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中药致肾毒性成分马兜铃酸A单抗制备及酶联免疫分析方法的建立
引用本文:南铁贵,何素平,谭桂玉,李刚,王保民,黄璐琦.中药致肾毒性成分马兜铃酸A单抗制备及酶联免疫分析方法的建立[J].分析化学,2010,38(8).
作者姓名:南铁贵  何素平  谭桂玉  李刚  王保民  黄璐琦
作者单位:1. 中国农业大学农学与生物技术学院,北京,100193
2. 吉林省农业科学院,农业环境与资源研究中心,长春,130033
3. 中国中医科学院中药研究所,北京,100700
摘    要:采用活化酯法,将马兜铃酸A分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,得到免疫抗原马兜铃酸A-BSA和包被抗原马兜铃酸A-OVA.利用马兜铃酸A-BSA免疫Bal b/c小鼠,制得鼠单克隆抗体1A11,单抗效价为2×104;单抗为IgG1类,轻链为κ型;与其结构类似物马兜铃酸B、C和D的交叉反应率分别为2.8%,3.5%和31.2%.基于抗马兜铃酸A单克隆抗体的间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA)的IC50为1.9 μg/L,检测范围为0.5~7.5 μg/L.icELISA添加回收率为86%~97%,相对标准偏差在5.2%~11.1%之间.利用所建立的icELISA测定了6个中药材和5个中成药中马兜铃酸A的含量,并用高效液相色谱法(HPLC)进行了验证,其中关木通、广防己、天仙藤、马兜铃和青木香中均检测出马兜铃酸A,而川木通和5个中成药中未检测到马兜铃酸A.结果表明: 本方法可用于中药中马兜铃酸A的快速检测.

关 键 词:马兜铃酸A  单克隆抗体  中药  酶联免疫分析法

Development of Sensitive Monoclonal Antibody-based Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Renal Toxicity Ingredient Aristolochic acid A in Chinese Herb Medicine
NAN Tie-Gui,HE Su-Ping,TAN Gui-Yu,LI Gang,WANG Bao-Min,HUANG Lu-Qi.Development of Sensitive Monoclonal Antibody-based Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Renal Toxicity Ingredient Aristolochic acid A in Chinese Herb Medicine[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2010,38(8).
Authors:NAN Tie-Gui  HE Su-Ping  TAN Gui-Yu  LI Gang  WANG Bao-Min  HUANG Lu-Qi
Institution:NAN Tie-Gui1,HE Su-Ping1,TAN Gui-Yu1,LI Gang2,WANG Bao-Min1,HUANG Lu-Qi3 1(College of Agronomy and Biotechnology,China Agricultural University,Beijing 100193) 2(Agricultural Environment and Resources Research Center,Jilin Academy of Agricultural Sciences,Changchun 130033) 3(Institute of Chinese Medicine,Academy of Traditional Chinese Medicine,Beijing 100700)
Abstract:
Keywords:Aristolochic acid A  Monoclonal antibody  Chinese Herb medicine  Enzyme-linked immunosorbent assay  
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