葡萄糖氧化酶-辣根过氧化物酶-葡萄糖-愈创木酚-荧光反应体系测定血糖

利用愈创木酚的荧光特性,将其导入葡萄糖-葡萄糖氧化酶(GOD)-辣根过氧化物酶(HRP)的荧光猝灭反应体系,并与荧光毛细分析技术结合,开发了一种能测定微量葡萄糖的新方法.本方法的的最佳测定条件为:反应时间15 min,反应温度30C,GOD和HRP的浓度分别为4500U/L、2500U/L,愈创木酚浓度为150μmol...     

基于葡萄糖/葡萄糖氧化酶/H2O2/L-酪氨酸/辣根过氧化物酶反应体系的荧光毛细分析法测定血糖

建立了葡萄糖(G)/葡萄糖氧化酶(GOD)/H2O2/L-酪氨酸/辣根过氧化物酶(HRP)新荧光反应新体系,并将此反应体系与荧光毛细分析法(FCA)结合,开发一种能够真正实现血糖测定的新葡萄糖酶荧光毛细分析法(GE-FCA).经优选得到的新反应体系最佳条件为:GOD和HRP浓度均为2000 U/L,L-酪氨酸浓度为1....     

聚苯胺葡萄糖氧化酶电极的催化过程

用电化学方法固定在直径为0.5mm铂丝上的聚苯胺(PANI)葡萄糖(GOD)电极对葡萄糖有催化氧化作用.在0～-0.6V(vs.SCE)的电极范围内,在电极的循环伏安曲线上观察到与葡萄糖浓度有关的氧的还原峰和GOD还原态的氧化峰,用此GOD还原态的氧化峰电流可定量检测葡萄糖的浓度。本文提出在PANI电极上存在着酶反应氧化还原电荷直接传递的可能性。     

酶荧光毛细分析法测定葡萄糖

基于酶催化和荧光毛细分析法(FCA)开发了一种微量、快速测定葡萄糖的新方法(GE-FCA)。优选的实验条件为:反应时间15min;反应温度30℃;磷酸盐缓冲液(pH6.0),HRP浓度和GOD浓度分别是200和150U/L;线性范围0.1～4mg/L;检出限0.070mg/L。GE-FCA对血液中葡萄糖进行测定,其回收率在98.9%～103.8%之间。与其它方法相比,GE-FCA法操作简单,而且试样用量少(仅为18μL),节省了酶试剂用量,实验成本低,易于普及推广。     

利用葡萄糖氧化酶反应体系动力学光度法测定痕量银

基于葡萄糖氧化酶－过氧化物酶－４－氨基安替比林－２，４－二氯苯酚偶联反应的动力学性质及Ａｇ＾＋，Ｈｇ＾２＋，Ａｌ＾３＋，Ｃｕ６２＋等离子对反应的影响，建立了用动力学光度法测定痕量银的新方法。     

葡萄糖浓度的酶联荧光毛细分析法测定

该文以葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶为催化剂,使含有对甲基酚的葡萄糖溶液体系通过酶偶联催化反应生成荧光物质,从而实现对葡萄糖浓度的测定。优化的实验条件为:反应时间20 min;NH3-NH4Cl缓冲溶液(pH 10.4);对甲基酚浓度30.0μmol/L。分别采用荧光毛细分析法和荧光光谱分析法测定了相同浓度的系列葡萄糖溶液的荧光强度。在5.0~500.0μmol/L范围内,两种方法测得的荧光强度均与葡萄糖浓度的对数成正比。通过对比测试结果分析了两种方法的优缺点。     

催化荧光光度法测定辣根过氧化物酶及甲胎蛋白

建立了催化动力学荧光光度法测定辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）及人甲胎蛋白（ＡＦＰ）的新方法。在含ＴｒｉｔｏｒＸ－１００的磷酸盐缓冲溶液中,辣根过氧化氢氧化邻苯二胺的产物２,３－二氨基吩嗪的荧光强度有明显的增强。在一定的实验条件下,该产物的荧光强度与ＨＲＰ的量成正比,方法对ＨＲＰ的线性范围为１０～２００pg,线性相关系数为０．９９５６,最低检出下限可达８pg,其相对标准偏差为３．２％（n＝１０）。应用此测定体     

基于固定化酶的流动荧光法测定血清中的葡萄糖

本文将固定化酶柱，光纤以及停流技术结合起来，研究了以廉价而易得的硫胺素为荧光底物的葡萄糖的荧光分析，提出了一种快速、简便、精确地测定葡萄糖的新方法。其线性范围为１．０￣６０．０ｍｇ／Ｌ，线性相关系数为０．９９９，检测限为０．１５ｍｇ／Ｌ。以５．０ｍｇ／Ｌ的葡萄糖作精度试验，ＲＳＤ％＝２．１％（ｎ＝１１）。该方法已成功地用于血清中葡萄糖的测定，结果与光度法相符。     

胶束增敏的辣根过氧化物酶催化荧光反应测定葡萄糖的研究

采用葡萄糖氧化酶－辣根过氧化物酶－对羟基苯丙酸－过氧化体系测定葡萄糖，阳离子胶束十六烷基三甲基溴化铵对生荧反应具有催化和增敏作用，可用于１μ１样品中葡萄糖的测定，线性范围０．５－５０μｇ，线性相关系数ｒ＝０．９９６６，相对标准偏差为０．７３％，检测限为０．４６μｇ。     

β-环糊精衍生物的金属配合物模拟酶催化测定葡萄糖含量

葡萄糖含量常用生物酶法[1 ] 间接测定 ,但酶试剂较贵 ,且多数对酸、碱、热不稳定 ,反应条件苛刻、易失去活性。模拟生物酶测定一直是分析化学领域研究的热点之一[2 ] 。 (本文利用双 [6-氧- (丁烯二酸 - 1 ,4-单酯 - 4) ]β -ＣＤ·Ｆｅ3+·Ｈ2 Ｏ2同时模拟葡萄糖氧化酶 (ＧＯＤ)和过氧化物酶(ＰＯＤ) ,Ｈ2 Ｏ2 与邻甲苯胺生成的氧化型产物在波长 365ｎｍ处有较强的吸收[3] ,通过测定 365ｎｍ处吸光度的变化对葡萄糖进行定量分析。该模拟酶具有制备简便、费用低廉、寿命长、不易失活等优点。该法检测下限可达 1 5ｍｇ·Ｌ- 1 。模拟酶制备…     

催化动力学光度法测定葡萄糖氧化酶活性研究

本文对葡萄糖氧化酶(GO酶)在不同缓冲体系中的活性、酸度、温度的影响进行了研究。表明GO酶在KH_2PO_4-Na_2HPO_4-H_3PO_4体系中活性最大。测定反应基于GO酶催化葡萄糖氧化产生H_2O_2,再用Mo(Ⅵ)催化H_2O_2氧化KI,以淀粉显色,于570nm处测定吸光度,建立了测定生物样品中GO酶的方法。该法在1.6×10~(-3)～8×10~(-2)u/ml酶活力单位浓度范围内有良好的线性关系,相关系数为0.997。并对放置不同时间的峰蜜进行了测定,回收率在92％～110％。结果尚属满意。     

Amperometric Glucose Determination by Means of Glucose Oxidase Immobilized on a Cellulose Acetate Film: Dependence on the Immobilization Procedures

Glucose microelectrodes were prepared by immobilizing glucose oxidase onto a cellulose acetate film coating a platinum wire. Hexamethylenediamine (HMDA) and Glutaraldehyde (GA) were employed as spacer and coupling agent, respectively. Sensitivities and linear response ranges were studied as a function of the relative amounts of HMDA and GA. The best sensitivity was found when HMDA and GA were 5% and 2.5% in aqueous solutions, respectively. Taking as a reference the functioning of this biosensor, the roles of HMDA and GA percentages appear to be opposed when the extension of the linear response range is considered. Indeed, an increase of one unit in HMDA percentage (from 5 to 6 %) induces an increase in the extension of the linear response range equal to that obtained with a decrease of one unit of GA percentage (from 2.5 to 1.5%).     

A Stable Enzyme Biosensor Using Concanavalin a Complex of Glucose Oxidase for Glucose Determination

Abstract

The thermal stability of an insoluble concanavalin A (ConA) complex of glucose oxidase (GOD) was researched. The thermal deactivation rate constants of the complexes were obtained. It was found that the GOD-ConA complexes were less sensitive to thermal inactivation than the native enzyme GOD. By using the complexes, ferrocene-mediated enzyme electrodes were constructed. The results suggested that the GOD-Con A complex electrodes had good thermal stability at room temperature.     

葡萄糖氧化酶反应体系的动力学性质及在葡萄糖分析中的应用

本文运用紫外－可见光谱仪研究了葡萄糖氧化酶偶联辣根过氧化物酶－邻联茴香胺染料体系的催化动力学性质，通过控制酶和染料的含量，确定了反应呈假一级反应的葡萄糖浓度范围，在此反应体系中，葡萄糖浓度可以通过测定染料吸光度而获得，干扰小，回收率达９７％～１０３％。     

Glucose Biosensor Using Glucose Oxidase Immobilized in Polyaniline

A biosensor for glucose utilizing kinetics of glucose oxidase (EC 1.1.3.4.) was developed. The enzyme was immobilized on polyaniline by covalent bonding, using glutaraldehyde as a bifunctional agent. The system showed a linear response up to 2.2 mM of glucose with a response time of 2.5–4.0 min. In addition, the immobilized enzyme had a higher activity between pH 6.5 and 7.5. The system retained 50% of its activity after 30 d of daily use. The optical absorption spectra of the polyaniline/glucose oxidase electrode after glucose had been added to the buffer solution showed that the absorption band around 800 nm had changed considerably when glucose was allowed to react with the electrode. This optical variation makes polyaniline a very promising polymer for use as a support in optical sensor for clinical application.     

葡萄糖氧化酶修饰聚苯胺电极的动力学

虽然固定酶有吸附、交联、共价结合和捕集等多种方法,但寻找其新的固定方法仍是感兴趣的研究课题。利用导电高聚物的导电性和掺杂作用,将酶直接固定在导电高聚物上,这种方法简单,固定后的酶仍保持原有的活性。用聚苯胺固定葡萄糖氧化酶已有报道。但电极的活性有效期较短。考虑到固定酶的性质不仅取决于酶本身的性质,而且还受载体性质和固定方法的影响,我们曾用还原后的聚苯胺在酶溶液中氧化而固定酶,本文在文献的基础上,研究了葡萄糖氧化酶修饰聚苯胺电极的动力学特性、pH效应及其使用稳定性。     

基于抑制作用的新型葡萄糖氧化酶传感器测定环境污染物汞离子的研究

本文提出了一种基于抑制作用的新型葡萄糖氧化酶生物传感器用于测定环境样品中二价汞离子。其工作原理是汞离子对电极上葡萄糖氧化酶分子的抑制作用引起响应电流的下降而产生一可测定信号。详细探讨了电极的氧化还原反应机理及测试性能。该传感器对汞离子的检出限是0．49ng／mL,抑制率和汞离子浓度的自然对数值在0．49～783．21ng／mL和783．21ng／mL-25．55μg／mL范围内分别呈良好的线性关系。酶电极在抑制后可以完全恢复活性。考察了铅(Ⅱ)、铜(Ⅱ)、镉(Ⅱ)和铬(Ⅲ)离子对汞离子测定的干扰。测定了汞离子在土壤浸出液中的回收率,结果良好。     

葡萄糖氧化酶共价交联于蛋膜上的葡萄糖传感器

以牛血清白蛋白－戊二醛为交联剂，将葡萄糖氧化酶固定地鸡蛋膜上，氧电极作电化学敏感元件，制成葡萄糖氧化酶电极。传感器的响应范围为４．０×１０＾－６－２．４×１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ；检测限为１．２１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ。该传感器具有线性范围宽，灵敏度高，使用寿命长等优点。