复制缺陷型人泡沫病毒载体辅助质粒pΔGP的构建及转染小肠癌细胞的研究 |
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引用本文: | 张良,李治,刘万红,刘辉,何小华,李文鑫.复制缺陷型人泡沫病毒载体辅助质粒pΔGP的构建及转染小肠癌细胞的研究[J].武汉大学学报(理学版),2003(6). |
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作者姓名: | 张良 李治 刘万红 刘辉 何小华 李文鑫 |
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作者单位: | 武汉大学生命科学学院,武汉大学生命科学学院,武汉大学生命科学学院,武汉大学生命科学学院,武汉大学生命科学学院,武汉大学生命科学学院 湖北武汉430072,湖北武汉430072,湖北武汉430072,湖北武汉430072,湖北武汉430072,广州军区武汉总医院,湖北武汉430070,湖北武汉430072 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30200083),湖北省科技攻关计划资助项目(2002AA304B09) |
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摘 要: | 在人泡沫病毒原病毒全长克隆pHRSV13的基础上,缺失突变gag和pol基因,并且用SV40polyA加尾信号替代人泡沫病毒的3′LTR,构建辅助质粒pΔGP.将复制缺陷型人泡沫病毒载体质粒pGPSNI EGFP和辅助质粒pΔGP分别转染和共转染小肠癌HIC细胞系,荧光显微镜检测发现共转染pGPSNI EGFP和pΔGP的HIC细胞能够强烈表达绿色荧光蛋白,转染有复制缺陷型人泡沫病毒载体质粒pGPSNI EGFP的HIC细胞能够表达少量的绿色荧光蛋白,而转染有辅助载体pΔGP的HIC细胞不表达绿色荧光.结果证明复制缺陷型人泡沫病毒载体的构建成功,表明人泡沫病毒env基因3′端的内部启动子IP具有弱启动子的活性,并且bel基因产生的调控蛋白能够反式激活人泡沫病毒内部启动子IP和5′LTR的启动子.
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关 键 词: | 辅助质粒 共转染 启动子 绿色荧光蛋白 |
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