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基于核酸分子杂交的免疫芯片抗体固定新方法
引用本文:沙莎,殷赟,高晓莲,黄庄荣,余挺,郑晓冬.基于核酸分子杂交的免疫芯片抗体固定新方法[J].分析化学,2013,41(2):199-204.
作者姓名:沙莎  殷赟  高晓莲  黄庄荣  余挺  郑晓冬
作者单位:1. 浙江大学生物系统工程与食品科学学院,杭州,310058
2. 美国休斯顿大学化学系,德克萨斯州77004
3. 浙江大学农业与生物技术学院,杭州,310058
基金项目:国家863计划目标导向性课题(No.2007AA10Z436);国家自然科学基金(No.30972051);国家转基因生物新品种培育重大专项(No.2009ZX08012-010B)资助
摘    要:基于核酸分子杂交原理构建了一种新型抗体固定方法.先将抗体与寡核苷酸单链交联,再将两者的复合物与固相载体表面上的互补寡核苷酸链结合,从而将抗体固定到载体的表面.在磁珠表面对该固定方法进行实验,证明了方法的可行性.以本方法构建了针对转基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3标记二抗对其探针固定效果进行分析,并且在芯片上对Bt Cry1 Ac蛋白进行梯度浓度检测试验.结果表明,以本方法构建的抗体芯片,探针分布具有良好的特异性;探针层分布均匀,非特异吸附小;检测灵敏度达到0.01 ~ 0.05 μg/L;此外,通过杂交核酸双链的解离成功实现了芯片的再生,有助于解决传统抗体固定方法中芯片不可再生的问题.

关 键 词:免疫芯片  抗体固定  抗体-寡核苷酸复合物  核酸杂交

A New Method for Immobilizing Antibody Probes in Immunochips Based on DNA Hybridization
SHA Sha , YIN Yun , GAO Xiao-Lian , HUANG Zhuang-Rong , YU Ting , ZHENG Xiao-Dong.A New Method for Immobilizing Antibody Probes in Immunochips Based on DNA Hybridization[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2013,41(2):199-204.
Authors:SHA Sha  YIN Yun  GAO Xiao-Lian  HUANG Zhuang-Rong  YU Ting  ZHENG Xiao-Dong
Institution:1(College of Biosystems Engineering and Food Science,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China) 2(Department of Chemistry,University of Houston,Houston,Texas 77004,USA) 3(College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China)
Abstract:
Keywords:
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