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新城疫病毒流式微球免疫检测新方法
引用本文:杨丽丽,王振国,王明泰,牟峻,邹明强,李锦丰,王楠,钱爱东.新城疫病毒流式微球免疫检测新方法[J].分析化学,2008,36(1):29-33.
作者姓名:杨丽丽  王振国  王明泰  牟峻  邹明强  李锦丰  王楠  钱爱东
作者单位:1. 中国检验检疫科学研究院,北京,100025;吉林出入境检验检疫局,长春,130062;吉林农业大学动物科技学院,长春,130118
2. 吉林出入境检验检疫局,长春,130062
3. 中国检验检疫科学研究院,北京,100025
4. 吉林农业大学动物科技学院,长春,130118
基金项目:科技部科研院所社会公益研究专项(No.2005DIA2J128),科技部防控禽流感应急科技专项(No.2004BA519A56),国家质检总局科技攻关项目(No.2003IK057、2004IK033、2005IK0073)资助
摘    要:本研究基于新城疫病毒多克隆抗体的制备及优化,以聚苯乙烯微球作为蛋白质载体建立免疫检测体系,建立了快速检测新城疫病毒的流式细胞术新方法。以藻红蛋白荧光染料对新城疫多克隆抗体荧光标记,取1μL荧光微球与100μL新配制的单克隆抗体溶液反应,依次加入一定量待测抗原和藻红蛋白标记的多克隆抗体,漩涡振荡10s,室温振荡反应充分,形成双抗体夹心复合物,用流式细胞仪进行检测。采用ELISA法对免疫试剂进行了匹配性筛选实验,优选了试剂用量,并与传统ELISA方法进行了对比分析。实验结果表明,单克隆抗体350mg/L、多克隆抗体300mg/L时可获得最佳分析效果,与传统的ELISA方法呈现出良好的相关性,不与鸡传染性支气管炎病毒、鸡痘病毒、鸡马立克氏病病毒等发生交叉反应。

关 键 词:新城疫病毒  流式细胞术  微球  免疫检测
修稿时间:2007年1月31日

A Novel Immunoassay of Detecting Newcastle Disease Virus by Cytometry with Flowing Microsphere as Protein Carrier
Yang Li-Li,Wang Zhen-Guo,Wang Ming-Tai,Mu Jun,Zou Ming-Qiang,Li Jin-Feng,Wang Nan,Qian Ai-Dong.A Novel Immunoassay of Detecting Newcastle Disease Virus by Cytometry with Flowing Microsphere as Protein Carrier[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2008,36(1):29-33.
Authors:Yang Li-Li  Wang Zhen-Guo  Wang Ming-Tai  Mu Jun  Zou Ming-Qiang  Li Jin-Feng  Wang Nan  Qian Ai-Dong
Abstract:
Keywords:Newcastle disease virus  cytometry  microsphere  immunoassay
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