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基于快速定点突变研究含硒人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c的催化活性
引用本文:郭笑,于扬,陈龙,王铭铄,金梦梦,刘广娜,张黎,李涛,高壮.基于快速定点突变研究含硒人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c的催化活性[J].高等学校化学学报,2014,35(10):2109-2113.
作者姓名:郭笑  于扬  陈龙  王铭铄  金梦梦  刘广娜  张黎  李涛  高壮
作者单位:吉林大学药学院,长春,130021
基金项目:China,the Undergraduate Innovative Training Program of China (No.2013B73333).国家自然科学基金,吉林大学医学部博士研究生优秀拔尖人才培育计划,大学生创新训练计划
摘    要:先将人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c(hGSTZ1c-1c)中非催化中心的Cys-137,Cys-154,Cys-165和Cys-205突变为Ser,然后将催化中心14,15和17位的3个氨基酸残基突变为Cys,再利用半胱氨酸缺陷型大肠杆菌表达系统将其特定地转化为Sec,即把GPx的催化基团引入到hGSTZ1c-1c中,高效地获得了具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的模拟酶.其中制备的3个含硒突变体15C,14C/15C和17C均显示出明显的GPx活力.对非含硒突变体性质研究发现,Ser-14或Ser-15任何一个残基发生突变都会导致hGSTZ1c-1c的GST活力几乎丧失,表明Ser-14和Ser-15在催化反应中发挥着重要作用,但前者主要参与底物结合,后者更侧重于催化.

关 键 词:快速定点突变  谷胱甘肽过氧化物酶  人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶

Catalytic Activity of Seleno-hGSTZ1c-1c Based on Site-directed Mutagenesis
GUO Xiao;YU Yang;CHEN Long;WANG Mingshuo;JIN Mengmeng;LIU Guangna;ZHANG Li;LI Tao;GAO Zhuang;WEI Jingyan.Catalytic Activity of Seleno-hGSTZ1c-1c Based on Site-directed Mutagenesis[J].Chemical Research In Chinese Universities,2014,35(10):2109-2113.
Authors:GUO Xiao;YU Yang;CHEN Long;WANG Mingshuo;JIN Mengmeng;LIU Guangna;ZHANG Li;LI Tao;GAO Zhuang;WEI Jingyan
Institution:GUO Xiao;YU Yang;CHEN Long;WANG Mingshuo;JIN Mengmeng;LIU Guangna;ZHANG Li;LI Tao;GAO Zhuang;WEI Jingyan;College of Pharmaceutical Science,Jilin University;
Abstract:
Keywords:Site-directed mutagenesis  Glutathione peroxidase  Human glutathione transferase zeta
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