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保健食品中西地那非化学发光免疫分析方法研究
引用本文:程智,张咏仪,杨金易,徐振林,王弘,雷红涛,孙远明,沈玉栋.保健食品中西地那非化学发光免疫分析方法研究[J].分析测试学报,2021,40(10):1503-1508.
作者姓名:程智  张咏仪  杨金易  徐振林  王弘  雷红涛  孙远明  沈玉栋
作者单位:华南农业大学 食品学院 广东省食品质量安全重点实验室,广东 广州 510642
基金项目:国家重点研发计划;基础研究项目;基础研究项目;基础研究项目;广西壮族自治区科技计划;科技特派员项目
摘    要:针对保健食品中西地那非药物的非法添加问题,该研究采用辣根过氧化物酶(HRP)与鲁米诺为信号输出系统,结合直接竞争模式探索了保健食品中西地那非的直接竞争化学发光酶免疫分析方法。基于特异性多克隆抗体,通过逐步优化策略,确定最佳免疫分析条件为:包被原质量浓度为41.67 ng/mL,酶标抗体质量浓度为1.25 μg/mL,封闭液和洗涤液的吐温-20含量为0.05%,稀释液的甲醇添加量为5%,竞争反应时间为40 min。在该条件下,建立了西地那非的直接竞争化学发光免疫分析方法,该方法对西地那非的半抑制浓度(IC50)为0.17 ng/mL,线性检测范围(IC20~IC80)为0.024 ~ 1.21 ng/mL,检出限(IC10,LOD)为0.008 ng/mL。与他达那非等功能类似物无显著交叉;西地那非样品的加标回收率为82.0%~114%,相对标准偏差均小于15%。盲样检测结果与HPLC-MS/MS确证方法具有良好一致性,说明该方法准确可靠,适用于样品中西地那非的快速筛查。

关 键 词:西地那非  直接竞争化学发光酶联免疫分析(dcCLEIA)  保健食品  辣根过氧化物酶(HRP)

Determination of Sildenafil in Health-care Foods by Ultrasensitive Chemiluminescence Enzyme Immunoassay
CHENG Zhi,ZHANG Yong-yi,YANG Jin-yi,XU Zhen-lin,WANG Hong,LEI Hong-tao,SUN Yuan-ming,SHEN Yu-dong.Determination of Sildenafil in Health-care Foods by Ultrasensitive Chemiluminescence Enzyme Immunoassay[J].Journal of Instrumental Analysis,2021,40(10):1503-1508.
Authors:CHENG Zhi  ZHANG Yong-yi  YANG Jin-yi  XU Zhen-lin  WANG Hong  LEI Hong-tao  SUN Yuan-ming  SHEN Yu-dong
Abstract:
Keywords:
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