毛细管区带电泳检测抗EGFR抗体的电荷异质性

建立了抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体电荷异质性的检测方法。采用毛细管区带电泳(CZE)模式,考察了分离缓冲液浓度和pH值、添加剂、分离电压、毛细管温度对主峰与酸碱性变体分离度的影响。以380mmol?L-16-氨基己酸(EACA,pH6.0)为分离缓冲液,0.1%羟丙基甲基纤维素(HPMC)和1.9mmol?L-1三亚乙基四胺(TETA)作为添加剂,分离电压25kV,分离时间8min,毛细管温度20℃条件下,电荷变体能够得到良好分离,且在0.1~1mg?mL-1范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,主成分、酸、碱变体1和碱变体2的定量下限(LOQ)分别为30.0,150.2,125.2,93.3μg?L-1,重复性和中间精密度RSD值小于2%,回收率为95.4%~105.4%。该方法简单、快速、成本低,可以满足抗EGFR抗体的电荷异质性检测要求。