离心纸上层析法

离心层析法是一种新的层析方法,其特点是在离心加速的作用下,进行物质的分离和鉴定。这种新的层析方式在各类层析技术中,都已获得了应用,从而出现了诸如离心纸上层析、离心柱层析、离心薄层层析和离心纸上电泳等层析方法。目前发展最迅速和应用最广泛的是离心纸上层析法(centrifugal paper chromatography)。本方法是在1955年首先由Caronna提出的,系将层析纸夹在两块圆形玻璃片中间,在离心旋转下,分离了生物碱类物质,仅需5—6分钟,即可获得满意的分离结果。1957年以来,McDonald等继续了这一研究,对离心加速装置和操作技术等进行了探讨。最近几年来,捷克斯洛伐克的分析工作者诸如Pavlicek和Deyl等,改进并制成了更完善的离心加速层析仪器,从而使这一新的层析技术成为分离和鉴定物质的快速方法。     

圆形纸层析法

为了使第一报圆形纸层析法的知识更详尽些,今在前报的基础上,再继续对有关的问题进行介绍。一、圆形纸层析与两因次层析间的关系 Rao和Giri等从圆形纸层析氨基酸类及其它物质的实验中,都发现由圆形纸层析法获得的R_(fc)值是较单因次纸上层析得到的高。据Rao和Giri的解释,认为在圆形纸层析中,氨基酸等的移动是受到流向滤纸边缘的溶剂流动方向和正交方向的溶剂流动方向两者所支配。因此,这时氨基酸等的移动实即是一两因次的移动,遂使得到的R_(fc)值偏高。随后,Chakrabortty等以氨基酸类为例进行了下列试验,指出此假说的真实性。他们将圆形滤纸剪成一等臂十字形(如图1(1)),中心画一小圆,试液分别点在此小圆周上。其后,又将十字臂的宽度自中心向外逐渐增大,而长度和中心小圆的直径仍保持一定(如图1(2)),剪成一系列不等     

圆形紙层析法的研究——Ⅰ.定性分析中分离各组阳离子的展开剂之比较

Rutter开始应用圆形纸层析法分离无机离子。优点为层析时间较短,仪器亦较简单,且具较好的重现性。为此著者根据前人的研究,利用国产滤纸,以圆形纸层析法系统研究定性分析中各组阳离子的分离。从中选出一套适于各组离子分离的展开剂,以利分析。实验部分     

圆形纸层析法的研究Ⅶ.铬酸根、钼酸根、钨酸根和钒酸根的分离

许多作者提出了利用纸层析法分离铬酸根、钼酸根、钨酸根和钒酸根的方案,但都是以上行法和下行法^[1~5],或者是在处理纸^[6,7]上进行展开,比较费时和复杂.作者曾试图利用圆形纸层析法分离,以期快速.结果找出2,4,6-三甲基吡啶-正己醇(正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、正戊醇、或异戊醇)-浓盐酸(1:4:5),和丁酮-8N盐酸-硫脲(10%)(8:1:1)各展开剂都能使上述四离子完成分离,且每展开一次,仅需约2小时,比较省时.     

纸上层析的原理和操作

纸上层析法又叫纸色谱法。是一种分离性质相似,难以分离的微量物质的混和物的方法。它的历史较短,始于1906年。“色谱”一词来源于希腊语chromα(色)和graphos(记录),我国称为色层法或层析法。     

芽孢杆菌L4所产角蛋白酶的纯化工艺、理化性质及其应用研究

根据芽孢杆菌L4菌株发酵产生的角蛋白酶的分子量和等电点等特征,分别采用硫酸铵盐析沉淀,Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-cellulose 52离子交换和Sepharose 4B凝胶过滤等色谱层析对其进行分离纯化,经SDS-PAGE检测呈现单一条带,分子量为149kD;变性电泳结果显示,该酶由4个分子量约为37.5kD的亚基组成;采用等电聚焦电泳测得其等电点为7.76,并通过纸层析法初步确认该酶为高甘露糖型糖蛋白;最后通过羊毛水解实验确认该酶具有水解羊毛角蛋白的能力,在羊毛仿羊绒等领域具有一定的应用价值.     

硒和碲的电纸层析分离

1.微量硒与碲的快速电纸层析,可在普通电泳槽和pH3—6的溶液中进行,在500伏电压下,可在15分钟获得很好的分离。 2.试脸了硒与碲的电纸层析中不同电解质、不同pH、不同电埸和电泳时间对迁移距离的影响。     

多维高压液相层析

一、多维高压液相层析法的特点多维(多柱)高压液相层析是近几年发展起来的一种分离技术,其特点是,在高压液相分离的基础上利用高压切换阀,将经过初次分离的全部或部分流份选择性地转入一支或多支相同或不同类型的层析柱中再次分离。基于这一根     

N,N-二仲辛基乙酰胺反相纸层析分离Ru-Os、Rh-Ir、Pd-Pt等金属离子及其R_f图谱

N,N-二仲辛基乙酰胺(DOAA),又名N-503,它对金属离子有一定的萃取能力。例如:N-取代酰胺曾用来萃取铀、锕系元素等,李树森等用DOAA萃取分离铌、钽,取得很好的效果,目前DOAA是一种广泛使用的废水脱酚剂。根据我们以前的工作认为反相纸层析对金属离子的滞留机理为分配机理。反相纸层析与萃取是在相同的机理下的两种不同操作技术。关于纸层析所得的比移值(R_f)与分配系数(D)可建立起如下     

圆形纸层析法

目前,纸上层析法已广泛应用于许多科学技术领域中,而圆形纸层析法是其中的一种操作方法,由于它具有快速、简便并较好的重现性,正在日益扩大其应用。现对有关问题作一介绍。一、操作技术圆形纸层析法到目前已有了很大的发展,因此在文献中可以见到的形式和操作技术亦很多。今选其一部分介绍如下,得可一窥其发展情况。早在1938年,Brown即建议应用纸于色层分     

行星式逆流层析法的初步研究

螺旋管行星式离心分离机(Coil Planet Centrifuge)及其逆流分配层析法(Countercurrent Partition Chromatography),现称行星式逆流层析法,系由Ito首创,后经Lightbown,Suther-land等改进,近几年Ito又有新的发展。这是一种不用担体的液-液分配层析法,其分离原理与Craig的逆流分配法相似,即根据物质在两相溶剂系统中的分配系数的差异,经过样品在此系统中反复分配传递而达到组分的分离;但其技术构成已大大区别于Craig法,样品在内径为几毫米至零点几毫米的螺旋状聚四氟乙烯毛细软管内通过特定的旋转运动在两相溶剂系统中进行分配层析。用此法分离分析几毫克至几克的混合物时理论板数可达数千至一万,类似组分可在数小时内完成     

薄层层析法及其应用

引言簿层层析(Dünnschicht-chromatographie)是最近发展的一种新型的微量、快速和简单的层析法。它的操作是将吸附剂均匀涂布在玻璃板上,然后按照纸上层析的操作方式进行物质的分离和鉴定。早在1938年俄斯迈洛夫(Ismailov)和希莱贝(schraiber)首先在显微镜载物片上涂布氧化铝吸附剂,以分离(?)剂中的物质。1949年迈哈特(Meinhard)和哈尔(Hall)也应用了相似的方式求鉴定无机离子,但是直到1951年克尔希内(Kirchner)等对这种方法才进行了比较系统的研究,并且测定了多种挥发油成分的 R_f 值。其后,斯塔尔(stahl)在1958年     

圆形纸层析法的研究Ⅷ.铌和钽的分离

利用纸层析法分离铌和钽,前人已有报导,其中丁酮-氢氟酸是一个分离铌和钽的有效展开剂.但因需用非玻璃设备,以致往往受到限制.为此,我们进行了寻找新展开剂的探索,根据这两个元素的络合性质,选用了硫氰酸钾、柠檬酸、酒石酸、盐酸羟胺等作为络合剂,用丙酮、丁酮和戊酮的盐酸溶液以圆形纸层析法进行展开.结果找出(1)丙酮-盐酸-硫氰酸钾(10%)(8:1:2.5)和(2)丙酮-盐酸-柠檬酸(10%)(8:1:1)两种混合液都是分离铌和钽的良好展开剂.     

三角形层析法是一种分离效果较好的层析方式

薄层层析中,如何缩短层析时间,改善Rr值较大化合物的分离效果,减少层析过程中的斑点扩散.提高检出灵敏度等问题,是薄层层析中急待解决的。 近来,我们针对薄层层析工作中存在的上述问题.采用三角形层析法进行实验.结果表明:三角形层析法方法简单,能缩短层析时间.提高检出灵敏     

圆形纸层析法的研究——Ⅴ.硒和碲的分离

许多作者^[1-4]曾采用正丁醇-酸类作为纸层析硒和碲的展开剂。但是应用丙酮-酸类以圆形柢层析法分离硒和碲,似尚未见有报告;而且丙酮在纸上的流速较快,还可以缩短展开时间。为此,本文采用丙酮-水-酸(7:2:1)体系,其中包括不同浓度的盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸和硝酸以及甲酸、乙酸、丙酸和丁酸,对硒和碲的移动行为进行探索。     

自制含硅胶滤纸在生化分子层析中的应用

目前,纸层析与薄层层析是微量物质分析分离中最常用的技术。近二十年来,尽管有关纸层析的报道比薄层层析相应减少,也有人预言薄层层析将会取代纸层析,但也有学者持有不同看法,认为纸层析在使用上既经济又方便的特色不能抹煞,并指出它很有发展前途。其中之一就是将纸层析与薄层层析二者结合起来,含硅胶的层析滤纸(以下简称硅胶纸)的应用就     

等电聚焦——分离蛋白质的新技术

引言等电聚焦(Isoelectric focusing)或简称电聚焦(electrofocusing),这一名称是自1967年以来普遍采用的,在此之前也称为等电分离,等电划分,等电聚集,等电分析,聚焦电泳或稳定电解。在六十年代初期,报导了关于这一方法的理论探讨和实际工作。1966年合成了载体两性电解质,并成功地用于肌红蛋白的分离,使这方法具有了实用价值。近几年来这一技术得到迅速推广。关于这方面的会议集和综述也有不少。     

聚酰胺薄层的制备

聚酰胺粉吸附剂已广泛应用于分离分析各种天然有机化合物,如黄酮、有机酸、氨基酸衍生物、内酯、萜类和甾体化合物等。目前国内研究中草药黄酮成分也常采用聚酰胺柱层法,一般多配合纸层析或硅胶-G 薄层来检查观察分离情况。纸层析需要时间较长,不利于及时指导分离,硅胶-G 薄层对于黄酮甙等极性很大的化合物不甚理想。也有仍用聚酰胺的薄层,其制备方法常有:(1)溶剂悬浮法,即     

一步法和两步法毛细管等电聚焦测定蛋白质和多肽等电点的比较

利用一步法和两步法毛细管等电聚焦(cIEF)方法分离测定了蛋白质和多肽的等电点(pI)。讨论了两步法等电聚焦过程所需的溶液组成、样品进样体积、聚焦电压、聚焦时间和分离条件等因素对分离效果的影响。并对一步法和两步法进行了比较。对细胞色素C、血红蛋白、肌红蛋白、转铁蛋白和牛血清白蛋白以及6种多肽的分析结果表明:一步法步骤简单,分离速度快,可测定单一组分的pI,也能快速分离混合蛋白和多肽,但分离度较差,且不能同时准确测定各组分的pI;两步法步骤复杂,分析时间较长,但能够同时分离并准确测定混合样品中各组分的pI,所测的pI值与单一组分进行测定的结果基本一致。两种方法可相互结合、互为补充,可广泛应用于两性生物微粒等电点的快速和准确测定。     

无机分析中薄层层析法的进展

薄层层析法是近年来在分析化学中发展起来的微量、快速和简易的分析法。其操作是以玻璃板为载体,均匀地涂上所需要的吸附剂(如硅胶、淀粉、交换剂等),然后按纸层析的一般操作方式进行物质的分离、检定和测定。这一方法现在在有机分析中已成为有效的工具,这是由于该方法快速,灵敏度较高,操作简便,受温度及其他条件的限制较小,且与其他方法结合亦可进行定量测定所致。但到目前为止,在无机分析方面的工作还研究得很不够。本文仅就国内外关于薄层层析在无机分析中的工作作