| 人红细胞20S蛋白酶体的蛋白质组学表征及不同来源20S蛋白酶体异质性的研究 |
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| 引用本文： | 陈国强,刘辉,张海婧,邓艳春,李智立.人红细胞20S蛋白酶体的蛋白质组学表征及不同来源20S蛋白酶体异质性的研究[J].分析化学,2009,37(12). |
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| 作者姓名： | 陈国强 刘辉 张海婧 邓艳春 李智立 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院基础医学研究所,北京协和医学院基础学院,北京,100005 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，863计划，高等学校博士学科点专项科研基金 |
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| 摘 要： | 通过整合差速离心和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)技术,建立了能有效分离20S蛋白酶体(20S core particle,CP)的方法.与传统纯化方法比较,此方法具有经济、快速的特点,并且能够对不同组织细胞来源的CP进行分离.利用本方法对人红细胞来源的CP亚基进行了2-DE分离和MALDI-TOF/TOF MS鉴定.结果显示,可鉴定出33个具有不同相对分子量和等电点的蛋白点,此数量远远多于CP亚基的14种.此外,利用非变性/变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(native/SDS-PAGE)技术,比较了来源于酵母、小鼠肝脏、人红细胞、人胰腺癌细胞系SW1990和PANC-1的CP及其亚基在电泳行为方面的差异,进行了蛋白酶体异质性初探.
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| 关 键 词： | 蛋白酶体 异质性 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 差速离心 细胞系 |
Proteomic Characterization of Human Erythrocyte 20S Proteasome and Analysis of Species-dependent 20S Proteasome Heterogeneity |
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| CHEN Guo-Qiang,LIU Hui,ZHANG Hai-Jing,DENG Yan-Chun,LI Zhi-Li.Proteomic Characterization of Human Erythrocyte 20S Proteasome and Analysis of Species-dependent 20S Proteasome Heterogeneity[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2009,37(12). |
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| Authors: | CHEN Guo-Qiang LIU Hui ZHANG Hai-Jing DENG Yan-Chun LI Zhi-Li |
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| Institution: | CHEN Guo-Qiang,LIU Hui,ZHANG Hai-Jing,DENG Yan-Chun,LI Zhi-Li (Institute of Basic Medical Sciences,CAMS&PUMC,Beijing 100005) |
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| Abstract: | A method was developed for purification of 20S proteasome(20S core particle,CP) by combining differential centrifugations with nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis(native-PAGE),irrespective of species origins of CPs.CP purified from human erythrocytes was subjected to proteomic analysis by two-dimensional gel electrophoresis(2-DE) and matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry(MALDI-MS),revealing 33 spots of subunit isoforms with different molecular weights and isoelectric poi... |
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| Keywords: | Proteasome heterogeneity nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis differential centrifugation cell line |
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