漆树漆酶的催化氧化作用（X）：叔丁基儿茶酚类底物的漆酶…

对６个汉丁基的儿茶酚类底物的离解和漆酶催化氧化反进行了考察，结果表明，叔丁基的存在，有利于增进对底物的结合，并可以利用漆酶活性中心周围提供的ＰＨ环境和质了体性质，促进底物的离解，使这类底物能在无于其一级离解的弱酸性环境中进行反应，由于叔丁基的特性和漆酶的微环境效应的共同作用，这些底物在ＰＨ＝６．０的水溶液环境中都能顺利地氧化成相应邻醌，并具有合成价值，ＥＳＲ结果证明，这些底物在弱酸性条件下的漆酶催     

漆酶催化氧化水中有机污染物*

漆酶是一种含铜的多酚氧化酶, 属于铜蓝氧化酶蛋白, 能催化氧化多种难降解的有机污染物。漆酶催化氧化水中有机污染物具有底物广泛、能耗低、易操作、环境友好等优点,是一项前景广阔的生物处理技术。本文综述了漆酶对水中有机污染物的催化降解,主要从漆酶的化学组成、结构、催化降解机理、漆酶的固定化、影响因素（溶液pH值、温度、金属离子、营养因子、有机溶剂、漆酶的浓度、底物的初始浓度等）、降解的动力学以及漆酶在处理水中有机污染物的应用等五个方面介绍了相关的研究进展。漆酶催化氧化有机物的机理主要表现在底物自由基中间体的产生和氧气还原成水两个方面。本文提出了目前漆酶催化氧化水中有机污染物存在的主要问题,并展望了漆酶降解水体中有机污染物的发展方向。     

醇水介质中漆酶催化氧化漆酚及其类似物

本文作者在醇水介质中对漆酚及其类似物的酶催化氧化反应进行了研究。探讨了混合溶剂中漆酶的行为。结果发现邻苯二酚被烷基取代后更有利于漆酶的催化氧化。反应可能经过两个步骤,先是底物氧化生成黄色苯醌类物质,然后醌类中间物偶联形成多聚酚。     

漆树漆酶的催化氧化作用(ⅩⅠⅠⅠ)-Fe2+离子对漆酶催化氧化反应的影响

以5,6-二溴-2,3-二氰基氢醌为底物,在pH4.50条件下,用分光光度法考察了FeSO4对漆树漆酶催化氧化反应的影响.结果表明,在本文实验条件下SO2-4离子对酶促反应的影响基本可以忽略,而Fe2+离子对漆酶的催化氧化反应则有明显的竞争性抑制作用.研究证实,Fe2+离子的抑制作用是通过它还原酶促反应的产物半醌自由基阴离子来实现的.     

漆树漆酶对共存二茂铁和亚铁氰化钾的催化氧化

漆酶是含铜金属酶,主要来源于漆树漆液(生漆)和真菌,分别称漆树漆酶和真菌漆酶。近年来,人们对漆酶的催化氧化反应的研究很感兴趣。已经发现漆酶的催化反应大多在水溶液中进行,氧化底物主要是邻、对苯二酚(胺)及其衍生物,对二茂铁(Fc-H)及其衍生物(Fc-R)的催化氧化尚不多见,对共存Fc-H和K_4Fe(CN)_6的催化氧化也未见报道,这可能与Fc-H和多数Fc-R不溶于水有关。本文选择二乙二醇单丁醚(DGBE)和磷酸盐缓冲液为混合溶剂,使Fc-H和K_4Fe(CN)_6以一定浓度共溶其中,考察了在该体系中漆树漆酶对Fc-H和K_4Fe(CN)_6的催化氧化反应。     

用微量热法研究漆酶和过氧化氢的反应

漆树酶是含铜酶。在酶系统中属于一种选择性较差的氧化酶,它能与许多还原底物作用,同时亦能还原分子氧生成水。在这些反应中漆酶中的三个不同的氧化还原活性中心和其作用途径常常是研究中的主要对象。在无氧条件下,漆酶被底物还原后,可用氧再氧化,实验表明,酶分子中的Cu2~+—Cu~(1+)循环是催化机理的一部分。1970年Farver等人在研究漆树酶与过氧化氢之间的反应时发现,漆树酶与过氧化氢有一种特殊作用,二者会生成一种稳定的具有高亲合力的复合物,该复合物不会被氧再氧化,其反应可用下式表示:式中L-Cu(Ⅱ)表示含二价铜的漆酶分子,二价铜在此反应中起活性中心的作用。本工作中,用微量热法测量了漆树酶与过氧化氢反应的一些热动力学性质。     

漆树漆酶的催化氧化作用——Ⅳ.二茂铁及其衍生物的酶促氧化

漆酶是含铜单电子氧化酶,主要催化邻、对苯二酚(胺)类底物氧化,它对不溶于水的二茂铁(Fc-H)及其衍生物(Fc-R)的催化氧化未见报道。本文考察了漆树漆酶在磷酸缓冲液-二乙二醇丁醚(DGBE)中对Fc-H和15个Fc-R的催化氧化反应。     

漆树漆酶的催化氧化作用（ⅫⅡ）

以５,６－二溴－２,３－二氰基氢醌为底物,在ＰＨ４．５０条件下,用分光光度法考察了ＦｅＳＯ４对漆树漆酶催化氧化反应的影响。结表明,在本文实验条件下ＳＯ４＾２－离子对酶促反应的影响基本可以忽略,而Ｆｅ＾２离子对漆酶的催化氧化反应则有明显的竞争性抑制作用,研究证实,Ｆｅ＾２＋离子的抑制作用是通过它还原酶促反应的产物半醌自由基阴离子来实现的。     

漆树漆酶的催化氧化作用 (ⅹⅢ)──Fe~(2+)离子对漆酶催化氧化反应的影响()

以５,６－二溴－２,３－二氰基氢醌为底物,在ｐＨ４．５０条件下,用分光光度法考察了ＦｅＳＯ４对漆树漆酶催化氧化反应的影响．结果表明,在本文实验条件下ＳＯ２－４离子对酶促反应的影响基本可以忽略,而Ｆｅ２＋离子对漆酶的催化氧化反应则有明显的竞争性抑制作用．研究证实,Ｆｅ２＋离子的抑制作用是通过它还原酶促反应的产物半醌自由基阴离子来实现的     

漆酶催化合成生物活性化合物的研究进展

近年来市场对具有营养和药用价值的活性化合物的需求量逐年增加,传统的生产方法已无法满足该类化合物的大规模应用。漆酶是近些年广受欢迎的生物催化剂之一,它可以在温和的条件下催化活性化合物的高效合成,并且有极大潜力取代传统的工业生产方法。本文着重回顾了近十年来漆酶在催化合成活性化合物中的应用,并对漆酶的结构及作用机制进行了介绍;同时指出了漆酶工业化应用中存在的一些问题,比如漆酶产量不足、部分酶促反应介质不适于工业化应用等。通过异源表达、筛选高产菌株提高漆酶产量、使用固定化技术和蛋白质工程提高漆酶的使用寿命、开发更加高效低廉的反应介质系统与寻找新的漆酶底物相结合来降低漆酶的应用成本是今后主要的发展趋势。     

漆酶在催化合成生物活性化合物中的研究进展

近年来市场对具有营养和药用价值的活性化合物的需求量逐年增加,传统的生产方法已无法满足该类化合物的大规模应用。漆酶是近些年广受欢迎的生物催化剂之一,它可以在温和的条件下催化活性化合物的高效合成,并且有极大潜力取代传统的工业生产方法。本文着重回顾了近十年来漆酶在催化合成活性化合物中的应用,并对漆酶的结构及作用机制进行了介绍;同时指出了漆酶工业化应用中存在的一些问题,比如漆酶产量不足、部分酶促反应介质不适于工业化应用等。通过异源表达、筛选高产菌株提高漆酶产量、使用固定化技术和蛋白质工程提高漆酶的使用寿命、开发更加高效低廉的反应介质系统与寻找新的漆酶底物相结合来降低漆酶的应用成本是今后主要的发展趋势。     

用于生物氧化的蓝色漆酶

漆酶是一种含铜多酚氧化酶, 在真菌和高等植物中产生, 多为分泌型糖蛋白. 有氧的条件下, 漆酶能催化底物氧化, 把氧还原成水. 详述了漆酶在有机合成中的应用.     

大尺寸SiO2大孔材料固定化漆酶

以表面固定Cu2+的改性大尺寸SiO2大孔材料作为载体,考察了时间、pH和给酶量对漆酶固定化效果的影响,并对固定化漆酶的活性和稳定性进行了研究。结果表明:5 h时吸附达到平衡,pH为4.5、漆酶与载体比例为5 mg·g-1时固定化效果最好,酶活回收率可达到100.4%;固定化漆酶的最适pH和最适温度较游离漆酶的均有升高且范围变宽,固定化后,漆酶的pH稳定性和热稳定性都得到显著提高;固定化漆酶的K m值略高于游离漆酶的;固定化漆酶具有良好的操作稳定性,与底物反应反复操作10批次后剩余酶活为72.7%。     

微量热法研究漆酶和3,4,5-三羟基苯甲酸的反应

用LKB－2107型微量热系统,在不同的温度(pH＝7.4)条件下,测定了3,4,5－三羟基苯甲酸与漆酶反应的摩尔反应烙、米氏常数、反应速率常数、漆酶的活性并计算了结合能、活化自由能、活化能和活化烟等.在此基础上,应用过渡态理论,从能量变化的角度,对其催化过程进行了分析.由活化摘(△S_≠^T＜0)得出酶－底物过渡态的结构较酶－底物复合物更为有序的结论.     

细菌漆酶的功能与催化特性

正漆酶(laccase)(EC 1.10.3.2)是一类含铜的多酚氧化酶(copper-containing polyphenol oxidase),属于蓝色多铜氧化酶(blue multi-copper oxidase,MCO)家族,能催化多种酚类、芳胺类化合物的氧化,同时将分子氧还原成水.漆酶突出的催化特性是它的底物具有广泛性、催化反应具有复杂性,生     

贝壳状革耳菌漆酶酶活测定方法分析

酶活测定方法中所用的反应底物、反应条件以及酶活单位定义对漆酶酶活的测定结果有很大的影响。在对贝壳状革耳菌 (Panusconchatus)漆酶酶活测定方法的研究中发现 ,该酶与 2 ,2’ -连氮 -双 ( 3-乙基并噻- 6 -磺酸 ) (ABTS)反应的最适pH值为 3.0 ,而与紫丁香醛连氮、2 ,6-二甲氧基苯酚和邻甲联苯胺反应的最适pH值均为 4.0。上述底物与Panusconchatus漆酶反应的Km (米氏常数 )分别为 0 .0 1 1 6(mmol·L) - 1 ,1 4.1 0 95 (mmol·L) - 1 ,0 .1 0 1 1 (mmol·L) - 1 ,0 .1 41 5 (mmol·L) - 1 。该酶与ABTS、2 ,6-二甲氧基苯酚和邻甲联苯胺反应均表现为零级反应 ,而与紫丁香醛连氮反应时只在一定范围的酶浓度以及反应时间内才表现为零级反应。     

大尺寸SiO2大孔材料固定化漆酶

以表面固定Cu²⁺的改性大尺寸SiO₂大孔材料作为载体, 考察了时间、pH和给酶量对漆酶固定化效果的影响, 并对固定化漆酶的活性和稳定性进行了研究。结果表明:5 h时吸附达到平衡, pH为4.5、漆酶与载体比例为5 mg·g^-1时固定化效果最好, 酶活回收率可达到100.4%;固定化漆酶的最适pH和最适温度较游离漆酶的均有升高且范围变宽, 固定化后, 漆酶的pH稳定性和热稳定性都得到显著提高;固定化漆酶的K_m值略高于游离漆酶的;固定化漆酶具有良好的操作稳定性, 与底物反应反复操作10批次后剩余酶活为72.7%。     

水／有机体系中漆酶酶促催化2,6-二甲氧基苯酚及产物表征

作为酶促催化底物之一的2,6-二甲氧基苯酚（DMP）经常用于测定漆酶活性．然而到目前为止,其酶促产物结构却仍不清楚．由此,研究了漆树漆酶对其催化氧化反应．在水,有机溶剂体系中,催化得到一种产物3,3′,5,5′-四甲氧基-1,1′-联苯-4-4′-二酚（TMBP）,对其用红外、核磁和色谱一质谱等系统测定,并简要探讨了酶促反应机理．     

ESR自旋稳定化技术在漆酶化学中的应用

用ESR自旋稳定化技术对十六个儿茶酚类底物的漆酶催化氧化反应进行了ESR追踪,捕获到相应的半醌自由基．结果表明,ESR自旋稳定化技术的运用,开辟了一条在静态条件下用漆酶／O2体系获取高稳态浓度半醌自由基的有效途径．     

真菌漆酶及其催化对苯基苯酚聚合条件的研究

白腐菌Panus conchatus在液体培养条件下产生了漆酶,经纯化分离后用于对苯基苯酚的催化聚合,探讨了反应温度、缓冲溶液pH以及反应体系中溶剂二氧六环的含量对漆酶催化对苯基苯酚聚合的影响。结果表明,漆酶催化对苯基苯酚聚合反应的最佳反应条件为：温度为40℃,混合溶剂中二氧六环的体积百分数为85％。缓冲溶液为pH=4的0．2mol／L HAc-NaAc溶液。在此条件下用漆酶催化对苯基苯酚聚合,得到了重均分子量Mw=80533的聚酚产物。得率为75.5％。