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芘二聚体发夹探针用于细胞DNA单链断裂修复能力的评估
引用本文:李印,刘劲松,王禹,祁婷婷,孟乐园,张晶,吕冬梅,焦虎平.芘二聚体发夹探针用于细胞DNA单链断裂修复能力的评估[J].高等学校化学学报,2023(11):142-150.
作者姓名:李印  刘劲松  王禹  祁婷婷  孟乐园  张晶  吕冬梅  焦虎平
作者单位:吉林大学动物科学学院
基金项目:国家自然科学基金(批准号:31501909)资助~~;
摘    要:基于芘分子二聚体的荧光特性设计了一种新型的发夹探针,用于评估不同细胞的单链断裂修复(SSBR)能力.首先利用芘荧光分子设计一个茎上有缺口的DNA发夹探针,该探针在Bst DNA聚合酶作用下可以水解,使荧光信号“关闭”.如果探针茎上的缺口被DNA修复酶修复,可以阻止Bst DNA聚合酶对探针的消化作用,从而阻止荧光信号的“关闭”.该设计可以用于评估细胞的SSBR能力,并通过提取细胞的核蛋白考察了不同细胞的SSBR能力.研究结果表明,肿瘤细胞及细胞系不具有原代细胞的SSBR能力.利用SSBR的关键酶进一步探索了肿瘤细胞SSBR能力缺失的原因,证明是由于肿瘤细胞中含有可以抑制SSBR过程的活性物质.此外,该方法能够同时进行500个细胞的SSBR能力检测,并用于抗衰老药物筛选.

关 键 词:单链断裂修复  芘二聚体  发夹探针  原代细胞  肿瘤细胞
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