝醌(PQ)及与其结构类似的一系列化合物激发态的IHT过程进行了研究.得到的主要结论包括:(1)常温下,处于基态的HA分子能够进行快速的分子内氢传递.(2)HA的几种模型化合物在基态时的IHT势垒、分子内电荷分布与HA差别很小,这说明侧链对IHT过程的影响不大.(3)HA模型化合物的IHT势垒与氧氢键键长变化和氢键键长变化呈良好的线性关系.(4)IHT反应中伴随着一个电荷分离过程,在氢传递过程中占主导地位的是静电相互作用,这说明此IHT过程本质上是质子转移过程.(5)共轭结构对该类分子的激发态IHT过程具有重要影响,总的趋势是对小共轭体系,单重激发态和三重激发态IHT反应的势能曲线分离,随着分子共轭结构的增大,两个激发态势能曲线逐渐接近,发生交叉的可能性以及交叉的程度也随之增大,即从单重态到三重态发生系间窜越的可能性也随之增大.由于分子内氢传递导致单重激发态和三重激发态势能曲线交叉,致使发生系间窜越,使体系三重态量子效率显著提高,从而提高了茈醌类光敏剂的光敏活性.这说明IHT过程对该类分子保持其光敏活性具有重要的意义.     

竹红菌甲素(HA)纳秒级瞬态吸收光谱研究

本文得到了竹红菌甲素(HA)在不同溶剂中的纳秒级瞬态吸收光谱和荧光光谱。在稀溶液中,HA有3个瞬态吸收带Ⅰ_a,Ⅱ_a和Ⅲ_a,其中Ⅰ_a,Ⅱ_a两带是HA的T-T吸收,Ⅲ_a带是溶剂分离离子对(SSIP)的吸收。在浓溶液中,只观察到SSIP的吸收(Ⅲ_a)。还讨论了溶剂极性对HA瞬态光谱、荧光光谱的影响以及O_2对HA荧光强度的影响,并提出了合理的HA光解机制。     

竹红菌甲素的光化学——Ⅶ.光敏化竹红菌素的单电子还原

本文研究了在半胱氨酸和抗坏血酸的存在下光诱导的竹红菌甲素和乙素的单电子还原.通过ESR和电子吸收谱,并证实了光还原生成的甲素和乙素的半醌负离子自由基及它的质子化与歧化.通过热化学合成和电子吸收谱的对比,推断了竹红菌素经净的两电子还原所形成的亚稳态产物为3,4,9,10-四羟基(艹北)衍生物.     

竹红菌甲素和吲哚类化合物的相互作用

本文利用吸收光谱,荧光光谱研究了竹红菌甲素(以下简称HA)和吲哚类化合物的相互作用。发现HA和吲哚类化合物在一定条件下可形成复合物。这种复合物带有电荷转移性质。吲哚环上带有给电子取代基,位阻小,溶剂的极性大和溶液呈中性有利于该复合物的形成。     

在非质子溶剂中竹红菌甲素敏化光氧化胆红素

胆红素IX_α(胆红素)是哺乳动物体内血红素的代谢产物,由于它与小儿黄疸病光疗的直接关系,以及近来发现它在体内可能作为生物抗氧剂,所以一直受到科学家的重视。在非质子溶剂中胆红素的光氧化可以生成胆绿素IX_α(胆绿素)及一系列单吡咯、双吡咯的衍生物。对于生成单、双吡咯小分子衍生物,用类型Ⅱ(¹O₂为中间体)的光氧化机制很好解释,但对胆绿素的生成到底是经过单重态氧途径,还是离子自由基途径尚不完全清楚。     

竹红菌甲素和乙素及其类似物的电子光谱研究

本文详细研究了4,9-二羟基-3,10苝醌美化合物的吸收光谱和荧光光谱。证明它们在可见光范围内的三个吸收带分别由苝醌共轭体系的ππ~*跃迁和分子内质子传递引起。它们在稀溶液中的荧光光谱是由中性单分子荧光峰和它们进行激发态质子传递后形成的偶极离子的荧光峰组成,在浓溶液中长波方向的峰是由偶极离子的荧光峰和它们的激基缔合物的荧光峰迭加而成。竹红菌甲素和乙素晶体的荧光峰只有偶极离子和激基缔合物的荧光峰,而没有发现中性单分子的荧光峰。     

均相和非均相体系中竹红菌甲素与尾孢素光敏活性的比较

本文在均相有机体系和非均相胶束体系中用ESR、自旋捕捉、消自旋等技术研究了竹红菌甲素(HA)和尾孢素(CP)的光敏特征;测量了其光动力作用过程中¹O₂、负离子自由基和O₂^·-的相对产率,发现均相体系中HA的光敏活性略高于CP。这表明侧环对醌类光敏剂的光敏活性影响不大。在非均相体系中由于胶束对HA激发态较强的保护作用,HA的光敏活性显著地强于CP。     

竹红菌甲素光氧化物的晶体结构及其光氧化反应机制的探讨

为研究竹红菌甲素(HA)光疗和光敏氧化的机制,我们测定了其主要氧化产物的晶体结构。其晶体属单斜晶系,空间群为P2_1,晶胞参数a=10.030(3),b=8.877(3)和c=15.764(5),β=104.50°(2),Z=2.对于1408个Ⅰ>2.50σ(Ⅰ)的独立衍射最终的偏离因子R=0.055。氧化产物为不含过氧键的由脂肪烃七元环联结的2个α-萘醌衍生物作为骨架的分子。在此结构的基础上,我们推论了竹红菌甲素光氧化反应的部分历程:首先光氧化环合加成形成过氧化物,再进一步热分解成稳定的氧化物。     

竹红菌甲素衍生物13-SO3Na-DDHA电化学及光诱导还原的研究

本工作研究了化合物13-SO₃Na-DDHA在不同pH的缓冲溶液中的电化学氧化还原行为。实验证明:化合物中羰基的还原电位与pH之间存在线性关系,其直线的斜率为60mV/pH.并证明了此过程为一步两电子、两质子还原过程:Q+2H⁺+2e=QH₂.DMF作为非质子溶剂,具有很好的稳定自由基的作用。向缓冲溶液中加入DMF后,化合物13-SO₃Na-DDHA为两步单电子还原过程,相应溶液中的光诱导电子转移吸收光谱证实了以上电化学的结果。     

竹红菌甲素在脂质体溶液中的光动力作用研究

系统地研究了竹红菌甲素(HA)和卵磷脂脂质体结合后的光动力作用.通过二苯基蒽光氧化和顺磁共振ESR方法报道了光敏HA产生单重态氧~1O_2,并测定了单重态氧量子产率.用自旋捕获ESR方法测得光照HA-脂质体溶液产生羟基自由基·OH并证实际·OH来源于超氧阴离子自由基O_(?)~-,同时研究了HA在无氧条件下的光还原反应.     

竹红菌乙素的光敏活性探讨

利用电子顺磁自旋共振技术 (ESR)对竹红菌乙素 (HB)与二苯胺体系光敏化学反应进行了研究 .并用流式细胞术考察了HB光动力学对Hce_8693盲肠癌细胞增殖周期及诱导凋亡的影响 ,阐明了HB的光敏活性。