基于LSCM的线扫描方向识别方法的建立与应用

激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)具有高分辨率和高光学切片的成像能力,是生命科学研究不可或缺的工具。通常采用的XY或者XYZ扫描方式成像速度慢,限制了生物研究中快速现象的追踪。本文介绍了实时快速成像的XT线扫描模式,并建立线扫描方向的识别方法。制作荧光小球样本,经过荧光小球划出不同方向的线段,使线段的一端接近荧光小球的中心而另一端远离,对线段进行XT线扫描,根据荧光信号与两端距离的远近判断扫描方向。阐述了XT线扫描在Zeiss、Nikon和Olympus共聚焦显微镜中的具体操作方法,并比较了其线扫描方向的差异。本研究建立了一套确定线扫描方向的实用方法,该方法简便易操作,具有普遍适用性,可为显微成像从业者和研究者提供借鉴。