| 枯草杆菌漆酶重要功能位点的保守性与可变性分析 |
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| 引用本文： | 焦晶,杨雪,金兰娜,高键,周洋,肖亚中,张应玖.枯草杆菌漆酶重要功能位点的保守性与可变性分析[J].高等学校化学学报,2016(7):1320-1327. |
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| 作者姓名： | 焦晶 杨雪 金兰娜 高键 周洋 肖亚中 张应玖 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,长春,130012;2. 安徽大学现代生物制造协同创新中心,合肥,230601;3. 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,长春130012;吉林大学生命科学学院,长春130012 |
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| 基金项目： | 吉林省科技厅计划项目(20140101020JC)，安徽大学现代生物制造协同创新中心开放课题(批准号:BM2014001)资助.Supported by the Jilin Provincial Science and Technology Department Program |
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| 摘 要： | 在对比分析天然枯草杆菌漆酶(CAR)的一级结构与三维空间结构的基础上,锁定了CAR的底物结合通道和铜离子结合位点,设计并构建了CAR的4种突变体.对比分析了野生型酶与4种突变体酶的性质及催化功能,结果表明,该漆酶分子中位于第二保守区的H155位点是漆酶催化所必需的,H155即使被其同义氨基酸(如Arg)替换,也会因氧化还原电势的降低而降低漆酶的催化活力,同时还会导致漆酶的热稳定性和酸碱稳定性降低,以及最适p H值酸移;位于非保守区的A158位点与I224位点的保守性对漆酶的催化是有利的,而S210G突变增强了漆酶的稳定性与催化功能,这可能与S210G突变增强了漆酶的底物通道上一段富含Pro片段的柔性有关.此外,A158/R155H突变(CAHE)可能导致漆酶不耐冷,在低温(50℃)时引起酶活明显降低.所研究的漆酶在2,2'-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)介体存在下,对靛蓝类染料(如靛蓝胭脂红)和三苯甲烷类染料(如结晶紫)的脱色率均高于对偶氮类染料(如甲基红和刚果红)和蒽醌类染料(如活性亮蓝),说明该漆酶对染料有一定的选择性.
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| 关 键 词： | 漆酶 结构 催化 枯草芽孢杆菌 |
Conservative and Variability of the Important Functional Sites in a Laccase from Bacillus Subtilis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Laccase Structure Catalysis Baculus subtilis |
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