高粱叶片磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶四级结构对称性的研究

本文采用二亚酰胺酸二甲酯类双功能试剂的化学交联作用结合SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析技术研究了高粱叶片PEP羧化酶四级结构的对称性。结果表明,此酶的四个亚基以同构缔合方式相联接,其四级结构具有D_2对称性。配基对PEP羧化酶与辛二亚酰胺酸二甲酯的交联作用有明显的影响。底物PEP,必须金属离子Mg~(2+),PEP-Mg~(2+)及抑制剂苹果酸均不同程度地提高了酶的交联程度,使酶分子内亚基相互作用力改变。激活剂G6P则防止酶与辛二亚酰胺酸二甲酯交联。不管G6P存在与否,PEP羧化酶都以活性的四聚体形式存在。因此推测G6P在此酶分子上的调节部位可能位于亚基接触区内。亚基间交联作用对PEP羧化酶催化功能影响不大,但却提高了酶对尿素、盐酸胍、酸及高温等不利条件的抗性。