| HPLC技术对细菌基因组DNA碱基组成的精确测定 |
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| 引用本文： | 李越中,胡玮,张禹清,张勇,韩冠君,黎志凤,王冰.HPLC技术对细菌基因组DNA碱基组成的精确测定[J].化学学报,2001,59(9):1464-1470. |
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| 作者姓名： | 李越中 胡玮 张禹清 张勇 韩冠君 黎志凤 王冰 |
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| 作者单位： | 山东大学生命科学系微生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(39570013,39870003)和教育部博士点基金资助项目 |
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| 摘 要： | 高效液相色谱技术(HPLC)在精确分析细菌基因组DNA碱基组成时存在着重复性差和杂质干扰的问题。本研究结合反相HPLC技术对化学水解(高氯酸法和甲酸法)和生物酶水解(磷酸二酯酶Ⅰ和牛肠粘膜碱性磷酸酶)DNA的水解条件和产物进行分析，建立了一套系统的分析方法，改善了分析的重复性问题，排除了主要的误差来源，达到了对细菌DNA碱基组成精确分析测定的目的。
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| 关 键 词： | 高速液体色谱 水解 高氯酸 甲酸 磷酸二酯酶 磷酸酶 |
| 修稿时间： | 2001年3月23日 |
Precise determination of base composition in bacterial genome DNA using HPLC techniques |
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| Li Yuezhong,Hu Wei,Zhang Yuqing,Zhang Yong,Han Guanjun,Li Zhifeng,Wang Bing.Precise determination of base composition in bacterial genome DNA using HPLC techniques[J].Acta Chimica Sinica,2001,59(9):1464-1470. |
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| Authors: | Li Yuezhong Hu Wei Zhang Yuqing Zhang Yong Han Guanjun Li Zhifeng Wang Bing |
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| Abstract: | Errors of reproducibility with high performance liquid chromatography (HPLC) are remarkably serious in determination of base composition of bacterial genome DNA, which is usually defined as guanine-plus-cytosine content (G+C) mol%]. For partially purified DNA, salts are a major source of interference in enzymatic degradation and RNAs are a major source of interference in chemical degradation. This research analyzes the conditions and products by chemical (perchloric acid and formic acid) and enzymatic degradations (phasphodiesterase Ⅰ and bovine intestinal mucosa alkaline phophatase) of bacterial genome DNA using RP-HPLC, and introduces a systematic method to precisely measure the base composition of bacterial DNA. |
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| Keywords: | HIGH SPEED LIQUID CHROMATOGRAPHY HYDROLYSIS PERCHLORIC ACID FORMIC ACID PHOSPHODIESTERASE PHOSPHOKINASE |
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