用离子交换法从发酵液中提取1,6-二磷酸果糖

在发酵生产１,６－二磷酸果糖的提取工艺中,对提取总率影响较大的离子交换工艺进行了研究,结果表明,用南开大学化工厂生产的ＮＫ－Ｄ３０１Ｃ１型树脂对已预处理的ＰＨ为２的发酵液中１,６－二磷酸果糖进行动态交换吸附,当上柱流速控制在２５ｍｌ／ｍｉｎ条件下,其交换量为０．７０６ｍｍｏｌ／ｍｌ,用０．０１ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ－０．０１５ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ和０．４ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ－０．１５ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ分步洗脱,流速控制在２５ｍｌ／ｍｌ时,其洗涤效果最好,离子交换工序收率大于９０％。     

蛇肌果糖1,6-二磷酸酯酶的磷酰化部位与磷酰化条件

本文报道了从磷酰化的果糖1,6-二磷酸酯酶的胰蛋白酶水解物中分离得到了一个磷酰化的肽段及该肽段的氨基酸排列顺序和磷酰化的部位是在丝氨酸残基上。果糖1,6-二磷酸,果糖6磷酸和腺嘌呤核苷-磷酸等效应剂不影响该酶被无机正磷酸磷酰化。pH对磷酰化程度的影响和对酶活力的影响一致。磷酰化酶的活力比非磷酰化状态的酶活力稍低,活力的差别随着底物浓度的减小而增大。磷酰化的酶与Mg~(2+)和果糖1,6-二磷酸一起保温能脱磷酰化,本文结果进一步支持了蛇肌果糖1,6-二磷酸酯酶在催化果糖1,6-二磷酸水解的过程中,包含了形成磷酰化酶中间物这一过程。     

1,6—二磷酸果糖在阴离子交换树脂上的分离因数的研究

筛选树脂时应综合考虑树脂的吸附容量和分离因数,本文对１,６－二磷酸果糖在７１７强碱性阴离子交换树脂和ＨＪ－３０弱碱性离子交换树脂上的分离因数作了研究。结果发现,浓度和ＰＨ对ＦＤＰ在７１７树脂上的分离因数ａ＾ＦＤＰ ｃｌ和ａ＾ＦＤＰｐｉ的影响很小,     

用反相高效液相色谱法测定人体血浆中盐酸氟桂利嗪含量

采用反相高效液相色谱法以桂利嗪为内标测定人体血浆中盐酸氟桂利嗪的含量.以V甲醇:V乙腈:V缓冲液=58:20:22的体系为流动相,用hypersilBDSC8不锈钢色谱柱、紫外检测器(检测波长254nm),血浆样品经乙酸乙酯萃取处理后进样测定.血浆中盐酸氟桂利嗪的含量在5～300μg/L范围内与盐酸氟桂利嗪的峰面积和桂利嗪的峰面积之比呈线性关系(r=0.9997),方法对盐酸氟桂利嗪的平均回收率为83.3%～85.0%,检出限为3μg/L(S/N=3).用该法测定了12名单次口服30mg西比灵(盐酸氟桂利嗪)胶囊的健康志愿者血浆中盐酸氟桂利嗪含量.结果表明,该药在血浆中含量平均达峰时间为(2.67±0.91)h,平均峰质量浓度为(154.9±66.0)μg/L.该法适用于盐酸氟桂利嗪药代动力学的临床监测和研究.     

弱碱性阴离子交换树脂分离1,6—二磷酸果糖的研究

采用弱碱性阴离子交换树脂HJ-30对发酵液中1，6-二磷酸果糖的分离进行了研究。详细地研究了树脂的吸附和脱附性能。实验结果表明，HJ-30树脂对FDP的吸附量达0．28gFDP／g湿树脂，以0．05mol／LNaCl洗脱光机磷和1mol／LNaCl洗脱1，6-二磷酸果糖，产品的收率和纯度分别为92％和99．4％。     

果糖-1,6-二磷酸盐和硫酸镁在水及血浆中的电导

果糖-1,6-二磷酸镁(monomagnesium fructose-1,6-diphosphate,FDPMg)分子有药效,其保护心肌缺血性损伤的效果优于果糖-1,6-二磷酸钠(trisodium fructose-1,6-diphosphate,FDPNa)和硫酸镁。本文考察FDPMg等在水溶液和血浆中的解离情况。     

血浆中洛伐他汀含量测定的色谱-质谱法

用色谱－质谱法测定血浆中洛伐他汀,采用辛伐他汀作内标,以乙酸乙酯为萃取液,经真空抽干,定容进样。洛伐他汀质量浓度在０．３６～４８ｍｇ／Ｌ之间线性关系较好。该法灵敏度高,前处理简单快速,检出限达０．１ｍｇ／Ｌ,相对标准偏差小于８．９％,回收率大于９２％。     

反相高效液相色谱法测定血浆中氢溴酸右美沙芬浓度

报道了反相高效液相色谱法测定血浆中氢溴酸右美沙芬 ( DM)方法。采用Novapak C84μm,1 5 0 mm× 3.9mm i.d.分析柱 ,以乙腈∶水 =5 0∶ 5 0 ( V/V ,加0 .5 % HAc,三乙胺调节 p H至 4.3)为流动相 ,荧光检测器检测 ,DM的最小检出浓度为 0 .2 ng/m L。方法回收率为 93.71 % ,变异系数 3.5 3% ,操作简便 ,灵敏度高 ,适于血浆中 DM测定及药代动力学研究     

HPLC-MS测定大鼠血浆中单硝酸异山梨酯

建立了高效液相色谱-质谱法测定血浆中单硝酸异山梨酯浓度的方法.以茶碱为内标,样品在碱性条件下,用乙酸乙酯提取,高效液相色谱-质谱(MSD)检测.线性范围为0.034 64~103.0 mg/L,回收率为93.1%~112.0%,相对标准偏差小于6%.该法处理血浆简单,检测结果准确度高,专一性强,适用于药代动力学和生物利用度研究.     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中福斯克林

建立了测定大鼠血浆中福斯克林的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS).血浆样品经液-液萃取后,以V(甲醇):V(10 mmol/L 醋酸铵):V(甲酸)=75:25:0.1为流动相,用Hypersil ODS柱分离,流速0.8 mL/min(柱后分流50%),通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多反应监测方式(MRM)检测.用于定量分析的离子分别为m/z 428/375(福斯克林)和m/z 494/369(格列本脲,内标).福斯克林血浆浓度测定方法的线性范围为0.8～800 μg/L; 日内、日间精密度(RSD)均小于10%;准确度(RE)小于±9%.每个样品测试时间4.5 min.应用此法测试了大鼠口服或静注福斯克林后的血药浓度.     

酶催化动力学荧光法测定乙醇

利用醇脱氢酶(ADH)催化乙醇与氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)反应的原理,通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)荧光强度的变化率得出其酶促反应速度,对应乙醇浓度而制得标准曲线,试样中乙醇含量由标准曲线求得,检出限为4.0×10-6mol/L。考察了试剂用量、pH、共存组分对测定的影响。该方法简便、快速、准确。     

乙醇含量的酶法测定

利用醇脱氢酶(ADH)催化乙醇与氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)反应的原理，通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)吸光度的变化率得出其酶促反应速度，对应不同的乙醇含量而制得标准曲线，试样中乙醇含量由测定值查标准曲线求得；讨论了pH值和抑制剂对测定的影响；方法简便、快速、准确。     

A Modified Enzymatic Method for the Estimation of Dihydroxyacetone

Abstract

A two stage assay procedure has been developed for the estimation of dihydroxyacetone (DHN). DHA is at first phosphorylated to dihydroxyacetone phosphate (DHAP) by glycerokinase (GK) and ATP at pH 8.5. The DHAP formed is then measured enzymatically using glycerol-3P dehydrogenase (GDH) and NADH at pH 7.6. The sensitivity of this method is found to be adequate for both routine assays and kinetic studies.     

酶法测定人尿中L-瓜氨酸含量

L-瓜氨酸是人体多种疾病的重要检测指标。利用鸟氨酸甲氨酰转移酶和氨甲酰激酶对L-瓜氨酸的专一性作用,建立了一种准确、简便、灵敏的L-瓜氨酸含量酶法测定方法。较为适宜的酶转化条件是:30℃~35℃,pH6~7。固定化酶有较高的稳定性,4℃保存60d后酶活回收率仍高达95%。该方法测定L-瓜氨酸的线性范围为2~10mg/L;工作曲线回归系数r=0.9987;样品回收率达99%以上。     

微波消解同时衍生化GC-MS法测定血浆中脂肪酸的研究

研究了利用微波能对样品进行加热, 以Ｈ２ＳＯ４ － 甲苯－ 甲醇体系作衍生化试剂, 在消化的同时对血浆中的脂肪酸进行衍生化, 然后用ＧＣ－ ＭＳ 法测定血浆中脂肪酸。 对微波功率、微波加热时间、消解及衍生化试剂等条件进行了优化, 测定结果较好。该法整个消化及衍生化过程只需２ ｍｉｎ , 与传统方法相比大大缩短了实验操作时间, 特别适用于大量样品的测定。     

单扫描极谱法测定注射液及血清中维生素K1

建立了维生素K1的极谱测定方法.在0.05 mol·L-1 NH4Cl-NH3(pH 8.58)缓冲溶液中,维生素K1可产生一极谱还原峰,峰电位Ep为-0.39 V ;其二阶微分峰峰电流ip″与维生素K1的浓度在1.1×10-7 ～2.2×10-5 mol·L-1范围内呈线性关系,相关系数r=0.998 6(n= 9 );方法的检出限为4.0×10-8 mol·L-1.13次平行测定2.2×10-5 mol·L-1维生素K1还原波二阶导数峰峰电流ip″的相对标准偏差(RSD)为1.83%.本法可直接用于注射液及血清中维生素K1含量的测定.     

酶法测定水中的尿素含量

利用脲酶、谷氨酸脱氢酶偶联催化尿素水解的原理,通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸吸光度变化率得出其酶促反应速度,对应不同的尿素浓度制得标准曲线,讨论了ｐＨ值和抑制剂对测定的影响,实测了水样中尿素的含量。     

A Simplified Method for Determination of Nifedipine in Human Plasma by High Performance Liquid Chromatography

Abstract

A simplified high performance liquid chromatographic method was developed to determine the levels of nifedipine in human plasma. Nifedipine and the internal standard, 11-ketoprogesterone, are extracted from alkalinized plasma into organic solvent. The organic solvent is then evaporated to total dryness and the analytes are reconstituted with mobile phase and chromatographed. The limit of quantitation is 10 ng/ml using a 1.0 ml plasma sample.