离子束注入对小麦幼苗保护酶活性及脂质过氧化作用的影响

采用能量为2 5 ke V的N+不同剂量(2×1 0 1 6 N+ / cm2、4×1 0 1 6 N+ / cm2、6×1 0 1 6 N+ / cm2、8×1 0 1 6N+ / cm2、1 2×1 0 1 6 N+ / cm2 )注入新疆春小麦种子,研究了N+离子束注入小麦种子后对小麦幼苗体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)含量的影响.结果表明,离子束注入新疆春小麦种子后,该种子萌发的幼苗体内MDA积累减少,SOD活性降低;高剂量注入后,CAT和POD活性提高.     

人γ干扰素/β肿瘤坏死因子融合蛋白His6融合表达及一步纯化

将人γ干扰素 /β肿瘤坏死因子融合蛋白 ( hγTNF-β)重组基因克隆于表达载体 p ET2 8,构建成T7lac启动子控制下的 His6融合表达质粒 ,转化溶源菌 E.coli BL 2 1 ( DE3 ) .经 IPTG( 1 m M)诱导表达 ,阳性菌在 SDS-PAGE泳图上出现一条粗表达带 ,其分子量 ( 3 2 k Da)与目的蛋白 His6-γ TNF-β)理论分子量相符 .薄层扫描与溶解性分析显示 ,表达产物占菌体总蛋白的 4 5%以上 ,主要为不溶性的包涵体( IBs) .离心分离 IBs产物 ,溶于 7M尿素中 ,然后通过 Ni柱进行亲和层析 ,即可获得一步纯化的表达产物(纯度为 96%、回收率为 91 % ) .纯化产物再经复性缓冲液稀释复性 ,其细胞毒比活性与抗病毒比活性分别达到 1 .2× 1 0 7～ 2 .0× 1 0 7u/m gp和 6.6× 1 0 5～ 7.2× 1 0 5u/mgp     

人16周胎儿脑cDNA文库的构建及鉴定

本文从 16周的胎儿脑中抽提总 m RNA,经过一系列酶促反应后合成 c DNA,分级分离柱除去小片段 DNA后克隆到λgt10载体中 ,转染宿主菌 C60 0 hfl,文库包装效率为 4 .2× 10 6pfu/μg,得到的原始克隆数为 2 .1× 10 6,c DNA插入片段平均大于 1.2 kpb.根据已知序列设计引物 ,从这个 c DNA文库中扩增出血管内皮生长因子 ( VEGF)的全长 c DNA基因     

红莲型杂交水稻细菌双杂交系统文库的构建

用Trizol试剂提取红莲型水稻杂种F1幼穗的总RNA,分离纯化mRNA后反转录并合成双链cDNA.经Sephrose CL-2B凝胶过滤柱层析后,收集大于400 bp以上的双链cDNA片段,将其连接到pTRG载体上,转化到XL1-Blue MRF'Kan感受态细胞后构建成红莲水稻幼穗细菌双杂交文库.经检测计算该原始文库容量为1.03×106pfu/mL,对随机挑取的100个克隆进行PCR鉴定显示重组率接近100%而且大于800 bp的插入片段达到97%.扩增后文库的容量达到1.05×1010pfu/mL.     

对汞(Ⅱ)—二甲酚橙(XO)显色体系灵敏度的研讨

我们已在前文中根据文献[2]所提供的数据,经过计算和反复实验证明Hg(Ⅱ)—XO—HMTA三元络合物显色体系的摩尔吸光系数达不到10~5数量级(在文[2]由ε_(590)=2.2×10~5l·mol~(-1)·cm~(-1)),而应该是10~4数量级(ε_(590)=1.8×10~4l·mol~(-1)·cm~(-1))。本文根据有关理论和通过反复实验证明文[2]中得出的Hg(Ⅱ)—XO显色体系的摩尔吸光系数ε_(590)=1.7×10~5l·mol~(-1)·cm~(-1)是不成立的,在文献[2]所采用的实验条件下Hg(Ⅱ)和XO不能形成稳定的络合物。关于Hg(Ⅱ)—XO显色体系灵敏度问题我们进行了以下研讨。众所周知,二甲酚橙(XO)并非是“超灵敏显色剂”,从XO与四十余种金属离子的显     

抑制性消减杂交方法的建立

为建立研究基因表达差异的抑制性消减杂交（SSH）方法，以未加诱导剂处理的结肠癌LoVo细胞提取的mRNA为模板合成的cDNA作为驱赶子（driver)，联合使用10.0μmol/LATRA和0.1μmol/L1,25-(OH)2D3诱导2d的LoVo细胞提取的mRNA为模板合成的cDNA作为测试子（tester)进行SSH实验，结果为：消减产物与未消减样品（对照）在琼脂糖凝胶电泳图谱上明显不同，前者可见一些扩增条带，其大小范围在100-1000bp之间，本实验说明SSH方法对于识别差异表达的基因具有高效性。     

NO-2对DL-苹果酸-BrO-3-Mn2+-H2SO4振荡反应诱导期的影响

报道了NO-2 参与下的DL 苹果酸 (以下简称DL MA) BrO-3 Mn2 + H2 SO4化学振荡反应体系 ,考察了振荡体系中诸反应物的初始浓度范围及影响因素 结果表明 ,NO-2 的浓度cNO-2 与诱导期倒数的对数ln(1/tin)有良好的线性关系 ,线性范围为 8.2 9× 10 -5～ 3.16× 10 -3 mol·L-1 诱导期表观活化参数Ein为 5 8.6 3kJ·mol-1 分析了NO-2 共存时对振荡反应诱导期的影响及可能的机理     

离子色谱法测定三嗪类除草剂

本文报道利用离子色谱法同时分离分析莠去津、扑草净、扑灭通除草剂的方法 .采用 CG- 12 (2mm)分离柱 ,紫外检测器 ,用一系列的淋洗液 .实验在 0 .2 0 mol·L-1H2 SO4 +2 5 %CH3CN条件下 ,得到最佳分离效果 .莠去津、扑草净、扑灭通的测定均有良好的线性 .它们的检测限分别为莠去津为 3.13×10 -2 μg· m L-1,扑草净为 4 .39× 10 -2 μg· m L-1,扑灭通为 1.36× 10 -2 μ/ m L-1,此方法可用于废水中除草剂的测定 ,样品的回收率在 96.0 0 %～ 10 5 .32 %之间 .     

Fe(Ⅲ)[TP(o-NO2)TBP]Cl与抗坏血酸的均相电子转移反应动力学

研究了在 (2 6± 0 .2 )℃、以含微量水的 DMF为溶剂、离子强度 0 .1(Na Cl O4)条件下 ,氯化四 (邻 -硝基苯基 )四苯并卟啉合铁 ( ) (Fe( ) [TP(o- NO2 ) TBP]Cl)与抗坏血酸 (H2 A)的电子转移反应动力学 ,提出了反应的机理 ,推导了反应的动力学方程为 :d[Fe( ) [TP(o- NO2 ) TBP]Cl]/ dt=k Ka1 Ka2 / ([H ]2 Ka1 [H ] Ka1 Ka2 )·[H2 A]T· [Fe( ) [TP(o- NO2 ) TBP]Cl],其中 ,k=1.90 3× 10 2 mol- 1 · L· s- 1 ,Ka1 =5 .137× 10 - 6 ,Ka2 =1.5 92× 10 - 1 2 .Ka1 、Ka2 可视为用动力学方法测出的抗坏血酸在 DMF溶液中的离解常数 .     

小鼠2-细胞期胚胎细胞电融合的研究

为了探索核移植克隆动物技术中的细胞融合参数,进行了小鼠2-细胞期胚胎细胞的电融合试验.直流电场强度为2kV/cm,脉冲时程40μs时,效果较好,可以获得70.5%的融合率和64.5%的发育率,进一步提高电场强度,裂解死亡率也明显提高;采用非电解质溶液(甘露醇)作为融合液时,胚胎细胞的融合率与融合胚的发育均优于电解质融合液(DPBS);在直流电脉冲之前,施加交流电脉冲是必要的,可以显著提高融合率(P＜0.05).     

亚硒酸钠诱导HeLa细胞凋亡机理

对亚硒酸钠诱导人宫颈痛细胞（HeLa）凋亡进行了研究，分别用荧光倒置显微镜和流式细胞仪进行凋亡形态分析和DNA片断分析．研究发现Na2SeO3对HeLa细胞的凋亡作用呈现浓度依赖性，当Na2SeO2的浓度分别为21．42，63μmol／L时，流式细胞仪检测到的细胞凋亡率分别是18．9％，33．0%，58．95．为了进一步说明凋亡过程的分子机理，分别使用Frua-2／AM和DCFH-DA两种荧光染料检测了用Na2SeO3诱导的细胞内游离Ca^2＋含量和活性氧（ROS）水平的变化。发现在凋亡过程中伴随有明显的胞内Ca^2＋和ROS水平丌高，且呈现Na2SeO3浓度卡相关性，这表明Ca^2＋和ROS在Na2SeO3诱导的HeLa细胞捌亡过程中起着重要的信号传导作用。     

感应反型层太阳电池的开路电压分析

本文应用数值计算方法研究了感应反型层太阳电池的开路电压与衬底掺杂水平、介质层固定正电荷密度及表面复合速度等的函数关系.研究结果表明,表面复合对开路电压的影响与衬底的掺杂水平有关,并且随着固定正电荷的增加而减弱.     

大黄素脂质体对Hep-2细胞毒的检测

采用逆相蒸发法制备了大黄素脂质体,测定了脂质体的包封率和粒径.通过苔盼蓝拒染法检测脂质体对Hep-2细胞的剂量和时间效应,初步研究了脂质体对Hep-2细胞的毒性,并根据加入脂质体后Hep-2细胞一周内的生长情况制作了生长曲线.结果测得由该法制备的大黄素脂质体平均包封率高达90.6%,透射电镜下观察到脂质体呈椭圆囊状结构,粒径分布均匀,其平均粒径分布在0.02~0.1μm之间,为单室脂质体.细胞毒实验表明大黄素脂质体对Hep-2细胞存在明显的细胞毒作用,且具有剂量和时间效应,随着脂质体中大黄素浓度从0.48mg.L-1增加到14.48 mg.L-1,死细胞百分率由23.15%增至94.5%,并测得脂质体对Hep-2细胞48 h的半数抑制浓度IC50为4.43 mg.L-1,浓度为7.24 mg.L-1的脂质体与Hep-2细胞作用12 h后,死细胞百分率增加到95%以上,加脂质体的Hep-2细胞生长曲线与没有加脂质体的正常Hep-2细胞生长曲线比较,加了脂质体的Hep-2细胞的生长曲线呈明显下降趋势,说明大黄素脂质体对Hep-2细胞的生长存在抑制作用.     

皮肤细胞调亡及其在化妆品开发中的应用

对皮肤细胞凋亡的机制及紫外线对皮肤细胞凋亡的影响进行了综述,并从防晒、美白与抗衰老等方面讨论了细胞凋亡在化妆品研发中的应用及潜力.     

汉坦病毒感染宿主细胞后TRAIL受体的动态变化

两株汉坦病毒(HV 76/118株和H-114株)分别感染人胚肺成纤维细胞(HEPF)后,于感染后不同时间(6,24,96h)提取细胞总RNA,半定量RT-PCR的方法检测肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)的相关受体(TRAIL-R1～TRAIL-R4)在汉坦病毒感染细胞过程中的表达变化,以明确TRAIL受体在汉坦病毒感染细胞过程中的表达情况.结果显示,正常细胞内TRAIL-R4表达最高,其次为TRAIL-R2.汉坦病毒(HV 76/118株和H-114株)感染HEPF 6h时仅TRAIL-R1表达显著上升,TRAIL-R2、TRAIL-R4表达先下降后上升并在96h达到高峰.HV 76/118株感染HEPF细胞6h时TRAIL-R3表达减低并维持在低表达水平,而HV H-114感染后仅24h出现短暂下降.结果表明,TRAIL受体表达在汉坦病毒感染过程中呈动态变化,且不同毒株的变化趋势存在差异.     

大鼠骨骼肌细胞介电谱的测量

在100Hz-100MHz频率范围内，应用Agilent4294A阻抗分析仪测量了骨骼肌纤维走行与电场呈垂直方向的大鼠离体骨骼肌细胞介电谱，利用Cole—Cole图、介电损耗因子频谱、介电损耗角正切频谱等分析，建立了大鼠骨骼肌细胞介电特性数据特征．     

大鼠血液细胞介电谱的数学模型分析

利用Cole-Cole方程的数值计算大鼠血液细胞介电谱,并进行曲线拟合分析,确立正常大鼠血液细胞射频电生理特性.结果显示:在射频段大鼠血液细胞介电谱满足Cole-Cole数学方程,曲线拟合误差＜3%.     

昆虫细胞凋亡蛋白酶caspase-1的表达纯化及活性分析

依赖于天冬氨酸的半胱氨酸蛋白酶(caspase)在细胞凋亡途径中起着不可替代的关键酶作用.本研究采用原核表达载体pET32a表达和纯化了家蚕细胞Bm-caspase-1及粉纹夜蛾细胞Tni-caspase-1蛋白酶,序列分析表明二者具有相同的内部剪切识别序列,且酶活性位点均为QACQ↓G.纯化获得大量可溶性蛋白酶,Western-blotting分析表明Bm-caspase-1在大肠杆菌中已自我剪切活化,而Tni-caspase-1没有自我剪切,无酶活性;活性Bm-caspase-1蛋白酶对caspase-3特异性底物Ac-DEVD-AMC的降解酶活性可被Z-VAD-FMK呈剂量依赖性抑制,半抑制浓度约20nmol/L.此外,活性Bm-caspase-1蛋白酶能够转活化无活性的Tni-caspase-1蛋白酶原.结果揭示了昆虫细胞caspase同样具有与哺乳动物细胞caspase相似的底物降解活性并可相互剪切激活,为进一步研究昆虫细胞凋亡的分子途径奠定了基础.     

高效单晶硅太阳电池的结构分析与设计

完成了对目前光电转换效率最高的商品单晶硅太阳电池的结构分析,并结合其结构特点得到了影响转换效率的关键因素.完成了全背电极太阳电池的版图设计,采用高少子寿命硅材料,进行了多项工艺实验,发现绒面制作前的硅片表面预处理条件对短路电流值有重要影响,预处理时间的不同造成短路电流值有显著差别.