天花粉蛋白基因的克隆、序列测定及在大肠杆菌和烟草中的表达 |
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引用本文: | 鲍一明,储瑞银,韩晋华,张会,潘乃禾遂,顾孝诚,陈章良.天花粉蛋白基因的克隆、序列测定及在大肠杆菌和烟草中的表达[J].中国科学B辑,1992(9). |
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作者姓名: | 鲍一明 储瑞银 韩晋华 张会 潘乃禾遂 顾孝诚 陈章良 |
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作者单位: | 北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室 北京 100871,北京 100871,北京 100871,北京 100871,北京 100871,北京 100871,北京 100871 |
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摘 要: | 本文利用DNA多聚酶链式反应(PCR)技术,从括楼基因组DNA中扩增并克隆了天花粉蛋白基因,核苷酸序列分析结果表明,我们克隆的是天花粉蛋白的成熟肽及N端23个氨基酸的信号的编码序列,与前人从基因组或cDNA中克隆的该基因的比较发现,其同源性为99.25%,并且证实与发表的蛋白质一级结构的序列有较大差异,将该基因克隆到大肠杆菌高效表达质粒pJLA_(502)的P_RP_L启动子下游,通过温度诱导,得到了表达产物,进一步将该基因克隆到植物中间载体pE_3的花椰菜花叶病毒35S启动子下游,应用根癌农杆菌Ti质粒介导的遗传转化系统,成功地将该基因导入了烟草基因组,获得了转基因植株,Western blotting分析结果证实,天花粉蛋白基因已在大肠杆菌和转基因烟草中表达。
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关 键 词: | 天花粉蛋白 DNA多聚酶链式反应 核苷酸序列分析 基因表达 转基因植物 |
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