氰基乙基-5-氯尿嘧啶核苷探针测定蛋白质的同步荧光法研究

基于核苷类药物中间体氰基乙基-5-氯尿嘧啶(CECU)与血清白蛋白相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以氰基乙基-5-氯尿嘧啶为荧光探针,用固定波长同步荧光光谱技术测定人血清白蛋白(HSA)和牛血清白蛋白(BSA)的新方法。结果表明,在最佳实验条件下,体系的荧光强度与人血清白蛋白和牛血清白蛋白分别在2.76~497μg/mL和3.90~507μg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限分别为1.64和1.72μg/mL(n=11)。该方法灵敏度高、稳定时间长、选择性好、线性范围宽。方法已用于血清样品中蛋白质的快速测定。     

荧光探针碘苷在血清白蛋白同步荧光测定中的应用研究

在最佳实验条件下,碘苷与血清白蛋白相互作用,导致血清白蛋白的内源荧光发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中血清白蛋白的浓度呈线性关系.据此,建立了以碘苷为荧光探针,运用固定波长同步荧光光谱分析测定人血清白蛋白和牛血清白蛋白的新方法.体系的同步荧光强度与人血清白蛋白和牛血清白蛋白分别在1.38～579 mg/L和0.78～585 mg/L范围内呈良好的线性关系,检出限分别为0.612 mg/L和0.358 mg/L.对实际样品进行回收测定,回收率为97%～101%.     

白藜芦醇探针同步荧光法测定蛋白质含量

在Tris-HCl缓冲溶液体系中(pH=7.4),白藜芦醇与人血清白蛋白相互作用,对蛋白的内源性荧光产生猝灭作用,而且,同步荧光的强度与人血清白蛋白的浓度成正比。 基于此,建立了以白藜芦醇为荧光探针,运用固定波长同步荧光光谱法测定生物样品中蛋白质含量的新方法。 体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质和离子强度等因素的影响。 在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(I)与人血清白蛋白在1.380~276.0 mg/L的浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为1.037 mg/L(n=11)。 对血清、尿样和唾液等生物样品进行测定,回收率在93.5%~105.8%之间,与传统的考马斯亮蓝(G-250)法作对照,结果一致。     

探针5-硝基水杨酸同步荧光法测定生物样品中蛋白质

在模拟体液离子强度下,基于5-硝基水杨酸(5-NSA)与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以5-NSA为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法. 体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质、反应温度等因素的影响. 结果表明,在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在3.2×10-8～6.4×10-8 mol/L的质量浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为1.7×10-8 mol/L(n=11). 对血清、尿样和唾液样品进行了测定,回收率在99.96%～100.04%之间.     

探针JDC-108测定生物样品中的蛋白质

在模拟人体生理条件下,基于JDC-108与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以JDC-108为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法。体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质、反应温度等因素的影响。在20℃、Tris-HCl缓冲液(pH=7.40)及离子强度为0.1 mol/L的NaCl溶液中,体系的Δλ为20 nm的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在2.0~497 mg/L的浓度范围内呈良好的线性关系;检出限为0.76 mg/L(n=11)。本实验对血清、尿样和唾液样品进行了测定,回收率在97.7%~103.4%之间。实验结果表明:本方法具有简单、快速、灵敏度较高、线性范围宽、精密度和回收率较好等优点,可直接用于生物样品中蛋白质总量的测定,结果令人满意。     

探针5-硝基水杨酸同步荧光法测定生物样品中蛋白质的应用研究

在模拟人体生理条件下,基于5-硝基水杨酸与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以5-硝基水杨酸为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法。体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质、反应温度等因素的影响。对上述实验条件进行了优化,结果表明,在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在2.21 ~ 469.2 mg/L 的浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为0.81 mg/L(n=11)。本实验对血清、尿样和唾液样品进行了测定,回收率在98.4% ~ 102.6 %之间。     

三维同步偏振荧光光谱研究蛋白质溶液变性时氨基酸残基的发光行为

将偏振技术、同步技术与三维技术结合起来的三维同步偏振荧光光谱(TDSPS)能分辨蛋白质溶液中的色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr)残基,具有同步光谱分辨率高、三维技术信息丰富的优点．本文用TDSPS表征牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)受各种因素影响(酸效应、碱效应、盐效应、猝灭剂等)时Trp,Tyr残基荧光光谱的变化,用于区分HSA和BSA．     

8-溴鸟苷探针测定生物样品中蛋白质含量的光谱法研究

研究了8-溴鸟苷(BG)与人血清白蛋白(HSA)体系的荧光猝灭光谱、三维荧光光谱,证明了两者可以发生相互作用,导致人血清白蛋白疏水微环境极性的改变和构象的变化;还分析了△λ值、pH值、离子强度等因素对该体系同步荧光强度的影响,选定了8-溴鸟苷测定生物样品中蛋白质含量的最佳实验条件;在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度与...     

血竭总黄酮与人血红蛋白结合的同步荧光特性

采用同步荧光法研究了血竭总黄酮(tFSD)与人血红蛋白(HHb)的相互作用,并与血清白蛋白的同步荧光光谱进行比较。tFSD可以猝灭HHb、牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的荧光,但只有HHb的峰位因分子构象改变蓝移10 nm。HHb的同步荧光蓝移表明,tFSD使HHb内部芳香族氨基酸所处微环境的疏水性增强。0.4 mol.L-1的NaCl可阻止两者的结合,说明tFSD与HHb的弱结合力是氢键和静电力,而tFSD-HHb复合物的作用时间、酸度对结果无影响。     

一种缩氨基硫脲类衍生物探针测定生物样品中的蛋白质含量

在Tris-HCl缓冲溶液体系中(pH=7.4),研究了1,4-二羟基-2-甲酰基-9,10-蒽醌缩对甲氧基苯基氨基硫脲(EN)与人血清白蛋白(HSA)体系的荧光猝灭光谱和三维荧光光谱,证明EN与HSA可以发生相互作用,使人血清白蛋白的疏水微环境的极性以及构象发生变化。 考察了Δλ值、反应介质和离子强度等因素对体系同步荧光光谱特征及强度的影响。 在此基础上,建立了以EN为分子探针,运用固定波长同步荧光光谱法测定生物样品中的蛋白质含量的方法。 在最佳实验条件下,体系同步荧光强度与HSA在1.380~165.6 mg/L范围内呈良好的线性关系。 对11份空白溶液进行平行测定,检出限达到0.414 mg/L,相对标准偏差为1.52%。 运用此方法对血清、唾液、尿液进行了加标回收实验,回收率在98.4%～105%。 且同步荧光光谱法测定结果与考马斯亮蓝法基本一致。     

同步荧光光谱法测定蜂蜜中游离氨基酸

在乙酸盐缓冲介质中,氨基酸与乙酰丙酮及甲醛反应生成发出黄绿色荧光的化合物N-取代-2,6-二甲基-3,5-二乙酰基-1,4-二氢吡啶,基于此反应提出了测定蜂蜜中游离氨基酸的方法.在氨基酸的最大激发波长μex并在选定的最佳波长差△λ的条件下测定相应氨基酸的同步荧光信号.试验发现:对不同的氨基酸,其λex,△λ和所生成的荧光化合物的相对荧光强度以及线性范围均稍有差异.以丙氨酸为例,在λex为387 nm,△λ为85 nm及扫描速率为1 000 nm·min-1的条件下进行测定,所得线性回归方程为y=49.03 x 148.11(r=0.999 2),线性范围为1.0～10.0 mg·L-1.应用此方法测定了蜂蜜样品中游离氨基酸的总量,在此基础上进行回收试验,测得回收率的平均值为99.3%.     

同步导数荧光光谱法测定食品中3种芳香族氨基酸

提出了同步导数荧光光谱法同时测定食品中色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的方法。试验表明:为排除干扰,色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的特征同步导数荧光波长宜选定279,224,256 nm,波长差Δλ为55,70,25 nm条件下进行同步扫描。3种芳香族氨基酸的浓度分别在一定范围内与其导数荧光强度呈线性关系,检出限（3s/k）分别为6.3×10^-9,1.6×10^-8,4.0×10^-7mol·L^-1。方法用于蜂蜜、羊奶粉和啤酒样品中3种芳香族氨基酸的测定,回收率在92.3%～103%之间。     

Fluorimetric Determination of Nitrate

Abstract

A sensitive fluorimetric method has been developed for the determination of nitrate based on the reduction of nitrate to nitrite with hydrazine sulfate and the subsequent determination of the nitrite formed with 2, 3-diaminonaphthalene. Solvent effect on fluorescence intensity, optimum reaction conditions, and sensitivity of the method are discussed.     

加替沙星的荧光光度法测定

提出了测定加替沙星的荧光光度法 ,并对影响加替沙星荧光性质的各种因素进行了研究 ;加替沙星浓度在3.0×10-7～1.0×10-5 mol/L范围内与荧光强度呈良好的线性关系,检出限为8.8×10-8 mol/L ,对5.0×10 -7mol/L的加替沙星平行测定13次的相对标准偏差为1.4 % ;将该法用于血清、尿样分析 ,回收率在98%～103% ,结果令人满意。     

Synchronous Fluorescence Determination of Protein with Functional Organic Nanoparticles

A new method for detecting protein using a synchronous fluorescence scan technique with a novel composite organic nanoparticle has been developed. The novel functional organic nanoparticle, dodecyl benzene sulfonic acid sodium salt (DBSS)-capped nano-anthracene, is easily prepared by re-precipitation under ultrasonic agitation. The surface of the fluorescent organic nanoparticle was covered with functional groups, which made these nanoparticles water-soluble, stable, and biocompatible. Compared to single organic fluorophores, these nanoparticles are brighter, more resistant to photobleaching, and do not suffer from blinking. We developed a sensitive synchronous fluorescence method for the rapid determination of proteins. With Δλ = 60 nm, maximum and constant synchronous fluorescence is produced at 339 nm. Under optimal conditions, the linear range is 0.04–13.0 μg mL⁻¹ for γ-globulin (γ-G), 0.1–11 μg mL⁻¹ for human serum albumin (HSA), and 0.1–11 μg mL⁻¹ for bovine serum albumin (BSA), respectively. The method is characterized by reproducibility, excellent accuracy and few interfering substances. The proposed method was applied to the determination of human serum samples collected from a hospital, and the results were in good agreement with those reported by the hospital, indicating that the method presented here is not only sensitive and simple, but also reliable and suitable for practical application.     

褶合曲线分析法用于同步荧光光谱法同时测定苯酚和对苯二酚

采用计算机辅助褶合曲线分析法结合同步荧光光谱法对双组分体系（苯酚／对苯二酚、苯酚／邻苯二酚）同时测定。苯酚和对苯二酚的荧光光谱重叠比较严重，同步荧光光谱虽使选择性有所改善，但仍有重叠，苯酚和对苯二酚的同步荧光峰相差仅２０ｎｍ。褶合曲线分析法可很好地用来测定苯酚和对苯二酚，方法简便、准确、易于自动化，同时证明，褶合曲线分析法在荧光分析方面具有很好的应用前景。进一步试验苯酚和邻苯二酚双组分的同时测定，苯酚和邻苯二酚的同步荧光峰相差仅１０ｎｍ，结果表明，该法虽然能在苯酚存在的情况下测定邻苯二酚，但不能同时测定苯酚。     

催化荧光法测定痕量铁的研究

本利用Ｆｅ（Ⅲ）与四乙撑五胺协同催化过氧化氢氧化还原型二氯荧光素的反应，提出了测定痕量Ｆｅ（Ⅲ）的新催化荧光方法。方法的线性范围为０．０１－０．３０μｇ／２５ｍｌ，检出限为１．３×１０＾－＾１＾０ｇ／ｍｌ，常见离子不干扰测定。用于人发，指甲，血清和面粉中痕量铁的测定，回收率为９７％－１０４％。     

曙红Y与牛血清蛋白作用的荧光光谱

1引言蛋白质测定在临床医学和生命科学研究中有重要意义,这方面的研究引起人们的广泛兴趣,最常用的方法是用染料结合法,它们在酸性介质与蛋白质作用形成复合物,而后进行测定,荧光法测定蛋白质文献报道较少。在pH2．53的介质中,我们研究曙红Y与牛血清蛋白作用光谱,曙红Y最大吸收峰从513nm红移到529nm,荧光光谱发生显著变化,540nm（激发光波长308nm）荧光猝灭,其摔灭程度与BSA浓度成正比,据此拟定测定牛血清蛋白的荧光分析方法。该方法线性范围宽0－2．5mg/L,灵敏度高检出限可达2．8μg/L（3σ）,选择性好常见物质不干扰测定…     

荧光光度法测定核酸的研究进展

对荧光光度法分析检测核酸的基本原理及研究进展进行了综述。讨论了荧光染料、金属离子、金属络合物及纳米粒子等荧光探针在核酸检测中的应用,引用文献51篇。     

荧光分析法测定痕量亚硝酸根

在硫酸介质中,亚硝酸根能还原吡咯红Y,使其荧光猝灭据此提出了一个测定痕量亚硝酸根的荧光分析法,方法的检出限为2.7ng/mL,线性范围为6.0-88ng/mL,可直接用于电厂废水、自来水、井水中亚硝酸根的测定。