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基于单克隆抗体的滴滴涕、硫丹和水胺硫磷酶联免疫检测方法研究
引用本文:丁园,秦爽,刘伟美,王鸣华,华修德.基于单克隆抗体的滴滴涕、硫丹和水胺硫磷酶联免疫检测方法研究[J].分析测试学报,2021,40(5):662-671.
作者姓名:丁园  秦爽  刘伟美  王鸣华  华修德
作者单位:南京农业大学 植物保护学院,江苏 南京 210095
基金项目:国家重点研发计划(2017YFF0210200)
摘    要:该研究制备了滴滴涕、硫丹和水胺硫磷的单克隆抗体。利用商业化的辣根过氧化物酶标记羊抗鼠抗体作为检测二抗,分别建立了3种农药的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。在最优条件下,ic-ELISA对滴滴涕、硫丹和水胺硫磷检测的半数抑制浓度和检出限分别为10.72 ng·mL-1和1.85 ng·mL-1、9.69 ng·mL-1和2.19 ng·mL-1及13.26 ng·mL-1和3.04 ng·mL-1。特异性评价结果显示,滴滴涕对o,p-滴滴伊、p,p-滴滴伊和o,p-滴滴涕的交叉反应率(CR)为9.0%~33.4%;硫丹对艾氏剂、氯丹、狄氏剂、β-硫丹和α-硫丹的交叉反应率为17.4%~84.3%;水胺硫磷对其6种结构类似物均无明显交叉反应(CR<0.1%)。所建立的方法对稻田水、土壤、苹果和香蕉样品中滴滴涕、硫丹和水胺硫磷的平均加标回收率和相对标准偏差分别为71.4%~93.3%和3.8%~9.6%、74.0%~97.4%和3.0%~11%及70.8%~97.0%和4.2%~12%。同时,ic-ELISA对滴滴涕、硫丹和水胺硫磷的检测结果与色谱仪器具有较好的一致性。上述结果表明,该研究制备的滴滴涕、硫丹和水胺硫磷的单克隆抗体可用于建立ic-ELISA,且具有较好的灵敏度和准确性。

关 键 词:间接竞争酶联免疫吸附分析  滴滴涕  硫丹  水胺硫磷  农药残留  单克隆抗体

Research on an Enzyme linked Immunosorbent Assay for Dichlorodiphenyltrich loroethane,Endosulfan and Isocarbophos Based on Monoclonal Antibodies
DING Yuan,QIN Shuang,LIU Wei-mei,WANG Ming-hu,HUA Xiu-de.Research on an Enzyme linked Immunosorbent Assay for Dichlorodiphenyltrich loroethane,Endosulfan and Isocarbophos Based on Monoclonal Antibodies[J].Journal of Instrumental Analysis,2021,40(5):662-671.
Authors:DING Yuan  QIN Shuang  LIU Wei-mei  WANG Ming-hu  HUA Xiu-de
Institution:College of Plant Protection,Nanjing Agricultural University,Nanjing210095,China
Abstract:
Keywords:indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay  dichlorodiphenyltrichloroethane  endosulfan  isocarbophos  pesticide residue  monoclonal antibody
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