阴离子染料百里酚蓝与纳克级核酸的共振光散射光谱特性及其分析应用

在 p H6 .0 0— 7.0 0和离子强度低于 0 .0 5 0 mol/ L的条件下 ,研究了百里酚蓝 (TB) -十六烷基三甲基溴化铵 (CTMAB) -核酸体系的共振光散射光谱 (RLS) ,影响因素及最佳反应条件。在最佳条件下 ,体系的ΔIRL S与 y DNA、ct DNA和 fs DNA在一定的浓度范围内呈线性关系。检出限可达 1.30 ng/ m L。该方法简便、快速 ,具有较高的灵敏度和准确度 ,应用于合成样品中核酸的测定 ,结果令人满意     

生物大分子的共振光散射光谱

共振光散射技术是一项在普通荧光分光光度计上可实现分析领域中应用的新技术。本文阐述了共振光散射的基本原理 ,分类介绍了在生物大分子研究和测定方面的应用 ,分析了共振散射体系的新发展。     

间苯二酚黄-CTAB-核酸共振光散射体系的研究及应用

在PH3．1－3．5的柠檬酸－NaOH介质中，核酸（fsDNA，yRNA）与阳离子表面活剂CTAB对阴离子染料间苯二酚黄的共振黄的共振光散射光谱有 协同增强作用，在最佳实验条件下，fsDNA,yRNA的线性范围均为0－4μg/mL，检出限分别为8．1ng/mL和7.2ng/mL。据此建立了一种测定核酸的新方法。     

CoFe2O4纳米粒子的共振散射光谱研究

液相纳米粒子CoFe2O4在400，470，510，800和940nm产生五个共振散射峰。它是一种非线性光散射介质。当激发波长为330nm时，CoFe2O4纳米粒子分别在于330，660和990nm产生一个共振散射峰、一个1/2频散射峰和一个1/3分频散射峰；当激发波长为800nm时，在800nm产生一个共振散射峰，而在400nm产生一个较该共振散射峰更强的2倍频散射峰。分频散射和倍频散射与共振散射有相似的散射行为。根据建立的灰白粒子体系共振散射光谱原理定性解析了CoFe2O4纳米粒子体系的共振散射光谱。     

二甲苯兰FF-溴化十六烷基三甲基铵-核酸共振光散射光谱研究及分析应用

在pH9.90的Tris-HCl缓冲溶液中,阴离子染料二甲苯兰FF(XCFF)对阳离子表面活性剂溴化十六烷基三甲基铵(CTMAB)与核酸(fsDNA、ctDNA、yRNA)的共振光散射光谱有协同增强作用。考察了影响因素,在优化条件下研究了共振光散射强度与核酸浓度之间的关系,对于fsDNA、ctDNA、yRNA的线性范围分别为0.05—3.0mg/L、0.05—6.0mg/L、0.5—2.0mg/L,检出限分别为24.1、18.4、57.0μg/L。据此建立了一种测定核酸的新方法。     

硫化银体系共振散射光谱研究及分析应用

Triton X- 1 0 0存在下 ,在碱性介质中 ,Ag 与 S2 -形成 Ag2 S微粒 ,Ag 与 S2 -反应体系的共振光散射(RLS)明显增强 ,建立了水中痕量银的测定方法。Ag 浓度在 0 .0 1 1— 6 .0 0 μg/ m L范围内具有良好的线性关系 (r=0 .9992 )。方法检出限 3.5 6 ng/ m L;相对标准偏差 0 .5 3%— 1 .97%;样品加标回收率 92 .82 %—1 0 6 .0 0 %。方法简便 ,测定体系抗干扰的效果好 ,灵敏度高。     

共振光散射技术测定核酸的研究进展

核酸分析是生命科学研究中最重要的技术之一。目前主要是应用核酸内源紫外吸收光谱的紫外分光光度法和基于荧光探针分子与核酸相互作用的荧光分光光度法。紫外分光光度法灵敏度低 ,荧光分光光度法试剂昂贵 ,有毒性。近年来 ,共振光散射技术在核酸分析中的应用得到了迅速的发展。核酸的共振光散射分析方法可以用普通的荧光分光光度计进行测定 ,应用安全、便宜的试剂获得很高的灵敏度。简要介绍了共振光散射分析的基本原理 ,并对近年来利用共振光散射技术分析核酸的研究进行了评述。内容主要包括利用有机染料分子作为核酸的共振光散射探针的分析方法 ;基于阳离子表面活性剂、金属离子及其络合物以及药物与核酸相互作用的分析方法 ;核酸形成大粒子的散射分析方法。     

槲皮素的共振光散射光谱研究

研究了槲皮素(Qu)的共振光散射光谱和吸收光谱,结果表明,pH在3.30～6.50范围内,Qu的共振光散射信号很强且稳定,当pH＞6.50时,共振光散射强度随pH的增大而迅速减小。在pH 4.00的B-R缓冲溶液中,在λ=497 nm处,共振光散射强度在一定浓度范围内与Qu的浓度成线性关系,线性范围为0.0～3.0×10-4 mol·L-1, 相关系数r＞0.999, 检测限为3.1×10-7 mol·L-1。同时运用量子化学计算方法对Qu分子内、分子间氢键进行了计算,理论计算表明: Qu共振光信号增强的原因是Qu分子通过4-4’分子间氢键聚合形成了超分子聚合体, 这一结论和实验得到的光谱数据完全吻合。     

聚乙二醇光化学法制备金纳米微粒及共振散射光谱研究

采用共振散射光谱、紫外-可见吸收光谱、透射电镜对聚乙二醇(PEG)-Au3+纳米光化学反应进行了研究。讨论了金纳米粒子合成条件的影响,发现金纳米粒子的尺寸与PEG分子量大小有关。建立了一个利用不同分子量PEG制备一系列粒径为6～60 nm金纳米粒子的光化学合成新方法。根据PEG分子的空间位阻、疏水性等解释了PEG分子量不同而获得不同粒径金纳米粒子的原因。提出了一个合理的纳米光化学反应机理。     

核酸适配体纳米金共振散射光谱检测血清中钾离子

在pH7.0的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中,纳米金与适配体(aptamer)结合形成较稳定的aptamer-Au复合物,且不被NaCl聚集。在85℃水浴中,K+与aptamer作用后折叠形成稳定的G-四分体结构复合物且释放出纳米金。在高浓度盐作用下,纳米金聚集成较大粒径的纳米金颗粒,导致体系563nm处的共振散射强度增大,其平均粒径为120nm。文章研究了K+ -随机单链DNA1(ssDNA1)-纳米金、K+ -ssD-NA2-纳米金和K+ -aptamer-纳米金体系的共振散射光谱特性,并用圆二色光谱技术证明了核酸适配体结构的变化。考察了pH、NaCl浓度、aptamer浓度、纳米金用量以及Cu2+、Mg2+、Pb2+、Ca2+、Al3+、Zn2+Fe3+等常见重金属离子等对测定K+的影响,结果显示这些离子不干扰测定,该法具有较好的选择性。在选定条件下,K+浓度在0.67～3350μmol·L-1范围与共振散射峰值ΔI呈良好的线性关系,回归方程、相关系数、检出限分别为ΔI=0.167c-0.7,0.9932,0.3μmol·L-1 K+。该法用于血清样品分析,结果与离子选择电极法一致。     

阿特拉津与RNA作用的共振光散射光谱及其应用

研究了阿特拉津与yRNA作用的共振光散射光谱 (RLS)和电子吸收光谱特征。建立了利用小分子农药阿特拉津作为探针测定痕量RNA的方法。在pH 1 5 0的酸度条件下 ,阿特拉津 yRNA系统在 32 0nm处有一增强的共振光散射光谱峰 ,且增强的共振散射光强度与 yRNA的浓度呈线性关系。在实验确定的优化条件下 ,RLS强度与 yRNA浓度的线性范围为 0 6～ 5 0 μg·mL-1,线性方程为I =2 5 88+14 0 0c(yR NA ,μg·mL-1) ,相关系数r =0 9975。方法的检出限为 2 0 7ng·mL-1(3δ)。该方法成功地用于人工混合样品和小盐芥中RNA含量的测定。对阿特拉津与RNA作用机制的研究表明 ,阿特拉津与RNA之间存在静电引力和嵌入式两种作用模式     

共振光散射法研究甲萘威与DNA的作用及其应用

通过共振光散射光谱(RLS)和电子吸收光谱的特征,探求了甲萘威与ctDNA的结合方式,实验表明在pH 1.97的条件下,甲萘威与ctDNA既有表面聚集又有嵌入式结合的双重作用,结合形式与二者之间的浓度比有关。在此条件下,甲萘威与ctDNA作用的RLS强度与ctDNA的浓度呈线性关系,据此建立了一种简单快速测定ctDNA的新方法。ctDNA的浓度在0.02～3 μg·mL-1的范围内与RLS强度呈良好的线性关系,线性方程为I= 200.77c(μg·mL-1)+118.91,相关系数r=0.998 9。该方法已成功地用于人工混合样品的测定。     

载脂蛋白免疫复合物微粒的共振散射光谱研究及分析应用

在pH 6.8的Na₂HPO₄-NaH₂PO₄缓冲溶液中和聚乙二醇存在下,载脂蛋白A1(APOA1)、载脂蛋白B(APOB)与相应的抗体发生特异性结合,分别形成粒径约为180,140 nm的抗体抗原免疫复合物微粒,导致体系在340,470 nm处的共振散射峰增强。分别研究了pH、抗血清、聚乙二醇浓度、温育时间和共存物质的影响。在最佳条件下,APOA1浓度在8.4～430.0 ng·mL-1, APOB浓度在14.8～590.0 ng·mL-1范围内与其共振散射强度成良好线性关系,方法的检出限分别为6.2和7.0 ng·mL-1,用于定量分析血清中的APOA1与APOB, 获得满意结果。     

格拉司琼与磷钨杂多酸相互作用的共振光散射及分析应用

在pH 2.2 BR缓冲介质中, 磷钨杂多酸(PTA)与格拉司琼(GSN)相互作用形成离子缔合物, 不仅引起吸收光谱的变化, 还导致共振散射光谱(RLS)的显著增强并产生新的RLS光谱, 最大RLS峰位于333 nm附近, 其RLS增强程度与格拉司琼浓度成线性关系, 检出限和线性范围分别为12 ng/mL和0.04～3.0 μg/mL。文中研究了反应产物的吸收和RLS光谱特征, 优化反应条件的影响, 据此发展了以磷钨杂多酸为光谱探针的灵敏、简便、快速测定格拉司琼的新方法。将方法用于血清中格拉司琼含量的快速定, 结果满意。讨论了离子缔合反应和RLS增强机理。     

阿霉素与DNA作用的共振光散射研究及在DNA分析中的应用

研究了抗癌药物阿霉素与DNA相互作用的吸收光谱、荧光光谱和共振光散射光谱,发现阿霉素与DNA相互作用产生强烈增强的共振光散射信号,共振光散射技术在研究DNA与阿霉素的相互作用时,其灵敏度远远高于吸收光谱和荧光光谱。DNA与阿霉素作用在322与564 nm处产生两个共振散射峰,在弱酸性条件下(pH 5.72),DNA的浓度在0～8.0 μg·mL-1范围内与散射强度呈良好的线性关系,对小牛胸腺DNA和鱼精子DNA的检出限分别为36.8和40.1 ng·mL-1。由此建立了一种选择性好,灵敏度高的DNA共振光散射分析方法。     

共振光散射探针在核酸分析中的应用

核酸是生命现象的物质基础,核酸的分析测定在医学和生物学研究中有重要的意义.共振光散射技术是研究小分子物质与核酸发生作用并形成聚集体后的灵敏探测技术.本综述引用了32篇文献,介绍了近年来共振光散射探针在核酸分析中的研究进展,并评价了各种方法的优劣.     

Spectroscopic Study on the Interaction of Pyronine Y with Nucleic Acids and Its Analytical Application

ABSTRACT

The interaction of pyronine Y (PY) with nucleic acids was studied by resonance Rayleigh scattering (RRS) for nucleic acid detection. The enhanced RRS intensity of nucleic acids reacted with PY was proportional to the concentration of nucleic acids in the ranges of 27.0–625 ng ml^?1 for fish sperm DNA, 39.0–500 ng ml^?1 for calf thymus DNA, and 59.0–375 ng ml^?1 for yeast RNA. The limits of determination were 0.2 ng ml^?1 for fish sperm DNA, 0.6 ng ml^?1 for calf thymus DNA, and 0.7 ng ml^?1 for yeast RNA. The method had been successfully applied to the quick determination of nucleic acids in synthetic and natural samples.