| 耐碱细菌NTT36耐碱基因的克隆及表达产物的分析 |
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| 引用本文： | 龚勇,曹军卫,刘同明.耐碱细菌NTT36耐碱基因的克隆及表达产物的分析[J].武汉大学学报(理学版),1998(6). |
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| 作者姓名： | 龚勇 曹军卫 刘同明 |
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| 作者单位： | 武汉大学生命科学学院 |
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| 摘 要： | 耐碱芽孢杆菌ＮＴＴ３６总ＤＮＡ经ＥｃｏＲＩ酶不完全消化，与质粒ｐＵＣ１８的ＥｃｏＲＩ酶切产物在体外重组后，转化大肠杆菌ＨＢ１０１．在碱性平板上直接筛选耐碱转化子，转化子经检测具有氨苄青霉素（Ａｍｐｒ）抗性，分析表明转化子具有１５ｋｂ大小的重组质粒．用此重组质粒转化大肠杆菌ＨＢ１０１、ＤＨ５α和ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，均产生大量同时具有耐碱性和Ａｍｐ抗性的转化子．通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和点杂交证明此重组质粒（定名为ｐＧＣＡ）由ｐＵＣ１８和ＮＴＴ３６总ＤＮＡ的片段组成．分别提取上述３种克隆转化子和ＮＴＴ３６细胞膜蛋白，进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ梯度凝胶电泳，发现在ｐＨ１０．６条件下培养的转化子和供体菌ＮＴＴ３６与在中性培养基中生长的转化子和受体菌相比，有５条多肽带有明显差异．表明这５条多肽带与耐碱性有关．
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| 关 键 词： | 耐碱芽孢杆菌，耐碱基因，克隆，表达 |
CLONE AND SUBCOLNE OF THE ALKALOPHILIC GENE FROM ALKALOPHILIC Bacillus sp.NTT36 AND ANALYSIS OF EXPRESSED PRODUCTS IN E.coli |
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| Gong Yong,Cao Junwei,Liu Tongming.CLONE AND SUBCOLNE OF THE ALKALOPHILIC GENE FROM ALKALOPHILIC Bacillus sp.NTT36 AND ANALYSIS OF EXPRESSED PRODUCTS IN E.coli[J].JOurnal of Wuhan University:Natural Science Edition,1998(6). |
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| Authors: | Gong Yong Cao Junwei Liu Tongming |
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