人钠/碘转运体基因转染结肠癌SW480细胞及相关蛋白表达的检测 |
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引用本文: | 周佰林,张琦,张红征,李焕斌,正伟,王玲.人钠/碘转运体基因转染结肠癌SW480细胞及相关蛋白表达的检测[J].应用数学,2013,35(12). |
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作者姓名: | 周佰林 张琦 张红征 李焕斌 正伟 王玲 |
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基金项目: | 温州市科技局科研基金资助项目 |
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摘 要: | 目的以重组人钠/碘转运体(hNIS)基因转染结肠癌SW480细胞并检测hNIS mRNA及蛋白的表达,为放射性碘治疗非甲状腺肿瘤提供新思路。方法将构建好的重组质粒(pcDNA3.1+-hNIS)进行酶切、测序鉴定并扩增、提取。SW480细胞分为重组质粒(pcDNA3.1+-hNIS)转染组、空白质粒(pcDNA3.1+)转染组、空白对照组,转染后以RT-PCR和Western blot检测各组细胞hNIS mRNA和蛋白的表达。结果酶切和测序结果显示插入的hNIS基因大小和方向均正确。RT-PCR和Western blot显示重组质粒转染组SW480细胞可见hNIS mRNA和蛋白的表达,而空白对照组和空白质粒转染组均未检测到hNIS mRNA和蛋白的表达。结论脂质体法可有效地将hNIS基因转染至SW480细胞并成功表达hNIS蛋白。
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关 键 词: | 钠/碘转运体 蛋白免疫印迹 基因转染 脂质体 |
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