芘二聚体发夹探针用于细胞DNA单链断裂修复能力的评估 |
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引用本文: | 李印,刘劲松,王禹,祁婷婷,孟乐园,张晶,吕冬梅,焦虎平.芘二聚体发夹探针用于细胞DNA单链断裂修复能力的评估[J].高等学校化学学报,2023(11):142-150. |
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作者姓名: | 李印 刘劲松 王禹 祁婷婷 孟乐园 张晶 吕冬梅 焦虎平 |
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作者单位: | 吉林大学动物科学学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(批准号:31501909)资助~~; |
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摘 要: | 基于芘分子二聚体的荧光特性设计了一种新型的发夹探针,用于评估不同细胞的单链断裂修复(SSBR)能力.首先利用芘荧光分子设计一个茎上有缺口的DNA发夹探针,该探针在Bst DNA聚合酶作用下可以水解,使荧光信号“关闭”.如果探针茎上的缺口被DNA修复酶修复,可以阻止Bst DNA聚合酶对探针的消化作用,从而阻止荧光信号的“关闭”.该设计可以用于评估细胞的SSBR能力,并通过提取细胞的核蛋白考察了不同细胞的SSBR能力.研究结果表明,肿瘤细胞及细胞系不具有原代细胞的SSBR能力.利用SSBR的关键酶进一步探索了肿瘤细胞SSBR能力缺失的原因,证明是由于肿瘤细胞中含有可以抑制SSBR过程的活性物质.此外,该方法能够同时进行500个细胞的SSBR能力检测,并用于抗衰老药物筛选.
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关 键 词: | 单链断裂修复 芘二聚体 发夹探针 原代细胞 肿瘤细胞 |
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