| 芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的克隆及其植物表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 孔令洁,方荣祥,陈正华,莽克强.芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的克隆及其植物表达载体的构建[J].中国科学B辑,1992(4). |
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| 作者姓名： | 孔令洁 方荣祥 陈正华 莽克强 |
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| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所，中国科学院微生物研究所，中国科学院遗传研究所，中国科学院微生物研究所 北京 100080 中国科学院遗传研究所，北京 100101，北京 100080，北京 100101，北京 100080 |
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| 基金项目： | 国家“八五”技术攻关项目 |
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| 摘 要： | 从感病的萝卜叶片中得到芜菁花叶病毒(TuMV)的分离物,以oligo(dT)为引物,合成了其基因组RNA的互补DNA,并克隆到载体λ-ZAPⅡ中。通过单链cDNA探针杂交和DNA末端序列分析找出含有poly-A尾巴的阳性克隆。我们对一个含有1429个碱基插入片断的克隆进行了序列分析,根据芜菁花叶病毒外壳蛋白分子量的大小和马铃薯Y病毒组蛋白质加工位点氨基酸序列的保守性,确定了外壳蛋白基因的5′末端。利用PCR方法对其5′末端进行改造,加进起始密码ATG和两个限制性内切酶位点。通过基因重组操作,将该基因插入到双元载体pBI121的衍生物pBIN437中,得到芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的植物表达载体。
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| 关 键 词： | 芜菁花叶病毒 外壳蛋白基因 植物表达载体 |
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