| 伪狂犬病毒TK基因转移载体构建及LacZ基因表达 |
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| 引用本文： | 潘兹书,张楚瑜,赵伟光,郑从义,丁建华.伪狂犬病毒TK基因转移载体构建及LacZ基因表达[J].武汉大学学报(理学版),2000,46(6):717-720. |
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| 作者姓名： | 潘兹书 张楚瑜 赵伟光 郑从义 丁建华 |
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| 作者单位： | 武汉大学,生命科学院,湖北,武汉,430072 |
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| 基金项目： | 武汉市科技攻关重点项目资助(962001018) |
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| 摘 要： | 在扩增、克隆PRVtk、gH基因的基础上，构建了包含tk和gH基因片段的转移载体质粒pTK2．5．以PRV糖蛋白gG启动子(PgG)为控制外源基因表达的启动子，以E．colilacZ为报道基因，用其替换pTK2．5质粒tk区的Sall与Xhol之间的序列，构建了转移载体质粒pTK．LacZ．瞬时表达证实，转染细胞的pTK—lacZ质粒在野生型PRV感染的情况下，能有效表达β-Gal酶活性．将pTK．1acZ转染BHK21细胞后再以PRV感染进行同源重组，在143TK-细胞上经5．溴脱氧尿苷选择，Vero细胞纯化，X-GaI染色，蓝斑筛选，分离到重组体PRV(rPRV)．rPRV与野生型PRV在细胞上具有类似的生长特性，且经过连续传代的rPRV仍能稳定的表达β-Gal酶活性．
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| 关 键 词： | 伪狂犬病毒 胸苷激酶基因 转移载体 LacZ基因 |
| 文章编号： | 0253-9888(2000)06-0717-04 |
| 修稿时间： | 2000年10月20 |
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