分子印章法DNA芯片的合成——Ⅱ. 接触压印反应在片合成寡核苷酸 |
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引用本文: | 肖鹏峰,何农跃,贺全国,张春秀,王轶文,陆祖宏,徐吉庆.分子印章法DNA芯片的合成——Ⅱ. 接触压印反应在片合成寡核苷酸[J].中国科学B辑,2001,31(5):399-404. |
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作者姓名: | 肖鹏峰 何农跃 贺全国 张春秀 王轶文 陆祖宏 徐吉庆 |
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作者单位: | 肖鹏峰(东南大学分子与生物分子电子学教育部重点实验室南京210096)
何农跃(东南大学分子与生物分子电子学教育部重点实验室南京210096)
贺全国(东南大学分子与生物分子电子学教育部重点实验室南京210096)
张春秀(东南大学分子与生物分子电子学教育部重点实验室南京210096)
王轶文(东南大学分子与生物分子电子学教育部重点实验室南京210096)
陆祖宏(东南大学分子与生物分子电子学教育部重点实验室南京210096)
徐吉庆(南京益来基因医学有限公司南京210016) |
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基金项目: | 国家“八六三”高技术项目(103-13-05-01,101-01-01)、国家重大基础研究项目(批准号:G1998051204)、国家自然科学基金资助项目(批准号:60071001)和教育部"高等学校骨干教师资助计划”项目 |
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摘 要: | 研究了分子印章法DNA芯片在片合成技术中的压印化学合成过程, 提出了压印偶联反应和压印脱二对甲氧基三苯基阳离子(DMT)反应合成寡核苷酸的2种方案, 并对其合成产率的差异进行了比较. 由于单次压印偶联反应比压印脱DMT反应合成效率高且所需时间短, 故选择压印偶联反应来合成寡核苷酸及其阵列并对其工艺进行了优化. 实验表明压印偶联反应的合成效率高, 从第6个核苷开始偶联效率接近100%; 压印2次比压印1次的偶联效率高且更均匀; 压印3次及3次以上除更均匀外对偶联效率的改善不明显; 玻璃载片经多次压印后对偶联反应的影响不大. 用压印偶联反应的方法成功合成出20 mer的寡核苷酸探针.
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关 键 词: | 压印偶联反应 压印脱DMT反应 寡核苷酸在片合成 PDMS印章 |
收稿时间: | 2001-01-20 |
修稿时间: | 2001年1月20日 |
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