| 基于荧光偏振的高灵敏度蛋白激酶活性分析 |
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| 引用本文： | 王志彬,张学晶,王愈聪,高金鹏,李正平.基于荧光偏振的高灵敏度蛋白激酶活性分析[J].化学学报,2013,71(12):1620-1624. |
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| 作者姓名： | 王志彬 张学晶 王愈聪 高金鹏 李正平 |
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| 作者单位： | a 河北大学化学与环境科学学院 保定 071002;
b 陕西师范大学附属中学 西安 710062 |
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| 基金项目： | 项目受国家自然科学基金（No. 91127035）和教育部博士点基金（No. 20111301130001）资助. |
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| 摘 要： | 利用TiO2纳米棒与磷酸化肽的特异性相互作用，基于荧光偏振检测，建立了快速、简便的高灵敏度蛋白激酶活性分析方法. 在蛋白激酶催化作用下，荧光标记的肽底物被磷酸化，磷酸化的荧光肽通过磷酸基团特异性结合在TiO2纳米棒表面，从而使底物肽上标记的荧光分子的旋转速率发生改变，通过对荧光偏振度进行测量，可实现蛋白激酶活性的定量检测，该方法对蛋白激酶A(PKA)的检出限可达0.0004 U·μL-1. 此外，该方法还成功用于PKA抑制剂H-89的检测，在基于蛋白激酶抑制剂的靶向药物筛选方面具有很好的应用前景.
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| 关 键 词： | 荧光偏振 蛋白激酶A 磷酸化 TiO2纳米棒 抑制剂筛选 |
Ultrasensitive Detection of Protein Kinase Activity by Using the Fluorescence Polarization Technique |
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| Wang Zhibin,Zhang Xuejing,Wang Yucong,Gao Jinpeng,Li Zhengping.Ultrasensitive Detection of Protein Kinase Activity by Using the Fluorescence Polarization Technique[J].Acta Chimica Sinica,2013,71(12):1620-1624. |
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| Authors: | Wang Zhibin Zhang Xuejing Wang Yucong Gao Jinpeng Li Zhengping |
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| Institution: | a College of Chemistry and Environmental Science, Hebei University, Baoding 071002;
b The High School Affiliated to Shaanxi Normal University, Xi'an 710062 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | fluorescence polarization protein kinase A phosphorylation TiO2 nanorods screening of inhibitor |
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