| 新型反相/强阴离子交换混合模式材料用于磷酸化肽富集 |
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| 引用本文： | 董立君,张丽媛,彭金咏,董佩佩,王丽莉,张利娟,候晓林,赵艳艳.新型反相/强阴离子交换混合模式材料用于磷酸化肽富集[J].分析化学,2017,45(1). |
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| 作者姓名： | 董立君 张丽媛 彭金咏 董佩佩 王丽莉 张利娟 候晓林 赵艳艳 |
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| 作者单位： | 1. 吉林省松原市前郭县中医院,松原,131100;2. 大连医科大学基础医学院,大连,116044;3. 大连医科大学药学院,大连,116044 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，the National Natural Science Foundation of China |
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| 摘 要： | 建立了新型反相/强阴离子交换混合模式材料(C18/SAX)的磷酸化肽富集方法.考察了流动相组成(乙腈浓度、甲酸浓度、缓冲盐浓度)对酪蛋白(α-Casein)酶解液中磷酸化肽分离选择性的影响.实验结果表明,磷酸化肽在C18/SAX上的保留行为受疏水和离子交换作用力的共同调控,单磷酸化肽先于多磷酸化肽从材料上洗脱出来.随着甲酸浓度增加,磷酸化肽的保留减弱;随着盐浓度增加,磷酸化肽保留变小.采用优化后的流动相,建立以20％ ACN/20 mmol/L NH4Ac作为上样溶液,20％ ACN/0.1％ FA和50％ ACN/100 mmol/L NH4Ac/2％ FA分别作为洗脱液分段洗脱单、多磷酸化肽的方法.以α-Casein和人血清白蛋白(HSA)酶解液的混合溶液(1∶20,n/n)作为模拟样品,实现了单、多磷酸化肽的同时富集和分段洗脱,分别检测到4条单磷酸化肽和14条多磷酸化肽的信号.将本方法用于牛奶中的磷酸化肽检测,共鉴定到4条单磷酸化肽和8条多磷酸化肽信号.结果表明,本富集方法选择性高,有良好的应用前景.
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| 关 键 词： | 磷酸化肽 反相/强阴离子交换材料 富集 |
Application of Novel Reversed Phase/Strong Anion Exchange Material in Enrichment and Fractionation of Phosphopeptides |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Phosphopeptides Reversed phase/strong anion exchange material Enrichment |
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