| 基于免标记发夹型探针和核酸外切酶Ⅲ的荧光信号放大DNA检测 |
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| 引用本文： | 郭秋平,赵下雨,谢琴,王柯敏,万俊,袁宝银,谭誉宇.基于免标记发夹型探针和核酸外切酶Ⅲ的荧光信号放大DNA检测[J].高等学校化学学报,2014(8). |
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| 作者姓名： | 郭秋平 赵下雨 谢琴 王柯敏 万俊 袁宝银 谭誉宇 |
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| 作者单位： | 湖南大学生物学院;湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室;湖南大学生物纳米与分子工程湖南省重点实验室;湖南大学化学化工学院; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重大项目(批准号:21190044)、国家自然科学基金(批准号:21175035);国家“九七三”计划项目(批准号:2011CB911002);科技部国际合作专项(批准号:2010DFB30300);湖南省科学技术项目(批准号:2013FJ4042)资助~~ |
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| 摘 要： | 设计合成了一种长臂发夹型核酸探针,结合核酸外切酶Ⅲ水解反应建立了一种免标记荧光信号放大高灵敏检测DNA的新方法.当不存在靶DNA时,SYBR GreenⅠ荧光染料能够嵌入发夹型探针的茎部而发出很强的荧光,而当存在靶DNA并与发夹型探针杂交后,核酸外切酶Ⅲ从杂交产物的3'端开始水解发夹型探针,释放出靶DNA,并触发下一个酶水解反应,同时SYBR GreenⅠ染料也随发夹型探针水解而释放,导致荧光信号降低,从而实现了对DNA的免标记荧光信号放大高灵敏检测.该方法的检出限低至320 fmol/L,比传统双标的分子信标的方法降低了4~5个数量级,且该方法还具有免标记、简单、快速的特点.
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| 关 键 词： | 发夹型探针 核酸外切酶Ⅲ 免标记 信号放大 DNA检测 |
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