基于新型HRP底物白藜芦醇和Ag／SiO2纳米粒子的酶联荧光免疫传感体系

以一种纯天然产物——白藜芦醇（resveratrol，RST）作为辣根过氧化物酶（HRP）荧光底物运用于酶联荧光免疫传感体系．RST对HRP，H2O2的荧光响应性能优于传统HRP荧光底物，诸如对羟苯丙酸、Amplex Red和佳味醇．RST本身只有极弱的荧光，在HRP催化下可被H2O2氧化成二聚体产物，该二聚体在315nm的激发光下能发射波长为462nm的强荧光，并且反应体系的荧光强度增加值与HRP量在一定浓度范围内成线性相关．根据此关系和竞争型免疫定量原理，以日本血吸虫抗体（SjAb）为模型分析对象，建立了基于新HRP荧光底物的酶联荧光传感分析新方法．运用制备的传感装置测定SjAb的线性范围为1．5×10^-6～7．3×10^-4g／L，检出限为1．5×10^-6g／L，测定浓度为5×10^-6g／L SjAb的相对标准偏差为4．7％（n=10）．RST的二聚体产物水溶性很低，通过该装置可将酶反应产物沉积在具Ag／SiO2纳米粒子的传感界面上，利用纳米Ag／SiO2对产物吸附富集作用，不仅解决了传统方法不便于测定低水溶性的产物的问题，而且提高了分析灵敏性．