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通过圆二色谱分析研究了PEG-醛修饰胰岛素产物在溶液中的构象变化,采用加速振荡实验研究了PEG化对胰岛素纤维化的影响,以体外酶解实验考察了PEG-醛修饰胰岛素产物的抗酶解能力.结果表明,经PEG-醛修饰可以减少胰岛素单体的自缔合,提高胰岛素在溶液中的稳定性,抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶对胰岛素的降解. 相似文献
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本文报道DTT还原,DTNB氧化以及NEM修饰对小鼠肝膜巯基含量和与胰岛素受体特异结合的影响。DTT还原导致膜巯基含量和与胰岛素特异结合平行增加,Scatchard分析表明胰岛素结合位点的数目仅有微小变化,但结合常数增高到原来的二倍。用含有DTT的缓冲液洗涤已饱和结合了胰岛素的膜比用不含DTT的缓冲液,导致结合在膜上的胰岛素解离下来的量明显升高,说明有一部分胰岛素与其受体的结合是通过巯基—二硫键交换反应形成共价的二硫键。加入DTT使这种“二硫键联接”的胰岛素也从受体上解离下来。DTNB或NEM对膜与胰岛素的特异结合几乎没有影响,但对已被DTT还原的膜似有逆转DTT还原的效应,推测,鼠肝膜胰岛素受体上可与胰岛素发生共价结合的巯基中,有一部分是不能与DTNB发生反应的,DTT处理膜使胰岛素受体产生更多的巯基而使胰岛素特异性结合,特别是使通过共价二硫键的结合增加。 相似文献
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锌离子在胰岛素中扮演着非常重要的角色,这是因为通过金属离子与蛋白质之间的相互作用,使得胰岛素的结构发生变化并影响胰岛素的生物功能。因此,去锌胰岛素在金属和蛋白识别以及结构研究中是必需的。该文采用乙二胺四乙酸(EDTA)二钠盐与锌离子进行配合作用形成稳定的[Zn-EDTA]2-配合物来去除胰岛素中的锌离子,然后用Sephadex G-25柱对体系进行凝胶过滤,以除去胰岛素中的配合物和原有的苯酚,并用电喷雾离子化质谱对分离的物质进行鉴定。结果显示除去锌离子的胰岛素与EDTA配合物的分离效果良好。采用原子吸收光谱来检验胰岛素馏分中锌离子的去除效果,结果显示94.3%的锌离子被去除,表明EDTA配合锌离子的效果显著。所有结果均表明该方法可用来制备去锌牛胰岛素。 相似文献
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胰岛素侧链氨基的酰化是胰岛素化学修饰较常用的方法。天然胰岛素分子中有三个裸露的氨基,即G lyA1、PheB1的α-氨基和LysB29的ε-氨基,都可作为胰岛素化学修饰的位点。酰化试剂通常经由N-羟基琥珀酰亚胺酯对胰岛素进行修饰。N-羟基琥珀酰亚胺酯可由羧酸与N-羟基琥珀酰亚胺(HOS 相似文献
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本文以胰岛素、[D-Ala]~(B_0)胰岛素和去B_1去五肽胰岛素(均为11.2ng/ml)分别与猪肝膜保温,分离所得的介体组份1(分子量约为3700D)对大鼠脂肪细胞脂肪合成的促进作用与胰岛素及其上述类似物的直接作用相比较。结果表明,诱导的介体组份1对脂合成的促进作用依次为:胰岛素介体>[D-Ala]~(B_0)胰岛素介体>去B_1去五肽胰岛素介体。这与胰岛素及上述类似物的直接作用吻合。实验还研究了该介体在酸性和中性条件下的性质,并发现该介体对链霉蛋白酶和神经氨酸苷酶敏感,提示该介体可能为一糖肽。 相似文献