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HRP/PET自组装膜及其在光度分析中的应用
引用本文:王娜,肖咏梅,江秀明,林贤福.HRP/PET自组装膜及其在光度分析中的应用[J].分析试验室,2003,22(Z1):212-212.
作者姓名:王娜  肖咏梅  江秀明  林贤福
作者单位:1. 浙江大学化学系,杭州,310027;贵州大学化学与生化学院,贵阳,550025
2. 浙江大学化学系,杭州,310027
摘    要:利用静电自组装技术在阴离子化的PET表面组装了单分子层的HRP酶膜,通过AFM对膜表面形貌进行了分析.由于HRP的沉积,PET薄膜在组装HRP前后,表面形貌发生了较大的变化,表面粗糙度(Rms)由0.645 nh增加到2.580 nm,表面酶颗粒高度为3.3 nm,与HRP的XRD数据(4.028 nm×6.746 nm×11.711)基本相符.制备的酶自组装膜在4℃的低温条件下密封保存.该酶膜在最初的一个星期内酶活性下降较快,之后酶活性则基本保持不变,150天后仍能保持最初时的80%以上的活性;而在常温下,酶膜很快失去活性.表明自组装HRP/PET酶膜在低温下具有很好的保存稳定性.以微量比色皿为反应容器,考察了酶膜与H2O2的显色反应动力学,该反应的表观米氏常数Kapp m=3.2×10-5 mol/L(相对于H2O2底物),显色反应在5 min内完成.在所考查的H2O2浓度浓度区间内(8.8×10-6~8.8×10-5mol/L),酶膜所催化的显色反应产物的吸光度与其浓度之间存在良好的线性关系,对样品中H2O2测定的回收率为96.5%~101.1%.

关 键 词:静电自组装膜  辣根过氧化物酶  分光光度法  AFM  表面形貌

Application of HRP/PET self-assembly films in spectrophotometric analysis
Abstract:
Keywords:AFM
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