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蛋白质INSM1中的锌指结构域ZF(4-5)的表达、纯化与表征
引用本文:王华谱,朱勤俊,刘买利,杨运煌,岳霞丽.蛋白质INSM1中的锌指结构域ZF(4-5)的表达、纯化与表征[J].波谱学杂志,2017,34(1).
作者姓名:王华谱  朱勤俊  刘买利  杨运煌  岳霞丽
作者单位:华中农业大学 理学院,湖北 武汉 430070;波谱与原子分子物理国家重点实验室,武汉磁共振中心(中国科学院 武汉物理与数学研究所),湖北 武汉 430071;波谱与原子分子物理国家重点实验室,武汉磁共振中心(中国科学院 武汉物理与数学研究所),湖北 武汉 430071;华中农业大学 理学院,湖北 武汉,430070
基金项目:国家自然科学基金资助项目,国家重点研发计划资助项目
摘    要:胰岛素瘤相关蛋白1(INSM1)是一类转录调节蛋白,通过其C-端的锌指结构域(氨基酸250-510)来识别序列特异性的DNA分子.INSM1的C-端包含有5个串联的锌指结构域,然而这些结构域的结构及其如何识别DNA的分子机制目前仍不清楚,通过重组构建的质粒pET-32m-INSMl(424-497)表达的蛋白质(氨基酸424-497)包含了最后两个锌指结构域4和5,简称为ZF(4-5).该文详细研究了蛋白质ZF(4-5)的诱导表达条件,得到了较高产率的纯化蛋白.核磁共振(NMR)谱和圆二色谱(CD)揭示了Zn~(2+)对稳定锌指蛋白结构的必要性,以及C2H2-Zn~(2+)结合的组氨酸呈现为δ-异构方式.

关 键 词:液体核磁共振(solutionNMR)  锌指蛋白  表达与纯化  结构与功能

Expression,Purification and Characterization of the Zinc-Finger(4-5) Domain in Human Protein INSM1
Abstract:
Keywords:solution NMR  zinc finger domain  protein expression and purification  structure and function
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