亲水作用色谱法测定表阿霉素及其杂质

建立了一种以亲水作用色谱分离测定表阿霉素的新方法。采用硅胶色谱柱及高极性有机溶剂水相缓冲溶液流动相。对流动相的pH、缓冲溶液的浓度及流速进行了优化,确定了以乙腈甲酸钠缓冲溶液(pH2.9)(90∶10,V/V)作为流动相的最佳条件。对优化的分离条件进行系统适应性实验,结果表明表阿霉素与有关杂质之间的分离度和拖尾因子均达到药典要求。该法具有良好的线性(相关系数0.9971～0.9991)和重复性(峰面积RSD<1.0%),方法简便实用,用于实际样品分析,结果满意。     

碳青霉烯类抗生素亲水作用色谱方法研究及其应用

建立了测定人尿液和自来水中4种碳青霉烯类抗生素(比阿培南、美罗培南、多利培南和厄他培南)的亲水作用色谱方法,所用流动相具有较好的质谱兼容性,可用于色谱-质谱联用。以XAmide为色谱柱,考察了乙腈比例、缓冲盐浓度和pH值对4种抗生素保留的影响,提出了可能的保留机理;所发展的方法对目标样品具有良好的线性响应:比阿培南、多利培南和厄他培南的线性范围为0.1~250 mg/L, R²=0.9999;美罗培南的线性范围为0.5~250 mg/L, R²=0.9998; 4种抗生素的定量限(LOQ)为0.1~0.5 mg/L。尿液样品和自来水样品在5 mg/L和25 mg/L两个水平的加标回收率分别为100.4%~111.9%和79.6%~107.4%,相对标准偏差(RSD)分别不大于1%和5%。该方法准确、灵敏、简便,可用于人尿液和自来水中多种碳青霉烯类抗生素的检测。     

丙烯腈合成过程中丙烯腈及其杂质的色谱分析

１引言采用丙烯氨氧化法合成丙烯腈，在反应生成丙烯腈的同时，还有一些副产物如乙腈、丙烯醛、丙烯酸、ＣＯ、ＣＯ２等杂质生成。文献报道的丙烯腈及其杂质分析方法主要有极谱法、光谱法和色谱法，其中色谱法最为常用。对于色谱法分析，国标中指定固定相是ＧＤＸ－５０２，于桂霞等使用ＧＤＸ－１０２和上试４０２有机载体混装填充柱。这类固定相的主要缺点是使用一段时间后保留值改变，分离度下降且分析时间较长。近来文献有关丙烯腈色谱分析改进方法大多涉及到毛细管柱的使用。本文采用ＦＦＡＰ毛细管色谱法内标定量、同时测定丙烯腈、乙…     

新型四肽亲水材料用于糖肽的高效富集

本研究采用原子转移自由聚合(Atom-transfer radical-polymerization, ATRP)法合成了一种新型四肽亲水作用色谱材料 (Poly-DAPD),用于糖肽的选择性富集.通过氮气吸脱附、热重分析和X射线光电子能谱等技术进行表征,结果表明,四肽已成功接枝到硅球上.固相萃取富集实验表明,合成的亲水材料对牛胎球蛋白(Fetuin)糖肽富集选择性高;与商品化ZIC-HILIC材料相比,Poly-DAPD材料富集掺有5摩尔倍数牛血清蛋白(BSA)的Fetuin样品时,在获得的糖肽数目及抗干扰性能方面都更具优势.此Poly-DAPD材料可进一步用于不同糖蛋白的糖基化分析研究.     

亲水作用色谱填料的研究进展

亲水作用色谱是一种新型的色谱分离模式.此类色谱模式集反相色谱的经济廉价与正相色谱的优点于一体,有效补充了反相色谱的不足.简单介绍实验室中合成的新型亲水色谱固定相.     

固相萃取-亲水作用色谱法测定废水中四环素类抗生素

建立了固相萃取(SPE)-亲水作用色谱法(HILIC)测定废水中金霉素(CTC)、强力霉素(DC)、四环素(TC)和土霉素(OTC) 4种四环素类抗生素(TCs)残留的新方法.水样经Oasis HLB固相萃取柱净化富集后, 采用以氨基色谱柱及高极性有机溶剂-水相缓冲溶液为流动相的亲水作用色谱法(HILIC)进行分析. 对流动相中缓冲溶液的类型和pH值、离子强度、 有机溶剂的浓度以及流速进行了优化, 确定了以V(乙腈)∶V(6.7 mmol/L柠檬酸铵缓冲溶液, pH 4.0)=85∶ 15混合液为流动相的最佳条件.本方法具有良好的线性关系(r> 0.999)和重现性(峰面积RSD<1.0%), 最低检出限(S/N=3)为12～30 μg/L, 4种四环素类药物添加水平在0.5～10 μg/L范围内的标准加入回收率为 90.6%～106.5%; 相对标准偏差为 2.5%～6.2%.本方法简便、准确、流动相离子强度低,适合于与质谱联用,用于屠宰场污水及医院污水等实际样品检测,结果满意.     

一种弱阳离子交换材料的亲水模式糖肽富集新方法

亲水作用色谱(HILIC)材料在糖肽的富集与分离中得到越来越广泛的应用. 针对目前HILIC材料糖肽选择性不足的缺点, 发展新的糖肽富集方法十分必要. 本工作发展了一种商品化的弱阳离子交换材料(WCX)在亲水模式下对糖肽的富集方法. 首先考察了微固相萃取(SPE)模式下WCX上多肽保留的机理. 结果显示, WCX上糖肽的保留同时受乙腈含量和pH的影响. 将WCX用于牛胎球蛋白(fetuin)胰蛋白酶酶解液中糖肽的富集, 获得了39条糖肽信号. 当fetuin与牛血清白蛋白(BSA)酶解液以物质的量比1:5混合时, 富集到26条糖肽信号. 富集人免疫球蛋白(IgG)胰蛋白酶酶解液时获得25条糖肽信号, 1:5时获得23条糖肽信号. 实验说明WCX对唾液酸化和非唾液酸化糖肽的富集均有高选择性. 该方法拓展了WCX的应用范围, 丰富了HILIC材料的种类.     

亲水作用色谱及其在碱性药物分析中的应用

亲水作用色谱是采用极性固定相、高含量极性有机溶剂-水相缓冲液为流动相的一种分离技术,它能有效地保留反相色谱中保留弱或不保留的强极性碱性药物。本文综述了以未键合硅胶为固定相的亲水作用色谱分离碱性药物的机理、特点及其应用的最新进展。     

亲水作用色谱及其在环境分析中的应用进展

亲水作用色谱(HILIC)是一种分离极性和亲水性化合物的液相色谱模式,其作为反相液相色谱(RPLC)的重要补充,近年来越来越受到各个领域的关注和重视。这不只是因为强极性化合物的分离问题在各个领域引起了重视,而且因为与RPLC比较,HILIC具有流动相组成黏度低、色谱柱渗透性好、与质谱联用的灵敏度高及反压较低等优势。本文简要概述了HILIC的发展历程、特点及保留机理,重点介绍了HILIC用于环境分析的最新进展,评述了HILIC及RPLC用于污染物分析的优缺点,并指出了HILIC用于环境分析的未来发展趋势。     

高效液相色谱法亲水作用模式在亲水化合物分析中的应用

介绍一种新的高效液相色谱法（HPLC）在高极性亲水性化合物分离分析中的应用实例,扩充了仪器分析实验教材中关于HPLC分析对象的范围,使学生在教学过程中更加全面地认识HPLC技术的应用领域。使用Merck公司ZIC®-HILIC色谱柱为分离介质,以典型的医药化工产品胞嘧啶为对象,建立适用其质量控制的测定方法。通过对亲水作用色谱的介绍,实验参数的优选和详尽的方法学验证,以期使读者对该方法有清晰的了解,在生命科学、药学和化工专业的仪器理论和实验教学中增加新的案例。     

亲水作用色谱法测定组织中全基因组DNA甲基化水平

建立了亲水作用色谱(HILIC)测定组织中全基因组DNA甲基化水平的方法。采用苯酚-氯仿提取组织中的DNA,提取的DNA用88%甲酸在140 ℃下裂解,经N2吹干后,加乙腈-水(9:1, v/v)溶解,用Waters BEH HILIC柱进行分离,在277 nm波长下检测胞嘧啶(Cyt)及5-甲基胞嘧啶(5-mCyt)含量。结果表明,以乙腈-10 mmol/L甲酸铵溶液(94:6, v/v)为流动相,流速为0.5 mL/min, Cyt与5-mCyt分离较好,保留时间分别为2.6与3.1 min。胞嘧啶的线性范围为1～900 μmol/L,相关系数为0.9999; 5-甲基胞嘧啶的线性范围为1～64 μmol/L,相关系数为0.9998。胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的检出限为54 nmol/L(柱中为0.54 pmol),定量限为250 nmol/L(柱中为2.5 pmol);在5～900 μmol/L的添加水平下,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的平均加标回收率为94.7%～100.5%,相对标准偏差小于1.48%。用该方法检测了结肠癌组织中DNA甲基化水平,结果显示该癌组织中全基因组的DNA甲基化均值为4.0%。该方法快速、简单,稳定性好,灵敏度较高,能满足全基因组DNA甲基化的检测要求。     

糖类化合物亲水作用色谱保留行为评价

以糖类化合物为研究对象,系统评价了其在亲水模式下的色谱保留行为。分别考察了流动相、固定相和缓冲盐等对糖类化合物保留的影响,建立了糖类化合物在亲水模式下的保留方程。结果表明,糖类化合物随着流动相中乙腈比例的降低,保留时间减小;随着缓冲盐浓度的增加,保留时间增加;同时,糖类化合物的保留行为还会受到有机溶剂种类和固定相类型的影响;其保留行为可使用顶替吸附-液相相互作用模型定量描述。将该模型进一步用于实际样品中糖类化合物保留行为的预测,获得了较好的实验结果,预测保留时间与实测保留时间的相对误差小于0.3%。对糖类化合物亲水模式下的保留行为进行了系统的评价和定量描述,该研究结果将有助于糖类化合物亲水作用色谱分离方法的发展。     

应用亲水作用色谱检测鸡蛋和肉中三聚氰胺及三聚氰酸二酰胺

应用亲水作用色谱(HILIC)对从市场上购买的鸡蛋和肉中的三聚氰胺及三聚氰胺降解产物三聚氰酸二酰胺进行了检测。采用的色谱柱为ZIC-HILIC柱,流动相为3 mmol/L磷酸二氢铵溶液(pH 6.9)-乙腈(20:80, v/v),流速为0.8 mL/min,检测波长为220 nm。在该体系下,三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的保留时间适中,与样品中的内源性物质有良好的分离。样品经0.1%磷酸提取,偏磷酸及乙腈沉淀蛋白质和糖类物质,以及P-SCX固相萃取柱净化。三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺在0.4～40 mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,样品定量限(按信噪比(S/N)不小于10计)为2 mg/kg,在2～10 mg/kg添加水平下的平均回收率为80%～105%,相对标准偏差小于10%。该方法具有良好的分离选择性,可用于鸡蛋和肉中三聚氰胺和三聚氰酸二酰胺的同时检测。     

亲水作用色谱-电雾式检测用于5种抗病毒药物的定量分析

抗病毒药物具有广泛的应用,对人类和动物的健康有着重要的作用。但抗病毒药物紫外吸收差异大、极性分布广,要实现该类药物的同时分析较为困难。本实验以Click TE-Cys为固定相,结合电雾式检测(CAD),建立了多种抗病毒药物同时分离分析的方法。考察了不同的检测器、色谱模式、色谱柱和流动相对抗病毒药物峰形、分离选择性及检测信号响应的影响。在优化的条件下定量分析了5种抗病毒药物,结果证明该方法具有较好的日内重复性(RSD≤3.06%)和日间重复性(RSD≤5.38%)。同时,该方法还具有较宽的线性范围(0.07~2.28 mg/mL)和较高的灵敏度(LOQ≤0.04 mg/mL),可用于相关药物的定量、定性分析。     

亲水/反相二维制备液相色谱法分离纯化络石藤中的化学成分

建立了亲水/反相二维制备液相色谱(Pre-2D-HILIC/RPLC)分离纯化络石藤中化学成分的分析方法。络石藤药材经醇提、活性炭脱色后用反相固相萃取柱除去色素和强极性物质,最终得到干燥的浅黄色粉末。一维亲水色谱选择Click XIon色谱柱(250 mm×20 mm,10μm)作为固定相,水和乙腈作为流动相,进行梯度洗脱,以紫外触发模式收集馏分,共得到15个组分。二维反相色谱选择C18色谱柱(250 mm×20 mm,5μm)作为固定相,水和乙腈作为流动相,进行梯度洗脱,最终得到14个高纯度化合物,并通过质谱和核磁共振对其进行确认。实验结果表明,该法具有良好的正交选择性,可以有效提高分离度和峰容量,对于分离络石藤等复杂样品具有重要意义。     

亲水/反相二维色谱法制备桔梗中的三萜皂苷

建立了亲水/反相二维色谱用于制备桔梗中三萜皂苷单体的方法。桔梗经水煮醇沉、反相和亲水两种模式的固相萃取后得到三萜皂苷类组分。选定XAmide色谱柱（150 mm×20 mm,5 μm）,以乙腈和水为流动相,在亲水色谱模式下进行组分制备。选择时间触发模式,以1 min为单位进行馏分收集,得到6~25 min之间的20个三萜皂苷精细组分。以第18个馏分（JG23）为例,在反相色谱模式下采用Atlantis Prep T3色谱柱（100 mm×30 mm,5 μm）制备,得到两个单体化合物。通过质谱和核磁共振对其进行定性,确定分别为deapi-platycoside E和platycoside E。实验结果表明,该制备方法具有好的正交选择性,对于复杂样品中三萜皂苷类化合物的分离纯化有一定的借鉴意义。     

亲水作用色谱法测定胡芦巴中的胡芦巴碱

建立了亲水作用色谱法(HILIC)测定胡芦巴药材中胡芦巴碱含量的方法。采用Waters Atlantis HILIC Silica色谱柱(150 mm×2.1 mm, 3 μm),以乙腈-乙酸铵溶液(pH 4.4)(体积比为70:30)为流动相,流速0.4 mL/min,检测波长265 nm。胡芦巴碱的线性范围为2.50～100 mg/L (r=0.9996);两个加标水平的平均加样回收率为102%,相对标准偏差(RSD)分别为4.17%和2.28%(n=3)。结果表明所建方法分离效果好、快速简易,可以弥补中国药典中离子对色谱法(IPLC)平衡时间过长的缺陷,适用于胡芦巴药材中强极性胡芦巴碱的测定,为胡芦巴的质量控制提供了有效的方法。     

低共熔溶剂——新型亲水作用色谱流动相改性剂

低共熔溶剂被用作亲水作用色谱流动相的新型改性剂。选用硅胶柱(150 mm×4.6 mm, 3 μm),以乙腈与低共熔溶剂(氯化胆碱-乙二醇(摩尔比为1:3))的混合溶液为流动相,考察了6个碱基与核苷的色谱分离效果,并讨论了低共熔溶剂在流动相中的比例及温度条件对分离的影响。结果表明,与传统的水相流动相条件相比,在加入低共熔溶剂改性后的流动相条件下,碱基与核苷分离效果得到明显的改善,尤其是胞嘧啶与胞苷能达到完全分离;同时,随着低共熔溶剂在乙腈中浓度的增加,6个碱基与核苷在色谱柱上的保留均有不同程度的减小,其中胞苷的保留减小最为显著;随着柱温的升高,碱基与核苷的保留同样有所减小。本文验证了低共熔溶剂作为亲水作用色谱流动相改性剂的可行性,可在一定程度上解决传统亲水作用色谱分离的困难。