聚酰胺柱层析/反相高效液相色谱/电喷雾离子质谱法分离鉴定牛蒡叶中两种黄酮苷

1　引　　言菊科植物牛蒡 (ArctiumlappaL .)富含木脂体 (lignans)、硫乙炔化合物 (sulfur containingacetyleniccompounds)及聚乙炔化合物 (polyacetylenes)、咖啡酰奎尼酸衍生物 (caffeoylquinicacidderivatives)、抑肿瘤因子 (antimutagenicfactor)、可食性纤维(dietaryfiber)、菊粉 (inulin)及牛蒡苦素 (arctiopicrin)等几类具有重要药理作用的化学成分。有关牛蒡化学组成的研究主要取材于牛蒡种子和根。而牛蒡叶的化学组成还甚少报道。本文建立了一种分离、鉴定牛蒡叶中两种黄酮苷、槲皮素葡萄糖鼠李糖苷 (quecertin 3 O rutinoside)…     

反相高效液相色谱法测定豆制品中两种异黄酮甙元的含量

建立了反相高效液相色谱测定异黄酮甙元的方法。采用Hypersil BDS C18色谱柱(250×4.6 mm i.d.,5μm),流动相为甲醇(A)、0.5%乙酸水溶液(B),流速为1.0mL/min,柱温为35℃,检测波长为260 nm,进样量为10μL。结果表明:大豆黄素的线性范围为0.0450~0.3150μg,加标回收率为99.05%,相对标准偏差(RSD)为1.31%;染料木黄酮的线性范围为0.0448~0.3136μg,加标回收率为98.82%,RSD为0.50%。方法可用于豆豉及其它大豆制品中异黄酮甙元的测定。     

牛蒡子中木脂素的薄层扫描测定

在高效硅胶薄层板上分离了牛蒡子中４种２,３－苄基丁内酯型木脂素──牛蒡甙元（Ｉ）、牛蒡素Ｂ（Ⅱ）、牛蒡酚Ａ（Ⅲ）、牛蒡酚Ｆ（Ⅳ）。流动相为二氯甲烷－乙醚－甲醇－己烷（４：１：０．４：１）,室温放置,自然显色。薄层扫描法定量,各木脂素的线性范围在０．４５１～４．６０８μｇ,回收率为９９．９０％～１００．９０％,并用此法测定了不同产地牛蒡子中木脂素的含量。方法简便、快速,样品用量少。     

杜仲中京尼平甙酸的硅胶柱色谱分离纯化及反相高效液相色谱/液相色谱-电喷雾质谱/核磁共振鉴定

建立了杜仲中京尼平甙酸的硅胶柱色谱分离纯化及反相高效液相色谱/液相色谱-电喷雾质谱/核磁共振(RP-HPLC/LC-ESI-MS/NMR)鉴定方法。杜仲皮经粉碎后,用70%乙醇提取,提取液经减压蒸馏至干,再用甲醇溶解,然后吸附于硅胶上,并以不同体积比的氯仿-甲醇混合液按洗脱剂的极性由小到大进行洗脱,以RP-HPLC法检测洗脱液中物质的种类和含量。结果表明:洗脱剂为氯仿-甲醇（体积比为8∶1）的洗脱液经分析为单一组分,其保留时间为5.142 min;以对照品京尼平甙酸添加法测定,其峰高增加;相关紫外光谱和红外光谱检测结果与京尼平甙酸对照品基本一致;结合LC-ESI-MS、 1H-NMR和13C-NMR等测定,确定该洗脱组分为京尼平甙酸。     

牛蒡苷与牛蒡苷元的荧光性质及中药牛蒡子中牛蒡苷的荧光法测定

牛蒡苷和牛蒡苷元的三维荧光图谱中均呈现2个荧光峰,激发波长λex分别为230 nm和280 nm,发射波长(λem)均为310 nm。牛蒡苷的荧光远强于牛蒡苷元的荧光。溶液酸度对牛蒡苷和牛蒡苷元的荧光强度有明显影响。在pH13.0时,牛蒡苷的荧光增强,而牛蒡苷元的荧光猝灭。牛蒡子药材的三维荧光图谱和薄层荧光色谱表明,牛蒡子的荧光成分主要为牛蒡苷,而牛蒡苷元及其他共存组分在强碱性条件下对牛蒡苷的荧光无影响。据此,以甲醇为溶剂制备牛蒡子样品提取液,用水适当稀释并调节至pH 13.0,在λex/λem=280 nm/310 nm波长下测定牛蒡苷的含量。在0.014 5~2.03 mg·L-1范围内,荧光强度与牛蒡苷浓度间呈良好线性,其线性方程为IF=2.7+148.7ρ(mg·L-1),相关系数(r)为0.999。用本法测得牛蒡子对照药材中牛蒡苷的含量为6.01%,平均加标回收率为98.1%。用薄层荧光扫描法对本方法进行验证,结果表明,本法结果可靠,可用于牛蒡子药材的质量检验。     

牛蒡苷与牛蒡苷元的荧光性质及中药牛蒡子中牛蒡苷的荧光法测定

牛蒡苷和牛蒡苷元的三维荧光图谱中均呈现2个荧光峰,激发波长λex分别为230 nm和280 nm,发射波长（λem）均为310 nm。牛蒡苷的荧光远强于牛蒡苷元的荧光。溶液酸度对牛蒡苷和牛蒡苷元的荧光强度有明显影响。在pH>13.0时,牛蒡苷的荧光增强,而牛蒡苷元的荧光猝灭。牛蒡子药材的三维荧光图谱和薄层荧光色谱表明,牛蒡子的荧光成分主要为牛蒡苷,而牛蒡苷元及其他共存组分在强碱性条件下对牛蒡苷的荧光无影响。据此,以甲醇为溶剂制备牛蒡子样品提取液,用水适当稀释并调节至pH 13.0,在λex/λem=280 nm/310 nm波长下测定牛蒡苷的含量。在0.014 5~2.03 mg?L-1范围内,荧光强度与牛蒡苷浓度间呈良好线性,其线性方程为IF=2.7+148.7ρ(mg?L-1),相关系数（r）为0.999。用本法测得牛蒡子对照药材中牛蒡苷的含量为6.01%,平均加标回收率为98.1%。用薄层荧光扫描法对本方法进行验证,结果表明,本法结果可靠,可用于牛蒡子药材的质量检验。     

L-羟脯氨酸寡肽混合物的高效液相色谱分离与质谱分析

研究了三氯氧磷辅助下L-羟脯氨酸的成肽反应,建立了采用反相高效液相色谱-质谱/质谱联用技术分离鉴定羟脯氨酸寡肽混合物的方法,优化了L-羟脯氨酸寡肽混合物的色谱分离条件。实验以YWG C8柱(10 μm,250 mm×10 mm)为分离柱,以乙腈-0.06%三氟乙酸水溶液(体积比为2∶98)为流动相进行等度洗脱,在正离子模式下对洗脱物进行了电喷雾电离串联质谱鉴定。结果显示,分离出的各组分分别为L-羟脯氨酸二肽、L-羟脯氨酸环二肽和L-羟脯氨酸三肽。     

莫诺甙环口差向异构体的HPLC和ESI-TOF-MS分析

莫诺甙 (Morroniside)是中药山茱萸中具有生物活性的有效成分之一[1,2 ] ,最初由 Souzu等[3] 从植物 L onicera Morrowii A.Gray中分离鉴定 ,在其它植物中也有发现 [4～ 11] .该化合物 7位存在半缩醛结构 ,由于 7-OH可有不同的取向 ,能够形成 α和 β两种构型 ,在常温溶液中可相互转化 ,形成动态平衡 ,分离产物一般为一对环口差向异构体[11] .基于莫诺甙在山茱萸中含量较高并具有一定生物活性 ,Zhang等[12 ] 建议采用莫诺甙作为山茱萸及含山茱萸的复方中药的质控成分 ,并建立了相应的分析方法 ,探讨了用莫诺甙取代药典中规定的熊果酸作…     

辽东楤木叶中皂苷Congmuyenoside B(2)的分离与鉴定

本研究实现了对辽东楤木叶中Congmuyenoside B(2)的分离与鉴定。研究中采用大孔吸附树脂提取法和硅胶柱层析法对其分离,应用HPLC色谱法和薄层色谱法对纯度进行分析,利用电喷雾多级串联质谱结合核磁共振和红外光谱对该化合物的结构进行分析鉴定。本提取分离法操作简便,提高了分离化合物的纯度。HPLC色谱法灵敏度高,结果准确、减少了质谱及其它色谱中的杂质峰对化合物鉴定的干扰,结构准确,可靠。     

五味子中木脂素类成分的高效液相色谱-电喷雾质谱研究

采用液相色谱-电喷雾质谱联用(HPLC-ESI-MSⁿ)技术, 对北五味子与南五味子中木脂素类成分进行了系统研究. 通过HPLC-ESI-MS技术, 获得了相应化合物的保留时间、紫外光谱和分子量等信息, 利用电喷雾多级串联质谱技术(ESI-MSⁿ), 获得了相应化合物的结构信息. 研究结果表明, 北五味子与南五味子的主要木脂素成分除5个共有成分外其它成分差异较大, 并且其共有成分含量差别较大. 在此基础上, 建立了简便、快速的北五味子与南五味子药材分析鉴定的新方法.     

Identification of a Sesquiterpene Lactone from Arctium lappa Leaves with Antioxidant Activity in Primary Human Muscle Cells

Many pathologies affecting muscles (muscular dystrophies, sarcopenia, cachexia, renal insufficiency, obesity, diabetes type 2, etc.) are now clearly linked to mechanisms involving oxidative stress. In this context, there is a growing interest in exploring plants to find new natural antioxidants to prevent the appearance and the development of these muscle disorders. In this study, we investigated the antioxidant properties of Arctium lappa leaves in a model of primary human muscle cells exposed to H₂O₂ oxidative stress. We identified using bioassay-guided purification, onopordopicrin, a sesquiterpene lactone as the main molecule responsible for the antioxidant activity of A. lappa leaf extract. According to our findings, onopordopicrin inhibited the H₂O₂-mediated loss of muscle cell viability, by limiting the production of free radicals and abolishing DNA cellular damages. Moreover, we showed that onopordopicrin promoted the expression of the nuclear factor-erythroid-2-related factor 2 (Nrf2) downstream target protein heme oxygenase-1 (HO-1) in muscle cells. By using siRNA, we demonstrated that the inhibition of the expression of Nrf2 reduced the protective effect of onopordopicrin, indicating that the activation of the Nrf2/HO-1 signaling pathway mediates the antioxidant effect of onopordopicrin in primary human muscle cells. Therefore, our results suggest that onopordopicrin may be a potential therapeutic molecule to fight against oxidative stress in pathological specific muscle disorders.     

马钱子与甘草配伍前后生物碱成分的变化规律

采用电喷雾质谱技术和高效液相色谱法分别对马钱子配伍甘草前后主要生物碱的变化规律进行了系统研究。实验结果表明,马钱子配伍甘草后其主要生物碱士的宁和马钱子碱的含量均有不同程度的降低,其中士的宁的含量下降显著。电喷雾质谱的实验结果与高效液相色谱的结果相吻合,为进一步阐明甘草解马钱子类药物毒性和马钱子合理配伍用药提供了科学的实验依据。     

应用高效液相色谱和电喷雾质谱联用技术分析鉴定车前草中的苯乙醇苷化合物

本文采用高效液相色谱与电喷雾质谱联用技术在线分析鉴定了车前草提取物中的三种苯乙醇苷化合物。实验采用反相C18色谱柱,0.2%的醋酸水溶液和乙腈梯度洗脱,车前草中的苯乙醇苷化合物得到很好的分离。在电喷雾质谱负离子条件下,获得了三种苯乙醇苷化合物的分子离子峰,分子量信息,进一步通过质谱的源内CID技术得到相应化合物的结构信息。通过得到的这些信息与文献中的已知化合物或标准品对照从而推断出化合物的结构。     

Quantification of Diaminomaleonitrile Using High Performance Liquid Chromatography with UV and Electrospray Ionization Mass Spectrometric Detection

Abstract

A method was developed to quantify diaminomaleonitrile (DAMN) in complex aqueous matrices using high performance liquid chromatography with UV and electrospray ionization mass spectrometric (ESI-MS) detection. The method is rapid (analytical times <10 min), able to quantify DAMN against complex backgrounds, and achieved with part per billion detection limits. Given the central role of DAMN in generating heterocycles of known biological significance, this study provides a rapid and sensitive method for quantifying DAMN in complex solutions.     

核桃仁中多酚类物质的液相/电喷雾质谱分析

利用HPLC-ESI-MSn方法对核桃(Juglans regia L.)仁中多酚类物质组成进行了分析,发现的多酚类物质有鞣花酰基葡萄糖4种异构体、橡椀酰基葡萄糖2种异构体、二鞣花酰基葡萄糖2种异构体、二没食子酰基葡萄糖2种异构体、鞣花酰基和橡椀酰基葡萄糖3种异构体.结果表明,采用HPLC-ESI-MSn方法可以对核桃仁中多酚类物质进行有效的分析.     

高效液相色谱质谱法分析脂肪醇聚氧乙烯醚中的碳数及环氧乙烷加成数的分布

应用高效液相色谱法将脂肪醇聚氧乙烯醚按碳数和环氧乙烷加成数 (EO数 )分离后 ,在线联用电喷雾离子化质谱 (ESI MS) ,根据其一系列准分子离子峰判断烷基链长和环氧乙烷聚合度。解释了准分子离子峰强度失真的原因。     

Isolation and purification of uremic middle molecules by multi-step liquid chromatography

Isolation and comparison of uremic sera and urine and normal sera and urine were performed by gel permeation chromatography, anion exchange chromatography and re-versed-phase high performance liquid chromatography. Two uremic middle molecular fractions (A and B) were obtained from uremic sera and urine and normal urine by gel permeation chromatography, but not from normal sera. The anion exchange chromatographic results of fraction A from different origins demonstrate that subfraction A-3 could be excreted in urine by healthy subject, but accumulated in uremic serum for renal failure of patient with uremia. After desalinization subfraction A-3 was analyzed by MALDI-TOF-MS. The results show that subfraction A-3 consists of six compounds with molecular weight 839, 873, 1007.94, 1106, 1680 and 2015 respectively. Finally, by reversed-phase high performance liquid chromatography, subfraction A-3 was further resolved into six independent fractions. Thus, the isolation and purification of six middle molecular c     

乙酰螺旋霉素活性成分的分析

乙酰螺旋霉素是一种含有多个活性成分的抗生素药物，本文首先用电喷雾质谱法测定了混合物的组成，然后采用高效液相色谱和微乳毛细管电泳法分离了其中的活性成分，用液相色谱－质谱联用技术鉴定了液相色谱的流出峰。