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酵母丙氨酸tRNA类似物的合成及其生物活力的测定
引用本文:刘建华,王德宝.酵母丙氨酸tRNA类似物的合成及其生物活力的测定[J].中国科学B辑,1991(1).
作者姓名:刘建华  王德宝
作者单位:中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室,中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室 上海 200031,上海 200031
摘    要:在体外系统中,T 7-RNA聚合酶转录编码酵母丙氨酸tRNA及其半分子的DNA,获得不含修饰核苷酸的酵母丙氨酸tRNA及其5’半分子(1-35位核苷酸)和3'半分子(37-75位核苷酸).在T4-RNA连接酶的催化下,不含修饰核苷酸的5'半分子(1-35位核苷酸)和3'半分子(37-75位核苷酸)分别与天然的3'半分子(36-75位核苷酸)和5'半分子(1-36位核苷酸)连接成tRNA类似物.用以上方法得到了酵母丙氨酸tRNA的3个类似物:(1)tRNA的5'半分子不含修饰核苷酸;(2)tRNA的3'半分子不含修饰核苷酸;(3)整个tRNA分子不含有修饰核苷酸.在鼠肝氨酰tRNA合成酶系统中测定tRNA接受丙氨酸的活力,在兔网质无细胞蛋白质合成系统中测定tRNA将丙氨酸参入蛋白质的活力.结果是:5'半分子不含修饰核苷酸者,其接受丙氨酸的活力降低52%,而参入丙氨酸的活力基本不变;3'半分子不含修饰核苷酸者,其接受丙氨酸的活力降低79%,参入活力降低57%;整个分子不含修饰核苷酸者接受丙氨酸的活力降低85%,参入活力降低47%.这些结果说明修饰核苷酸,尤其是3'半分子的修饰核苷酸与tRNA的接受活力和参入活力间有密切的关系.

关 键 词:修饰核苷酸  生物功能  酵母丙氨酸tRNA
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