| 基于Aerolysin纳米孔道对单个c-di-AMP分子的检测研究 |
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| 引用本文： | 牛红艳,胡正利,应佚伦,龙亿涛.基于Aerolysin纳米孔道对单个c-di-AMP分子的检测研究[J].化学学报,2019,77(10):989-992. |
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| 作者姓名： | 牛红艳 胡正利 应佚伦 龙亿涛 |
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| 作者单位： | 华东理工大学化学与分子工程学院 上海200237;南京大学化学化工学院生命分析化学国家重点实验室 南京210023;华东理工大学化学与分子工程学院 上海200237;南京大学化学化工学院生命分析化学国家重点实验室 南京210023 |
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| 基金项目： | 项目受国家自然科学基金(21922405);项目受国家自然科学基金(61871183);项目受国家自然科学基金(21834001);国家“万人计划”青年拔尖人才资助 |
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| 摘 要： | 环二腺苷酸(c-di-AMP)是原核细胞中普遍存在的第二信使, 不仅能够有效调控细胞生长、离子转运、细胞壁代谢平衡等多种生理过程, 还能引发I型干扰素应答, 激发机体天然免疫反应. 本实验使用单个气单胞菌溶素(Aerolysin)纳米孔道蛋白构建的单分子界面, 对c-di-AMP进行单分子测量研究. 为提高Aerolysin纳米孔对带负电小分子化合物的测量灵敏度, 本实验利用LiCl为支持电解质, 有效屏蔽Aerolysin孔口表面负电荷, 减小c-di-AMP与Aerolysin纳米孔之间的静电排斥, 从而显著增强了Aerolysin纳米孔道对单个c-di-AMP分子的检测能力. 实验结果显示, 在90 mV电压下, 每分钟在LiCl中获得的有效穿孔事件的数量最高可达同条件KCl支持电解质的30倍, 且有效穿孔事件占总体事件的比例在不同电压下提升了7~11倍. 进一步表明, 使用LiCl支持电解质, 可有效增强Aerolysin孔道对带负电小分子化合物的测量灵敏度. 因此, 本研究实现了Aerolysin纳米孔道对单个环二核苷酸的高灵敏免标记检测, 有望为单分子水平上阐明新型免疫干扰机制提供新的分析方法.
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| 关 键 词： | 环二腺苷酸 环二核菅酸 气单胞菌溶素 单分子界面 生物纳米孔道 |
Detection of Single c-di-AMP by an Aerolysin Nanopore |
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| Niu,Hongyan,Hu,Zhengli,Ying,Yilun,Long,Yi-Tao.Detection of Single c-di-AMP by an Aerolysin Nanopore[J].Acta Chimica Sinica,2019,77(10):989-992. |
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| Authors: | Niu Hongyan Hu Zhengli Ying Yilun Long Yi-Tao |
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| Institution: | a School of Chemistry and Molecular Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237b State Key Laboratory of Analytical Chemistry for Life Science, School of Chemistry and Chemical Engineering, Nanjing University, Nanjing 210023 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | c-di-AMP cyclic dinucleotides aerolysin single molecule interface biological nanopores |
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