基于阳离子共轭聚合物比色检测HIV逆转录酶的RNase H活性 |
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引用本文: | 张亚莉,李景印,哈婧,王未肖,王秋平.基于阳离子共轭聚合物比色检测HIV逆转录酶的RNase H活性[J].分析试验室,2012(3):78-82. |
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作者姓名: | 张亚莉 李景印 哈婧 王未肖 王秋平 |
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作者单位: | 河北科技大学理学院;河北科技大学化学与制药工程学院 |
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基金项目: | 河北省自然科学基金(B2011208059);河北省科技支撑计划(11215114D)项目资助 |
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摘 要: | 利用阳离子聚噻吩衍生物与单链DNA和杂合体DNA/RNA通过静电相结合时所产生的紫外吸收变化,建立了一种检测HIV逆转录酶(RT-HIV)的RNase H活性的方法。阳离子聚噻吩衍生物的紫外吸收最大波长位于短波385nm,与单链DNA结合会使聚噻吩衍生物的紫外吸收最大波长红移至525nm;而与杂合体DNA/RNA结合时对其紫外吸收最大波长几乎没有影响,当利用RT-HIV的核糖核酸酶RNase H活性水解掉杂合体中的RNA时,杂合体溶液又会使聚噻吩衍生物的紫外吸收最大波长发生红移。结果表明,紫外吸收最大波长变化明显,甚至直观用肉眼就可以观察到杂合体水解前后溶液颜色的变化。同时还测定了不同时间下RNase H酶水解杂合体中RNA的吸光度变化曲线,计算出了RNase H酶水解的动力学常数和最大初速度。
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关 键 词: | 阳离子聚噻吩衍生物 比色检测 HIV逆转录酶 核糖核酸酶RNase H |
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