| 人尿激酶原在CHO细胞中的基因扩增与高效表达 |
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| 引用本文： | 张宏权,李风知,俞炜源,李秀珍,方继明,费恩阁,黄翠芬.人尿激酶原在CHO细胞中的基因扩增与高效表达[J].中国科学B辑,1993(5). |
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| 作者姓名： | 张宏权 李风知 俞炜源 李秀珍 方继明 费恩阁 黄翠芬 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院基础医学研究所，军事医学科学院生物工程研究所解放军分子遗传学中心，军事医学科学院生物工程研究所解放军分子遗传学中心，军事医学科学院生物工程研究所解放军分子遗传学中心，军事医学科学院生物工程研究所解放军分子遗传学中心，军事医学科学院生物工程研究所解放军分子遗传学中心，军事医学科学院生物工程研究所解放军分子遗传学中心 北京 100850，北京 100850，北京 100850，北京 100850，北京 100850，北京 100850，北京 100850 |
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| 基金项目： | 国家“863”高科技资助项目 |
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| 摘 要： | 本文通过基因共转染和基因共扩增方法,在SV40病毒晚期启动子控制下成功地在中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-DHFR~-)中高效表达了人尿激酶原,其表达水平在5×10~(-6) mol/L氨甲喋呤存在下可达2—3μg/10~6细胞/24 h。采用PMA诱导可将表达水平提高至3.5—4μg/10~6细胞/24 h。相应的Pro-UKcDNA在细胞基因组上整合的拷贝数为200—300拷贝/细胞。Western blot分析表明,表达出来的重组Pro-UK与天然Pro-UK具有相似的分子量:S_(2444)测活法证明重组Pro-UK具有体外酰胺水解活性。
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| 关 键 词： | 人尿激酶原 中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株 基因共转染 基因共扩增 PMA超诱导作用 |
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