高效凝胶渗透色谱及高效液相色谱和电喷雾-离子阱质谱法联用测定构成芦荟多糖的单糖

利用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)测定芦荟浓缩液和芦荟粉中多糖的纯度和相对分子质量,使用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)作为柱前衍生试剂分别对样品和其水解产物进行衍生,结合高效液相色谱(HPLC)分离和电喷雾-离子阱质谱(ESI-MS)检测分析其单糖组成.结果表明:组成芦荟中多糖的单糖主要是甘露糖和葡萄糖.     

单糖的柱前衍生化高效液相色谱及胶束电动毛细管色谱分析的对比研究

 采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生糖类物质,通过简化衍生方法,优化分析条件,采用胶束电动毛细管色谱(MEKC)和高效液相色谱(HPLC)两种方法对5种还原单糖的PMP衍生物实现了良好的分离。5种还原单糖衍生物的保留时间的重现性较好(MEKC法的相对标准偏差(RSD)小于5%(n=5),HPLC法的RSD为0.23%(n=5))。用所建立的两种方法对实际样品中的糖进行了分析,结果表明所建方法可作为实际样品中单糖分析的常规方法。     

1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化寡糖链的HPLC分离及其激光解吸电离质谱分析

以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为衍生化试剂对寡糖链进行标记, 用氨水替代氢氧化钠溶液作碱性介质, 衍生化反应后氨水可通过干燥除去, 省去了脱盐处理过程, 衍生化的寡糖可直接进行激光解吸电离质谱分析. 建立起了PMP衍生化寡糖的RP-HPLC分离分析模式, 在此HPLC分析条件下, 可以对标记的寡糖链进行样品分离及制备.     

高效液相色谱-质谱联用法分析3-氨基-9-乙基咔唑柱前衍生化壳寡糖

以3-氨基-9-乙基咔唑(3-amino-9-ethylcarbazole, AEC)为衍生化试剂对壳寡糖进行柱前衍生,壳寡糖(COS)的还原端与AEC的伯氨基反应生成烯胺,再被硼氢氰化钠(NaBH3CN)还原为二级胺。采用反相C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),乙腈和乙酸铵水溶液为流动相(pH 4.5),梯度洗脱,在254 nm波长处检测,建立了一套壳寡糖衍生物的高效液相色谱(HPLC)分离分析、电喷雾质谱(ESI-MS)及液相色谱-电喷雾质谱联用(LC-ESI-MS)的分析方法。该方法操作简单、灵敏度高、重复性好,在COS的组分分析、质量控制及构效关系研究方面有潜在的应用价值。     

1-苯基3-甲基-吡唑啉酮-5电喷雾质谱裂解途径的研究

电喷雾质谱(ESI-MS)是近年来发展并完善起来的一种分析手段.作为一种新的软电离技术,其ESI源中化合物离子化行为不同于传统的电子轰击(EI)源,离子碎裂相对简单,但容易出现复杂的加合离子,同时其独有的CID-MSn技术可选择性地提供有用的碎片信息,研究这些碎裂和加合离子对有效确认化合物的准分子离子峰、研究化合物的结构和性质以及优化ESI条件有重要意义[1].     

原位衍生化技术在液相色谱和液相色谱-质谱联用分析中的应用

衍生化是将待分析物转化为更适合的物质形式以便于分析的有效手段。原位衍生化技术作为一种常用的柱前衍生化方法,可以在样品基质中同时完成分析物的萃取和衍生化,具有高效、灵敏和选择性好的优点。原位衍生化结合其他前处理技术广泛用于胺类、醛酮类、醇类、酚类、羧酸和巯基化合物的分析中,在生物、药物、食品、环境、化妆品分析等领域有广泛的应用。该文概述了原位衍生化的反应类型和代表性衍生试剂,综述了原位衍生化技术在液相色谱和液相色谱-质谱联用分析中的应用,并展望其发展趋势。     

高效液相色谱/电喷雾质谱联用分析乙二醇硬脂酸酯

乙二醇硬脂酸酯和乙二醇双硬酯酸酯是日化工业中常用的珠光剂,被广泛地应用在丝毛洗涤剂、液体洗涤剂和护发用品等领域,对提高产品的性能和外观起到了良好的作用。样品中单双酯的相对含量和碳数分布对其使用性能有较大的影响,会直接影响到产品的稳定性,外观等。乙二醇硬脂酸酯的测定常用化学分析方法,测定其皂化价,酸价等指标^[1],从而间接估计其在样品中的含量,但无法测定样品中单双酯的相对含量和碳数分布情况。用高效液相色谱法,使用正相硅胶柱和四氢呋喃流动相,可以实现乙二醇单硬脂酸酯和乙二醇双硬脂酸酯的分离,但由于乙二醇硬脂酸酯无紫外吸收,需要用到示差折光检测器,无法实施梯度洗脱优化分离,该方法只能按单双酯分离,不能按碳数分离。用高温毛细管柱也可以直接进行乙二醇硬脂酸酯的气相色谱分析^[2]。本研究应用非反相高效液相色谱法,以大气压电离质谱为其在线检测器,同时实现单双酯的分离和按碳数的分离。     

柱前衍生高效液相色谱法分析海带岩藻聚糖的单糖及糖醛酸组成

建立了一种柱前衍生高效液相色谱法同时测定海带中岩藻聚糖的单糖及糖醛酸组成的方法.岩藻聚糖经4 mol/L三氟乙酸降解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行衍生化,并采用配有紫外检测器的反相高效液相色谱仪在250 nm波长下进行测定,实现了7种单糖和糖醛酸的良好分离.结果表明:该岩藻聚糖样品由5种单糖和2种...     

改进的PMP柱前衍生化方法用于单糖的组成分析

用氨水替代NaOH溶液, 反应后氨水可通过减压干燥除去, 这样不仅简化了衍生化反应的后处理过程, 而且不影响衍生物的质谱分析, 省去了质谱分析前的脱盐处理过程. 本研究建立了5种常见单糖的分析分离模式, 对其进行质谱分析, 用所建立的方法对标准二糖及3种多糖样品中的单糖组成进行了分析, 取得了满意的结果.     

Detection of carbohydrates using new labeling reagent 1-(2-naphthyl)-3-methyl-5-pyrazolone by capillary zone electrophoresis with absorbance (UV)

Surface plasmon resonance (SPR) was used to screen the interaction between a variety of affinity ligands and hemagglutinin (HA) from human influenza virus, with the aim of identifying low affinity ligands useful for the development of a rapid bioanalytical sensor. Three sialic acid-based structures and four lectins were evaluated as sensor ligands. The sialic acid-based ligands included a natural sialic acid-containing glycoprotein, human alpha1-acid glycoprotein (alpha1-AGP), and two synthetic 6'-sialyllactose-conjugates, with varying degree of substitution. The interaction of HA with the four lectin-based ligands, concanavalin A (Con A), wheat germ agglutinin (WGA), Maackia amurensis lectin (MAL), and Sambucus nigra agglutinin (SNA), showed a wide variation of affinity strengths. Affinity and kinetics data were estimated. Strong affinities were observed for Con A, WGA, alpha1-AGP, and a 6'-sialyllactose-conjugate with a high substitution degree, and low affinities were observed for MAL and a 6'-sialyllactose-conjugate with low substitution. The main objective, to identify a low affinity ligand which could be used for on-line monitoring and product quantification, was met by a 6'-sialyllactose-ovalbumin conjugate that had 0.6 mol ligand per mol carrier protein. The apparent affinity of this ligand was estimated to be 1.5+/-0.03 microM (K(D)) on the SPR surface. Vaccine process samples containing HA were analyzed in the range 10-100 microg HA mL(-1) and correlated with single-radial immunodiffusion. The coefficient of variation on the same chip was between 0.010 and 0.091.     

1-(2-萘基)-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生试剂的制备及其在高效液相色谱-质谱法测定糖类化合物中的应用

以1-(2-萘基)-3-甲基-5-吡唑啉酮(NMP)作为柱前衍生试剂,建立了简单、灵敏的糖类组分的反相高效液相色谱测定方法。NMP与糖在氨为催化剂的条件下,于70 ℃下反应可获得稳定的衍生产物。在Hypersil ODS 2反相色谱柱上,实现了8种单糖的基线分离。衍生物线性相关系数均大于0.9985,检出限为0.58～1.1 pmol。利用柱后在线串联质谱的电喷雾电离正离子模式监测,获得了各组分的质谱定性及裂解规律,特别是m/z 473的特征碎片离子可作为单糖NMP衍生物的判定依据。与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)相比,NMP对糖的衍生化具有灵敏、简单、质谱裂解规律性强、重现性好等优点。该方法用于测定油菜花粉多糖中的单糖组成,结果令人满意。     

铌(V)-1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-吡唑啉酮-5络合物吸附波的研究

在pH=5.0的HAc-NaAc介质中,Nb(V)与1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-吡唑啉酮-5(PMBP)生成络合物,于-0.96V(us.SCE)出现一尖锐的极谱波.在滴汞电极上用示波极谱仪或在悬汞电极上测吸附伏安曲线.峰电流与Nb(V)浓度分别在0.0075~0.80μg/mL及0.000075~0.0075μg/mL范围内呈线性关系.实验了30多种离子的干扰影响,经苯肿酸分离后用于钢中Nb(V)的测定.检出限为0.00003μg/mL.溶液可稳定96h以上.用多种电化学方法研究了电极反应机理.     

糖类化合物PMP衍生分析进展

糖类物质的结构与组成分析在揭示其生物学功能方面发挥着重要作用,糖类化合物的衍生化分析是实现其高灵敏度定性和定量检测的有效方法。该文对一种条件温和、灵敏度高、选择性好的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)的衍生化分析方法在糖类化合物的单糖组成、聚合度、取代度、异构体分析以及在N/O-糖链的释放和定量分析等方面的应用进展进行了综述。     

A chemo-enzymatic approach to optically active 3-(4-methoxycarbonyl)phenyl-2-methyl-1-propanols

With a view to obtaining both enantiomers of 3-(4-methoxycarbonyl)phenyl-2-methyl-1-propanols, (R)-1 and (S)-1, from the respective racemate, (±)-1, the hydrolysis of its acetate, (±)-2, in the presence of porcine pancreatic lipase (PPL) has been studied. The optical puriry of (R)-1 and (S)-1 thus obtained was unsatisfactory (ee 22–27%), and could not be increased beyondee 33% by repeated enzymatic hydrolysis of the unconverted fraction of the acetate. In contrast with this, the biohydrogenation of 3-(4-methoxycarbonyl)phenyl-2-methyl-2-propen-1-ol (4) with fermentingSaccharomyces cerevisiae afforded (S)-1 of considerably higher optical purity (ee 41–90 %, depending on the strain). The stereochemical correlation of the products obtained in the two biochemical processes under study shows that the PPL-catalyzed hydrolysis of (±)-2 produces preferably (R)-1.Translated fromIzvestiya Akademii Nauk. Seriya Khimicheskaya, No. 4, pp. 761–766, April, 1995.The authors express their gratitude to the Russian Foundation for Basic Research for financial support (Grant No. 93-03-5893).     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定食醋中4-甲基咪唑和2-乙酰基-4-(1,2,3,4-四羟基丁基)咪唑

建立了高效液相色谱-串联质谱法同时检测食醋中4-甲基咪唑(4-Methylimidazole,4-MEI)和2-乙酰基-4-(1,2,3,4-四羟基丁基)咪唑(2-Acetyl-4-(1,2,3,4-tetrahydroxybutyl)imidazole,THI)的方法。样品经超纯水稀释,用氨水溶液调节pH=9.0,采用0.22μm水系微孔滤膜过滤,以乙腈和0.05%氨水为流动相,流速为0.4mL/min,用反相色谱柱Polaris C18-A(150×4.6 mm,3μm)进行分离,采用电喷雾正离子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式检测,以d6-4-甲基咪唑(d6-4-methylimidazole,d6-4-MEI)作为内标进行定量。4-MEI和THI在0.01~1.0mg/L之间线性关系良好(r0.9996),4-MEI和THI在所有醋中0.2mg/L、0.5mg/L和2.0mg/L三个添加浓度的回收率范围为80.2%~101.4%,相对标准偏差均小于6.4%,浅色的白醋和米醋的检出限为0.06 mg/L,定量限为0.2 mg/L;深色的香醋和陈醋的检出限为0.15mg/L,定量限为0.5mg/L。     

Thermal decomposition of copper complexes of 1-phenyl-3-methyl-4-acyl-5-pyrazolone in air atmosphere

Copper complexes of some 1-phenyl-3-methyl-4-acyl-5-pyrazolones have been prepared. The complexes were characterized by elemental analyses and thermal analyses. It was shown that the melting points decrease linearly in increasing the molecular weight of the complexes.     

铽与1-苯基-3-甲基-4-酰代吡唑啉-5-酮的三元配合物的合成、表征与荧光性能

合成了铽与1-苯基-3-甲基-4-异丁酰基吡唑啉-5-酮(HPMIBP)、1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基吡唑啉-5-酮(HPMBP)的四个三元配合物Tb(PMIBP)3.2H2O(A1), Tb(PMIBP)3.bpy(A2), Tb(PMBP)3.2H2O(B1)和Tb(PMBP)3.bpy(B2)(bpy=2, 2'-联吡啶)。用元素分析确定了它们的组成, 并用紫外-可见光谱、红外光谱、差热-热重谱对其进行了表征。研究了它们在固态和溶液中的荧光光谱, 并用频域法测定了它们在溶液中的荧光寿命, 结果表明A1和A2的荧光强度比相应的B1和B2强三个数量级, A2与A1或B2与B1相比, 荧光强度也有一定程度的增强,并且不同溶剂对其荧光强度和荧光寿命都有较大的影响。