| 甜菜黄脉坏死病毒RNA3和RNA4有生物活性体外转录产物及功能研究 |
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| 引用本文： | 李毅,魏春红,田波,潘乃穟,陈章良.甜菜黄脉坏死病毒RNA3和RNA4有生物活性体外转录产物及功能研究[J].中国科学B辑,1994(9). |
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| 作者姓名： | 李毅 魏春红 田波 潘乃穟 陈章良 |
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| 作者单位： | 北京大学生物系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室，北京大学生物系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室，北京大学生物系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室，北京大学生物系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室，北京大学生物系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室 北京 100871，北京 100871，北京 100871 中国科学院微生物研究所 北京 100080，北京 100871，北京 100871 |
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| 摘 要： | 甜菜黄脉坏死病毒RNA3和RNA4全长cDNA的合成是分别以Oligo-d(T)_(15)为引物合成第一链cDNA,cDNA的第二链的合成则分别应用RNA3和RNA4特异引物完成。全长双链cDNA分别克隆在pGEM3Zf(+)载体中,置于噬菌体Sp6启动子控制下。在体外以质粒DNA为模板应用“run off”系统及Sp6RNA Polymerase成功地合成了大量的具有高度生物活性的转录产物RNA3和RNA4。在两种转录反应系统中,以第一种方法即转录与加帽(capping)分步进行转录效率高,第二种方法(转录与加帽同时进行)转录效率较低,但转录产物侵染性更高。虽然在RNA3和RNA4转录产物的5′末端和3′末端分别含数目不同的非病毒核酸序列,但转录产物的活性并未受到显著的影响。应用这种具有高度生物活性的体外转录产物与该病毒Rg1分离物机械接种甜菜幼苗根毛,首次阐明了RNA3是导致甜菜丛根病的主要因素。
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| 关 键 词： | 甜菜黄脉坏死病毒 体外转录 功能分析 |
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