| 定向进化提高枯草芽孢杆菌脂肪酶的活力 |
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| 引用本文： | 赵博,陶进,马吉胜,廉虹,王岩,常琳,高仁钧,曹淑桂.定向进化提高枯草芽孢杆菌脂肪酶的活力[J].催化学报,2009,30(4). |
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| 作者姓名： | 赵博 陶进 马吉胜 廉虹 王岩 常琳 高仁钧 曹淑桂 |
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| 作者单位： | 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,吉林,长春,130023 |
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| 摘 要： | 通过定向进化的方法, 提高了一个新的源于枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) 的脂肪酶 (BSL2) 的活力. 经过两轮易错 PCR 以及高通量筛选, 最终获得了比活力为野生出发酶 4.5 倍的突变体 3-1B2. 基因比对结果表明, 共有两个氨基酸发生了突变. 突变酶的酶学性质研究发现, 与野生酶相比, 它的热稳定性及 pH 稳定性略有增加, 最适温度和最适 pH 值则无太大的变化. 同源模建了 BSL2 与 3-1B2 的结构, 并与底物进行了分子对接. 结果表明, 突变体 3-1B2 的结合能比野生型 BSL2 低 1.29 kcal/mol, 活性中心 Ser77 残基与底物羰基的距离也由 0.319 nm 减小为 0.278 nm, 因而加快了酶反应速度, 提高了酶活力.
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| 关 键 词： | 枯草芽孢杆菌 脂肪酶 易错聚合酶链反应 定向进化 分子对接 |
Increasing Activity of Lipase from Bacillus subtilis by Directed Evolution |
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| ZHAO Bo,TAO Jin,MA Jisheng,LIAN Hong,WANG Yan,CHANG Lin,GAO Renjun,CAO Shugui.Increasing Activity of Lipase from Bacillus subtilis by Directed Evolution[J].Chinese Journal of Catalysis,2009,30(4). |
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| Authors: | ZHAO Bo TAO Jin MA Jisheng LIAN Hong WANG Yan CHANG Lin GAO Renjun CAO Shugui |
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