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二苯基庚烷A干预RAW264.7细胞炎症模型甘油磷脂的UPLC-Q/TOF MS分析
引用本文:肖雪蓉,佘玉奇,张国改,吴霞,冯毅凡.二苯基庚烷A干预RAW264.7细胞炎症模型甘油磷脂的UPLC-Q/TOF MS分析[J].分析测试学报,2016,35(10):1225-1232.
作者姓名:肖雪蓉  佘玉奇  张国改  吴霞  冯毅凡
作者单位:广东药科大学中心实验室,广东广州,510006
基金项目:国家自然科学基金资助项目(21275036,81202429)
摘    要:对RAW264.7细胞在不同状态(正常、炎症、给药)下的甘油磷脂成分进行分析,寻找相关的潜在病理药理标志物,阐明二苯基庚烷A在抗炎过程中对甘油磷脂代谢的影响。实验分为空白组(C)、炎症模型组(L)、二苯基庚烷A给药组(D)和布洛芬给药组(B,阳性对照药组)4组。空白组和炎症组给予新鲜培养基,给药组分别给予新配含20μg/m L二苯基庚烷A和100μg/m L布洛芬的培养基,1 h后,炎症模型组和给药组按终浓度为0.5μg/m L加入脂多糖(LPS)培养,24 h后,运用修饰后的Bligh-Dyer方法提取不同状态下RAW264.7细胞的甘油磷脂成分,并通过超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q/TOF MS)在正负离子模式下对甘油磷脂进行一级(MS)和二级(MS/MS)质谱分析。结合二级质谱裂解数据、元素组成、数据库比对等方法鉴定磷脂成分,再通过主成分分析法(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)以及t检验筛选潜在的甘油磷脂生物标志物。结果显示,炎症组与空白组比较得到27个潜在病理标志物,二苯基庚烷A给药组与炎症组比较得到23个潜在药理标志物,布洛芬给药组与炎症组比较得到17个潜在药理标志物,主要包括磷脂酰胆碱(PC)、溶血磷脂酰胆碱(lyso PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、溶血磷脂酰乙醇胺(lyso PE)。研究表明二苯基庚烷A在抗炎过程中引起了甘油磷脂代谢的明显变化,而这些代谢变化与炎症的发生发展密切相关。

关 键 词:炎症  甘油磷脂  二苯基庚烷A  布洛芬  生物潜在标志物  超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF  MS)

Analysis of Glycerophospholipids in RAW264.7 Cell Inflammation Model Interfered by Diphenylheptane A with UPLC-Q/TOF MS
XIAO Xue-rong,SHE Yu-qi,ZHANG Guo-gai,WU Xi,FENG Yi-fan.Analysis of Glycerophospholipids in RAW264.7 Cell Inflammation Model Interfered by Diphenylheptane A with UPLC-Q/TOF MS[J].Journal of Instrumental Analysis,2016,35(10):1225-1232.
Authors:XIAO Xue-rong  SHE Yu-qi  ZHANG Guo-gai  WU Xi  FENG Yi-fan
Abstract:
Keywords:inflammation  glycerophospholipids  diphenylheptane A  ibuprofen  biomakers  ultra performance liquid chromatography tandem quadrupole time-of-flight mass spectrometry (UPLC-Q/TOF MS)
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