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荧光相关光谱单分子检测系统的研究
引用本文:张普敦,任吉存.荧光相关光谱单分子检测系统的研究[J].分析化学,2005,33(7):899-903.
作者姓名:张普敦  任吉存
作者单位:1. 上海交通大学化学化工学院,上海,200240;上海交通大学环境科学与工程学院,上海,200240
2. 上海交通大学环境科学与工程学院,上海,200240
基金项目:国家自然科学基金;国家自然科学基金;上海市自然科学基金;中国博士后科学基金
摘    要:基于激光共焦构型,构建了一套高灵敏度和高稳定性的荧光相关光谱单分子检测系统。采用高数值孔径物镜使激光束高度聚焦,并用同一物镜收集样品的荧光,单光子计数器用于实时记录荧光信号。优化系统保持物镜焦点、针孔以及单光子计数器光敏区高度同轴。采用60×1.2(NA)的水浸物镜及直径为160μm的针孔得到的检测系统结构参数为ω0和z0分别为0.42μm和1.33μm,照射微区的体积为1.3fL。单个RhodamineGreen分子可获得13倍的信噪比。用该系统获得了小分子和生物大分子(DNA片段和蛋白质)的高质量荧光相关图谱,成功实现了单个分子的检测。

关 键 词:荧光相关光谱  单分子检测  分子扩散

Investigation on the Setup of Fluorescence Correlation Spectroscopy for Single Molecule Detection
Zhang Pudun,Ren Jicun.Investigation on the Setup of Fluorescence Correlation Spectroscopy for Single Molecule Detection[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2005,33(7):899-903.
Authors:Zhang Pudun  Ren Jicun
Abstract:
Keywords:Fluorescence correlation spectroscopy  single molecule detection  molecule diffusion  
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