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用铀试剂I共振光散射法测定蛋白质的研究
引用本文:李树伟,李娜,赵凤林,李克安.用铀试剂I共振光散射法测定蛋白质的研究[J].光谱学与光谱分析,2002,22(4):619-622.
作者姓名:李树伟  李娜  赵凤林  李克安
作者单位:北京大学化学与分子工程学院 北京100871 (李树伟,李娜,赵凤林),北京大学化学与分子工程学院 北京100871(李克安)
基金项目:国家自然科学基金资助 ( 2 97750 0 3 )
摘    要:本文提出一种新的光散射探针染料———铀试剂Ⅰ (ArsenazoⅠ ) ,在pH 3 2 9的条件下 ,ArsenazoⅠ本身只有极弱的光散射 ,它与蛋白质的结合物有强烈的共振光散射作用。在λ =4 0 0nm处 ,光散射有最大强度 ,光散射强度与蛋白质的浓度成正比。据此建立了一种测定蛋白质的新方法。该方法简便、快速、灵敏度高 ,对HSA的检测限达到 6 0ng·mL-1 ,线性范围达到 0~ 18μg·mL-1 ,用于人体血清样品的分析并同考马斯亮蓝法比较 ,取得了令人满意的结果。本文也研究了牛血清白蛋白 (BSA)、γ球蛋白、鸡蛋白蛋白、溶菌酶、胃蛋白酶与染料ArsonazoⅠ之间的作用 ,探讨了共振光散射的机理

关 键 词:共振光散射法  测定  蛋白质  铀试剂I  光散射探针试剂  染料  分析
文章编号:1000-0593(2002)04-0619-04
修稿时间:2001年6月8日

Study on determination of protein with Arsenazo I using resonance light scattering technique]
Shu-wei Li,Na Li,Feng-lin Zhao,Ke-an Li.Study on determination of protein with Arsenazo I using resonance light scattering technique][J].Spectroscopy and Spectral Analysis,2002,22(4):619-622.
Authors:Shu-wei Li  Na Li  Feng-lin Zhao  Ke-an Li
Institution:College of Chemistry and Molecular Engineering, Peking University, Beijing 100871, China.
Abstract:A new RLS (Resonance light scattering) probe is presented in this paper. In the Britton-Robinson buffer at pH 3.29, Arsenazo I combines with proteins by intermolecular forces, resulted in an enhanced Rayleigh light scattering. The RLS intensity reaches maximum at 400 nm and is proportional to the concentration of protein. A novel method for the determination of micro-amount of protein is developed. The assay is simple, rapid and sensitive with a detection limit at 60 ng.mL-1 and a linear range up to 18 micrograms.mL-1. This method is applied to the determination of human serum protein, and the results, compared to Bradford method, is satisfactory. The interaction of Arsenazo I with BSA, gamma-G, oval albumin, lysozyme, pepsin are investigated and the mechanism of RLS is also discussed.
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