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| 半合成人肿瘤坏死因子cDNA的构建及其在大肠杆菌中的高表达 | |
| 作者姓名： | 李昌本 柴常星 谢毅 吕群 柴建华 喻红 陈春妹 林丽珠 王启松 李宗林 周娅 李育阳 赵寿元 |
| 作者单位： | 遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所，遗传工程国家重点实验室复旦大学遗传学研究所 上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433，上海 200433 |
| 摘 要： | 本文报道从人基因文库中分离淋巴毒素(LT)基因的同时,克隆了肿瘤坏死因子(TNF)基因,这两个基因相距1.2kb.TNF基因有4个外显子,第4外显子编码TNF成熟蛋白157个氨基酸中的140个.将第4外显子切出一部分,再人工合成编码其余氨基酸的DNA片段,两者连接构成重组的人TNF(rhTNF)cDNA,并克隆在大肠杆菌表达载体中成功地得到表达.5 l罐发酵得菌体约20g/l,以L929为靶细胞测定细胞毒活性为10~6-10~7单位/ml.高压液相色谱仪分离纯化rhTNF,冻干后得白色粉剂.测定了这种rhTNF的氨基端的10个氨基酸序列,证明与天然的人TNF完全相同.纯度约为95％. |
| 关 键 词： | 半合成重组人肿瘤坏死因子(rhTNF)cDNA TNF细胞毒活性 rhTNF cDNA在大肠杆菌中表达 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |