|
|||||
|
|
| 全血改进线性指数聚合酶链式反应用于焦磷酸测序检测基因多态性 | |
| 引用本文： | 项铮,刘云龙,邢晓清,初亚男,宋沁馨,周国华.全血改进线性指数聚合酶链式反应用于焦磷酸测序检测基因多态性[J].分析化学,2015(1):55-62. |
| 作者姓名： | 项铮 刘云龙 邢晓清 初亚男 宋沁馨 周国华 |
| 作者单位： | 1. 药物质量与安全预警教育部重点实验室，中国药科大学，南京210009 2. 南京大学医学院附属金陵医院药理科,南京,210002 3. 药物质量与安全预警教育部重点实验室，中国药科大学，南京210009; 南京大学医学院附属金陵医院药理科，南京210002 |
| 基金项目： | 江苏省科技支撑计划社会发展项目，中国博士后科学基金特别资助项目，南京军区南京总医院院内课题，江苏省青蓝工程资助 |
| 摘 要： | 焦磷酸测序是目前基因多态性检测的主要方法之一,但是其前期的样本制备工作较为繁琐,限制了其在临床检测中的应用。为了简化焦磷酸测序的流程,本研究根据不对称PCR原理,改进了线性指数聚合酶链式反应(LATE-PCR)的引物设计方法,增加过量引物的长度和浓度,并结合全血直接扩增技术,建立了基于普通r Taq聚合酶和高p H缓冲液(Hp H Buffer)的全血改进LATE-PCR(Improved LATE-PCR,im LATE-PCR)方法。考察了方法的最优扩增体系、血液抗凝剂对其影响以及全血模板量。采用单管、一步法直接扩增出单链测序模板,成功地对24例临床血样的乙醇脱氢酶基因多态性进行了检测,检测结果可用于指导临床个体化用药。24例样本的基因型分别为ADH1B位点AA纯合6例、AG杂合14例、GG纯合4例;ADH1C位点GG纯合20例、AG杂合4例、AA纯合0例。 |
| 关 键 词： | 全血直接扩增 线性指数聚合酶链式反应 焦磷酸测序 基因多态性 酒精代谢 |
Genotyping of Alcohol Dehydrogenase Gene by Pyrosequencing Coupled with Improved Linear_after_the_Exponential Polymerase Chain Reaction Using Human Whole Blood as Starting Material |
|
| XIANG Zheng,LIU YunLong,XING XiaoQing,CHU YaNan,SONG QinXin,ZHOU GuoHua.Genotyping of Alcohol Dehydrogenase Gene by Pyrosequencing Coupled with Improved Linear_after_the_Exponential Polymerase Chain Reaction Using Human Whole Blood as Starting Material[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2015(1):55-62. | |
| Authors: | XIANG Zheng LIU YunLong XING XiaoQing CHU YaNan SONG QinXin ZHOU GuoHua |
| Institution: | XIANG Zheng;LIU Yun-Long;XING Xiao-Qing;CHU Ya-Nan;SONG Qin-Xin;ZHOU Guo-Hua;Key Laboratory of Drug Quality Control and Pharmacovigilance of Ministry of Education,China Pharmaceutical University;Department of Pharmacology,Jinling Hospital,Nanjing University School of Medicine; |
| Abstract: | |
| Keywords: | Whole blood_polymerase chain reaction Linear_after_the_exponential_polymerase chain reaction Pyrosequencing Gene polymorphism Ethanolic metabolism |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |