| 微量样本中N-糖组分析技术的发展与应用 |
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| 引用本文： | 孟波,李晓宇,崔新玲,应万涛,钱小红.微量样本中N-糖组分析技术的发展与应用[J].分析测试学报,2019,38(12):1416-1422. |
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| 作者姓名： | 孟波 李晓宇 崔新玲 应万涛 钱小红 |
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| 作者单位： | 广东药科大学 药学院,广东 广州 510006;军事科学院军事医学研究院生命组学研究所,蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心,国家蛋白质科学中心(北京),北京 102206;军事科学院军事医学研究院生命组学研究所,蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心,国家蛋白质科学中心(北京),北京 102206;北京工业大学生命科学与生物工程学院,北京 100022;军事科学院军事医学研究院生命组学研究所,蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心,国家蛋白质科学中心(北京),北京 102206 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2017YFF0205400)；法医遗传学公安部重点实验室开放课题(2018KGKFKT01)；国家重点自然基金项目(81530021) |
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| 摘 要： | 针对糖组学分析面临的初始样本量需求较高的技术挑战,该研究发展了一种微量样本N-糖链制备技术(GPAT),通过在移液枪头(Tip)中分别装填C_(18)和HILIC填料,实现了一站式原位蛋白消化、N-糖链释放和富集。与目前普遍采用的基于过滤辅助样品制备(FASP)技术的N-糖组分析策略相比,使用GPAT技术可以实现微量免疫球蛋白G(IgG)和人肝癌HepG2细胞提取蛋白的原位N-糖链的释放和富集,样本起始量减少90%,可以从10μg IgG和10μg的HepG2细胞蛋白中分别检测到20条和39条N-糖链。从6例健康人(3例男性,3例女性)尿液中提取的10μg尿蛋白中检测到49条N-糖链。该方法实现了微量复杂蛋白样本N-糖链简便、快速的定量分析策略,为进一步的糖组学方法推广应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | N-糖链 糖组学 尿蛋白 基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱仪 |
Development and Application of an Analysis Technique for Micro-scale N-Glycome |
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| MENG Bo,LI Xiao-yu,CUI Xin-ling,YING Wan-tao,QIAN Xiao-hong.Development and Application of an Analysis Technique for Micro-scale N-Glycome[J].Journal of Instrumental Analysis,2019,38(12):1416-1422. |
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| Authors: | MENG Bo LI Xiao-yu CUI Xin-ling YING Wan-tao QIAN Xiao-hong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | N-glycan glycome urinaryprotein MALDI-TOF MS |
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